病理實驗外包,南京英瀚斯可開展冰凍切片免疫熒光染色1. 冰凍切片室溫晾干15 min,可用含10%正常山羊血清的PBS室溫封閉切片1小時(此步可不洗)。2. 滴加適當比例稀釋的一抗或一抗工作液(抗體的量視組織大小而定,原則是可以均勻覆蓋組織面,且保證整個過程中不會使組織干涸)。3. 將切片放在加了PBS的免疫組化濕盒,室溫孵育2小時或4℃過夜。4. 第二天先將濕盒放到37℃回溫1 h,然后吸取片上的一抗進行回收,將切片插入到小染缸PBS沖洗。5. 滴加用PBS稀釋好的二抗(避光)置于分子雜交箱中37℃孵育1小時。回收二抗,切片置于染缸內,PBS洗5 min×3次。6. 滴加DAPI工作液染核,室溫10~20 min(工作濃度0.1%染色15 min)。7. 回收DAPI,滴加5-10 μl 抗熒光衰減封片劑或中性樹膠,用處理干凈的蓋玻片封片,即可到熒光顯微鏡或者共聚焦顯微鏡下觀察拍照。8. 做好的片放在切片盒內,置于4℃冰箱,可保存一周左右。南京英瀚斯,專業的病理實驗外包服務平臺。天津組織病理實驗外包檢測
病理實驗外包,病理染色常見染色介紹TTC染色:TTC染色是TTC和活細胞線粒體內的琥珀酸脫氫酶反應,生成紅色的甲月贊,用來表示細胞的活力。配制多為2%,染色要避光,37度條件下,它是評價腦缺血損傷常用的指標。TTC(2,3,5—氯化三苯基四氮唑)是脂溶性光敏感復合物,1894年初次合成用來檢測種子的生存能力,1958年開始用來染色檢測哺乳動物組織的缺血梗塞。它是呼吸鏈中吡啶—核苷結構酶系統的質子受體,與正常組織中的脫氫酶反應而呈紅色,而缺血組織內脫氫酶活性下降,不能反應,故不會產生變化呈蒼白。TTC可以被活細胞中的具有還原活性的酶(好像主要是琥珀酸脫氫酶)還原生成粉紅色的還原產物,所以活組織部分呈現粉紅色,而死亡的細胞的還原酶的活力已經消失,因此TTC不能被還原,所以死亡的組織呈現白色。南京英瀚斯,專業的病理染色實驗服務平臺。貴州專門做病理實驗外包哪家好南京英瀚斯生物-病理實驗外包檢測_疾病醫學模型_。
病理實驗外包,病理染色常見染色介紹尼氏染色:神經元細胞體包括一個具有皺褶核膜的大細胞核、稀疏的染色質和一個明顯的核仁。在細胞體中細胞質是尼氏顆粒,即能夠代替粗面內質網并在很多神經元中產生特異的斑點狀嗜堿性表現的嗜堿性顆粒。尼氏顆粒可以用很多染色來顯示如中性紅、亞甲基藍、甲苯胺藍和甲基紫等。染色的變異、pH和分化的時間使一些染色既可以只突出尼氏物質,也可以顯示神經元的細胞核和神經膠質。各種神經細胞內都含有尼氏體,但其形狀、數量、分布位置常常不同。尼氏體也存在于樹突中,但不在于軸突和胞體的軸丘。尼氏體會因為生理狀態的變化而變化,尼氏體是神經元內蛋白質合成的重要部位,當神經元受到刺激后,胞體內的尼氏體會明顯減少。通常尼氏體能被堿性染料如硫堇、亞甲藍、甲苯胺藍和焦油紫等染料染成紫藍色。尼氏染色可清晰的顯示出尼氏小體定位,判斷神經細胞是否受損。南京英瀚斯,專業的病理染色實驗服務平臺。
病理實驗外包常見染色介紹MASSON染色:masson染色是指用兩種或三種陰離子染料混合,膠原纖維呈藍色,肌纖維呈紅色。用來顯示組織中纖維以及炎性因子的染色方法之一。Masson染色是顯示膠原纖維分布的經典染色方法,利用染色的兩種不同分子量的陰離子在組織滲透性的差異,根據不同的滲透性能差異,區分出不同的組織成分。經Masson染色后,膠原纖維呈現藍色,肌纖維紅色,細胞核藍黑色。Masson染色可用作心梗模型、肺纖維化、肝纖維化以及腎纖維化模型的定性與膠原纖維沉積的半定量分析。南京英瀚斯,專業的病理染色實驗服務平臺。病理實驗外包關鍵知識,你必須知道的那些事,南京英瀚斯生物。
1.取材與固定固定劑同時具有硬化細胞組織的作用,使制片便于進行。2.洗滌與脫水洗滌是把深入組織中的固定劑洗去,防止染色中的結晶產生,驅除組織中的水分,利于透明和浸蠟。3.透明與浸蠟(透蠟)脫水后的組織中水分已被透明劑所代替,而有利于浸蠟。浸蠟的目的是使組織有一定的硬度而有利于切片和細胞組織保持一定的生活時狀態。4.包埋與切片用石蠟和其他包埋劑(組織填充劑作包埋劑)包繞一定的形狀以便于切片。將包埋好的組織塊用切片機切成一定的厚度(厚度以um計)。5.貼片(展片、撈片)和染色將已且妥的切片在溫水中展平整后用載玻片貼上,稍晾干后再烤片。染色可使細胞和組織被染上不同的顏色而產生一定的折射率,便于顯微鏡觀察。6.切片染色后用膠類物質將其封固,便于長期保存。南京英瀚斯,專業的病理染色實驗服務平臺。南京病理實驗外包檢測,優先南京英瀚斯。天津組織病理實驗外包檢測
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病理實驗外包,病理染色熒光原位雜交技術詳細介紹1、原理FISH(fluorescenceinsituhybridization)技術是一種重要的非放射性原位雜交技術。它的基本原理是:如果被檢測的染色體或DNA纖維切片上的靶DNA與所用的核酸探針是同源互補的,二者經變性-退火-復性,即可形成靶DNA與核酸探針的雜交體。將核酸探針的某一種核苷酸標記上報告分子如生物素、地高辛,可利用該報告分子與熒光素標記的特異親和素之間的**化學反應,經熒光檢測體系在鏡下對待測DNA進行定性、定量或相對定位分析。2、實驗流程FISH樣本的制備→探針的制備→探針標記→雜交→(染色體顯帶)→熒光顯微鏡檢測→結果分析。3、特點原位雜交的探針按標記分子類型分為放射性標記和非放射性標記。用同位素標記的放射性探針優勢在于對制備樣品的要求不高,可以通過延長曝光時間加強信號強度,故較靈敏。缺點是探針不穩定、自顯影時間長、放射線的散射使得空間分辨率不高、及同位素操作較繁瑣等。南京英瀚斯,專業的病理染色實驗服務平臺。天津組織病理實驗外包檢測
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