HE染色病理技術中**常用的一種方法,通過它可以做出病理診斷和發現尋求別的輔助方法,以達到準確,完整的病理診斷。一、染色目的 病理學的所有切片,都必須通過一種以上的染料,通過各種不同的方法,將切片中各種不同的物質,在不同染液的作用下,將其顯示出來,使之在光學顯微鏡下,能夠完全的觀看各種結構。例如,HE染色,好質量的切片可以清晰地顯示出多不同的結構,細胞核著藍黑色,細胞漿著粉紅色,軟骨著藍色等。清晰的結構為診斷提供的依據,因此,染色技術也是病理技術中的重要組成部分,必須不斷地總結,方能提高。HE染色試驗技術及注意事項。內蒙古性價比高的HE染色多少錢
HE染色法,。蘇木精染液為堿 ,主要使細胞核內的染色質與胞質內的核糖體著紫藍色 ;伊紅為酸染料 ,主要使細胞質和細胞外基質中的成分著紅色。而線粒體用HE染色不可見,活細胞通常要求活細胞近似無色線粒體需要用健那綠來染色,再在高倍鏡下觀察。從人或動物新鮮尸體上取下塊(一般厚度不超過0.5厘米)投入預先配好的固定液中(10%福爾馬林,Bouin氏固定液等)使、細胞的蛋白質變凝固,以防止細胞后的自溶或細菌的分解,從而保持細胞本來的形態結構。一般用由低濃度到高濃度酒精作脫水劑,逐漸脫去塊中的水份。再將塊置于既溶于酒精,又溶于石蠟的透明劑二甲苯中透明,以二甲苯替換出塊的中酒精,才能浸蠟包埋。山西比較好的HE染色分析HE染色 ,石蠟切片技術里常用的染色法之一。
HE染色法的話,不能準確說出細胞器的顏色,實驗記錄或考試時只能說染色效果為 :細胞核藍色,胞質、肌纖維、膠原纖維和紅細胞呈深淺不一的紅色。或者詳細說明如下:細胞核被蘇木精染成鮮明的藍色,軟骨基質、鈣鹽顆粒呈深藍色,粘液呈灰藍色。細胞漿被伊紅染成深淺不同的粉紅色至桃紅色,胞漿內嗜酸性顆粒呈反光強的鮮紅色。膠原纖維呈淡粉紅色,彈力纖維呈亮粉紅色,紅血球呈橘紅色,蛋白性液體呈粉紅色。蘇木精染液為堿性 ,主要使細胞核內的染色質與胞質內的核糖體著紫藍色 ;伊紅為酸性染料 ,主要使細胞質和細胞外基質中的成分著紅色。
HE染色組織樣本水化:將浸泡過二甲苯的待測組織樣本先放入無水乙醇中浸泡5min,使脫蠟時用的二甲苯可以被洗脫出去,使水可以進入組織中;再依次置于95%、85%、70%乙醇中各浸泡5min以達到充分水化的效果。組織切片蘇木素染色、分化與反藍:將水化后的組織樣本的切片使用PBS溶液浸泡清洗,每次浸泡5min,總共清洗3次。之后用移液***吸取已經預先配制好的蘇木素染色液,每個組織切片滴加100ul,充分染色10min。染色完畢后使用蒸餾水洗去多余的蘇木素染色液。然后再使用1%的鹽酸乙醇進行分化,使細胞核中結合過多的染液和細胞漿中的多余的染液被除去。分化完成后,再用雙蒸水將組織切片沖洗干凈。為了使蘇木素染藍色,使用弱堿性的促藍液加入組織切片中,讓細胞核染藍色。反藍結束后先用清水進行清洗,再用雙蒸水將組織切片沖洗干凈。冰凍組織切片的HE染色。
HE染色注意事項:1.組織切片的脫蠟步驟應徹底,否則無論進行那種染色都會發生困難。脫蠟時間要充分,若溶蠟劑使用過久應及時更換以免效率降低,若室溫過低,可將溶蠟劑置于溫箱中進行脫蠟。 2.蘇木素染液使用一段時間后表面易出現亮晶狀飄浮物,這可能是液體表面的過氧化物,必須過濾除去,以防沉渣污染組織切片。蘇木素液一般染過三、四百張切片后,著色力會減弱,著色不鮮艷,呈灰藍色時應及時更換新液。 3.染色的時間長短需依據:染劑對組織的染色作用,室溫條件,切片厚薄,固定液的類別,染液的新舊而進行調節。所以在染色時必須使用顯微鏡觀察染色程度以利掌握時間。 4.分化十分重要。分化步驟的準確也是染色成敗的關鍵,若分化失當則必然引起染色不勻或過淡,過深等現象,因此分化后一定要鏡檢,觀察胞核是否清晰,胞漿呈淡白色。否則需再次分化,不然一旦復染后,組織會呈紫藍色即“藍蓋紅”現象。 5.還原液不宜過濃,若堿性太強易使組織脫落故以淡為宜。 6.伊紅宜淡染,復染過深胞核會不清晰,影響鏡檢。 HE染色取材和樣本保存方式。山西比較好的HE染色分析
HE染色切片知識以及如何做出漂亮的切片。內蒙古性價比高的HE染色多少錢
HE染色攻略:HE染色又稱為蘇木精-伊紅染色,染色后組織或細胞可以借助普通光學顯微鏡觀察與鑒別細胞凋亡與細胞壞死的一種染色方法。這種方法適用范圍***,對組織細胞的各種成分都可著色,便于***觀察組織構造,而且適用于各種固定液固定的材料,染色后不易褪色可長期保存。經過HE染色,細胞核被蘇木素染成藍紫色,細胞質被伊紅染色呈粉紅色。可以觀察細胞結構、組織層次等等。首先切片組織是否完整,組織有無損傷;然后看切片有無刀痕;***細胞核是否清晰可見,胞核與包漿要對比鮮明。內蒙古性價比高的HE染色多少錢