為什么超速離心提取外泌體看不到沉淀？答：這種問題通常有三種可能性，其一：使用的細胞上清或者血清量太低，從而造成了這樣的結果。其二：使用了不透明的超速離心管，一般來說外泌體產量都比較小，所以凡是不透明的管子，基本都是比較難見到明顯沉淀的，可以當做有沉淀，然后操作下去即可。其三：使用了角轉。部分品牌離心機的角轉管壁粘附性比較低，超離結束沒多久沉淀就會滑落下去，所以請在離心結束時趕緊去收樣。外泌體的角色：1、外泌體發揮功能并一定需要受體細胞攝入外泌體：外泌體的膜蛋白有可能與細胞膜蛋白作用，活躍細胞內通路。2、外泌體的角色之一：細胞-細胞通訊，比如抗原遞呈。外泌體的膜蛋白有可能與細胞膜蛋白作用，活躍細胞內通路。腦脊液外泌體Dir

外泌體生物學功能：1、在心血管系統中，據報道，源自人胚胎干細胞（ESC）的間充質干細胞（MSC）外泌體可減少小鼠和豬模型中的心肌缺血和再灌注損傷；2、在免疫系統中，據報道趨化因子受體CCR5通過外泌體在細胞之間轉移是細胞人類免疫缺陷病毒傳染的一種機制；3、在中樞的神經系統（CNS）中，外泌體的作用是消除廢物并介導大腦活動，從而阻止神經退行性疾病的發病機理；迄今為止，尚未完全發現調節外泌體-細胞結合的途徑。然而，比較明顯，其結合過程從外泌體識別受體細胞PM上的特定受體開始。膜受體的識別是外泌體細胞反應的基礎，它可能活躍受體并隨后導致相關信號通路的活躍，外泌體與PM融合或外泌體的內吞作用，從而導致蛋白質和RNA直接釋放到受體細胞中。乳液提取試劑盒服務采用電子顯微鏡檢測外泌體時對樣品的預處理和制備要求較高，外泌體的提取方法和品質會對電鏡結果造成影響。

AFC自動收集器是將qEV分離法這一過程自動化的儀器，將用來收集外泌體樣本的微量離心管放置在AFC的中間轉盤內，根據稱重精確測量流體體積，可精確的測量到樣品中每一個液滴的重量并精確測量總重量。將在空隙體積之前從qEV柱洗脫的流體收集到AFC轉盤的單獨中心孔中并送至廢液桶，避免將不需要的空隙部分收集到微量離心管中。在提取期間，當達到設定的提取體積后，轉盤會自動旋轉到下一個微量離心管繼續收集，到收集完成后自動停止。微滴式數字PCR技術不佳有效提高了核酸分子的擴增效率，而且由于采用微滴計數的方法進行定量，可以不依賴與RT-PCR的熒光信號和Ct值，對所測樣品中的核酸分子進行一定定量。從研究上來講并不太嚴格區分外泌體或微泡。

外泌體的脂質和蛋白質組成可以影響它們的藥代動力學特性，它們的天然成分可能在提高生物利用度和減少不良反應方面發揮作用。除了它們的診療潛力，外泌體也有幫助疾病診斷的潛力。它們已經在所有的生物液體中被報道，并且通過生物液體取樣(液體活組織檢查)可以比較容易地獲得外泌體的復雜貨物的組成。基于外泌體的液體活檢在病癥和其他疾病的診斷和確定預后方面具有潛在的應用價值。疾病的進展和對診療的反應也可以通過外泌體的多組分分析來確定的。外泌體內主要含有核酸、蛋白質和脂質等，可作為疾病診斷標記物、調控靶細胞功能、參與細胞生物學活動等。

外泌體的提取分離方法：1、超濾離心：由于外泌體是一個大小約幾十納米的囊狀小體，大于一般蛋白質，利用不同截留相對分子質量(MWCO)的超濾膜對樣品進行選擇性分離，便可獲得外泌體。超濾離心法簡單高效，且不影響外泌體的生物活性，是提取細胞外泌體的一種新方法。2、磁珠免疫法：外泌體表面有其特異性標記物（如CD63、CD9蛋白），用包被抗標記物抗體的磁珠與外泌體囊泡孵育后結合，即可將外泌體吸附并分離出來。磁珠法具有特異性高、操作簡便、不影響外泌體形態完整等優點，但是效率低，外泌體生物活性易受pH和鹽濃度影響，不利于下游實驗，難以普遍普及。需要開發大規模生產質量可控的外泌體并快速純化外泌體的技術和策略。組織外泌體提取試劑盒產品標準

外泌體發揮功能：將細胞或組織中多余的或者有害的分子排除，這為研究生物標志物提供了可能。腦脊液外泌體Dir

外泌體的來源與特征：外泌體是一種存在于細胞外的多囊泡體，通過細胞內吞泡膜向內凹陷形成，其大小均一，直徑為40-100nm，密度為1.10-1.18g/mL。外泌體可由間充質干細胞、淋巴細胞和腫細胞細胞等多種類型細胞主動分泌釋放。外泌體內主要含有核酸、蛋白質和脂質等，可作為疾病診斷標記物、調控靶細胞功能、參與細胞生物學活動等。例如：含有miR-140-5p的滑膜間充質干細胞來源外泌體(SMSC-Exo影響軟骨組織再生；骨髓間充質干細胞來源外泌體攜帶的miR-196a可調節成骨細胞分化促進大鼠顱骨缺損的骨再生。外泌體作為核酸的藥物遞送載體。腦脊液外泌體Dir

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