免疫組化的特點:
1)特異性強。免疫學的基本原理決定抗原與抗體之間的結合具有高度特異性,因此,免疫組化從理論上講也是組織細胞中抗原的特定顯示,如角蛋白(keratin)顯示上皮成分,LCA顯示淋巴細胞成分。只有當組織細胞中存在交叉抗原時,才會出現交叉反應。
2)敏感性高。在應用免疫組化的起始階段,由于技術上的限制,只有直接法、間接法等敏感性不高的技術,那時的抗體只能稀釋幾倍、幾十倍;現在由于ABC法或SP三步法的出現,使抗體稀釋上千倍、上萬倍甚至上億倍仍可在組織細胞中與抗原結合,這樣高敏感性的抗體抗原反應,使免疫組化方法越來越方便地應用于常規病理診斷工作。
3)定位準確、形態與功能相結合。該技術通過抗原抗體反應及呈色反應,可在組織和細胞中進行抗原的準確定位,因而可同時對不同抗原在同一組織或細胞中進行定位觀察,這樣就可以進行形態與功能相結合的研究,對病理學領域開展深入研究是十分有意義的。
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免疫組化的發展路程?在臨床病理診斷中,免疫組織化學(IHC)是一種很重要的技術和手段,從20世紀70年代開始,免疫組化技術就應用于病理診斷,對于診斷cancer、cancer分類、判斷預后產生了巨大的影響,同時也擴展了人們對于各種疾病及cancer形成過程的認識,提高了病理診斷與研究水平。但是,隨著免疫組化的廣泛應用,發現免疫組化技術存在一些局限性。深入研究免疫組化原理和技術,必須熟悉各種抗體真陽性反應部位,實現實驗室間免疫組化標準化,使免疫組化在病理診斷中發揮比較大的輔助作用。如果您有免疫組化相關的實驗,可以與我們英瀚斯生物進行聯系。云南靠譜免疫組化哪家好做好免疫組化,你需要了解這些!
免疫組化技術應用于臨床cancer良惡性的判斷,英瀚斯生物為您介紹。對于反應性增生還是cancer性增生,可用免疫球蛋白(Ig)的輕鏈抗體檢測B淋巴細胞增生的單克隆或多克隆性來區別。在濾泡反應性增生時,濾泡反應中心的細胞不表達細胞凋亡蛋白(bcl-2),bcl-2陰性;而在濾泡性淋巴瘤中,由于90%以上cancer性濾泡細胞有bcl-2的高表達,bcl-2陽性。而增殖細胞核抗原(PCNA),周期素(Cycling),核抗原(Ki-67)通過對cancer細胞增生的程度作出評價,從而提示增生細胞的良惡性。
免疫組化的抗原修復
很多抗原的可視性可以通過抗原修復來提高,抗原修復可以打破福爾馬林固定時形成的蛋白質交聯,從而使被掩藏的抗原顯現出來。抗原修復技術包括不同時間長度的加熱或者利用蛋白酶來做酶消化,例如蛋白酶K,胰蛋白酶或胃蛋白酶。加熱的方法通常會用到微波爐,高壓鍋,蒸箱或水浴。將樣品在接近100°C高溫加熱20分鐘后再冷卻同等的時間。**常用的抗原修復液有a)檸檬酸鹽緩沖劑,pH6.0,b)Tris-EDTA,pH9.0和c)EDTA,pH8.0.如需要可用檸檬酸鹽緩沖劑做抗原修復:檸檬酸鹽緩沖劑配方:10mM檸檬酸鈉,0.05%Tween-20,pH6.0或10mM檸檬酸,0.05%Tween-20,pH6.0將含有檸檬酸鈉或檸檬酸鹽緩沖劑的染色盤放到蒸箱或者水浴中,預熱到95-100°C。將切片浸沒于染色盤中。蓋子虛掩,孵育20-40分鐘(研究者需自己決定比較好的孵育時間)。關掉蒸箱或水浴,將染色盤置于室溫下,讓切片冷卻20分鐘。在TBS-Tween-20中漂洗切片2次,每次2分鐘。開始封閉步驟。 英瀚斯生物,專業病理染色切片平臺,免疫組化效果好!
臨床應用中,藥物靶點免疫組化,英瀚斯生物專業做實驗外包服務,一站式醫學科研平臺。免疫組化及分子病理學方法在疾病診斷中只只起輔助醫療的作用,而藥物病理學是用病理學的方法確定藥物醫療的靶點、評價藥物醫療的療效、預測藥物醫療的反應,因此藥物靶點免疫組化屬“單獨的診斷”。因此對于對照的設置、質量的控制均需要更高的要求,如對試劑的要求,不同于一般的診斷試劑,應按對藥物管理的要求操作。HER2蛋白著色3+者可作為臨床醫生建議患者接受曲妥珠單抗等藥物醫療的依據。英瀚斯生物,組織包埋、切片、染色、免疫組化拍照、報告分析,一站式搞定!云南小鼠免疫組化推薦
免疫組化檢測多少錢?四川做得好的免疫組化可以做什么
免疫組化的局限性。靈敏度高、精確性和特異性是一種理想的cancer標記物必須具有的,但至今所發現的cancer標記物還沒有能完全滿足這些標準。某些正常細胞也分泌一些cancer標記物,因此cancer細胞學并不是單獨產生一種標記物,即選用一組抗體比單一抗體更有利。在cancer診斷中評估免疫組化的局限性主要在抗體特異性和解釋方面。在免疫組化操作中都必須有適當的陽性與陰性對照,作為技術完整性質量控制,如對照組被忽略或不理想時,免疫組化染色的結果要謹慎對待,免疫組化的正確結果不僅要依靠技術步驟上規范化操作,而且有賴于正確的解釋,在報告免疫組化染色結果時不應孤立地解釋,應考慮到診斷與鑒別診斷、所應用的抗體特性、所研究組織性質,同時還要注意假陽性與假陰性結果的干擾。四川做得好的免疫組化可以做什么
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