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海洋生物外泌體circRNA測序

來源: 發布時間:2023-05-05

在20世紀80年代,外泌體被描述為從網織紅細胞分泌的內體來源的囊泡。人們對這些細胞外囊泡的興趣逐漸增加,因為它們似乎參與了很多細胞過程。外泌體攜帶蛋白質、脂質和RNAs,介導體內不同細胞類型之間的細胞間通訊,從而影響正常和病理狀態。只有近,科學家才認識到將外泌體與其他類型的細胞外囊泡分開的困難,這排除了特定功能對不同類型分泌的囊泡的明確歸因。為了闡明這個復雜但正在發展的科學領域,該綜述著重于外泌體和其他分泌的細胞外囊泡的定義。討論了它們的生物發生,分泌及其后續的命運,因為它們的功能依賴于這些重要過程。外泌體屬于胞外囊泡類,除了外泌體之外細胞還分泌微泡以及其它的膜囊泡。海洋生物外泌體circRNA測序

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透射電子顯微鏡(TEM)和掃描電子顯微鏡(SEM)是用于評估外泌體形態、大小和表型的的兩種常見的電子顯微鏡。SEM和TEM均使用電子束產生高分辨率的亞微米顆粒放大圖像,以區分外泌體與殘留在樣品中相似大小的非外泌體顆粒,該方法還可用于檢查樣品的純度。TEM與SEM之間的區別在于檢測電子類別,在SEM中,電子與樣品中的粒子相互作用時會發生散射,捕獲并檢測散射的電子,從而生成粒子圖像。但是,在TEM中,不與粒子相互作用的電子穿過樣品,并使用熒光屏進行檢測。電子顯微鏡下外泌體大小不一,通常呈茶托樣的圓形或橢圓形。采用電子顯微鏡檢測外泌體時對樣品的預處理和制備要求較高,外泌體的提取方法和品質會對電鏡結果造成影響;另外樣品的準備階段比較復雜,不適合進行大量快速的測量;而且由于樣本經過了干燥、固定以及冷凍等預處理和制備過程,對生物樣本的結構會造成一定的破壞,從而影響觀察的效果,無法準確測量外泌體濃度。安徽植物外泌體鑒定磁珠免疫法分離的外泌體,生物活性易受pH和鹽濃度影響,不利于下游實驗,難以普遍普及。外泌體質譜外泌體的膜蛋白有可能與細胞膜蛋白作用,活躍細胞內通路。

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被特定部位的細胞獲取的瘤子外泌體可為腫細胞的轉移準備轉移前微環境。用肺轉傾向的腫細胞細胞來源的外泌體處理小鼠后可使骨轉傾向的腫細胞細胞重新定向。外泌體的蛋白質組學分析發現不同部位傾向性的腫細胞細胞來源的外泌體具有不同的整合素(integrin)表達譜,整合素α6β4和α6β1與肺轉有關,而整合素αvβ5與肝轉有關。敲低整合素α6β4和αvβ5可減少外泌體被靶部位細胞獲取,進而分別降低了肺和肝的轉移。進一步研究發現外泌體整合素被細胞獲取后活躍了Src的磷酸化和促炎的S100基因的表達。通過臨床數據分析顯示外泌體整合素可作為預測腫細胞轉移的部位傾向性的診斷指標。外泌體的提取的方式:PS親和法。

外泌體能攜帶多種生物活性分子循環于血液/體液中并介導長距離的細胞間通訊,中流來源外泌體富含的蛋白質、核苷酸、脂質等分子能夠反映其來源細胞的生理及病理狀態,外泌體特殊的脂質雙分子層結構能保護其內RNA等分子免于降解,因此,檢測中流外泌體成為液體活檢一個明顯優勢。臨床試驗研究表明,外泌體在多種疾病的早期診斷、療效和預后監測等方面都具備較好的應用價值,正逐漸成為臨床診療中新的、理想的生物標志物和可能的靶向藥物載體。隨著技術的進步,組學時代的到來,大規模蛋白質組學已經被聯合應用于篩選和揭示多種ai癥細胞外囊泡的標志物。外泌體的提取的方式:過濾離心。

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外泌體攜帶大量特異性的蛋白質(如細胞因子、生長因子)以及功能性的mRNAs、miRNAs等生物活性物質,在體內參與細胞通訊、細胞遷移、促血管新生和抗瘤子免疫等生理過程,與多種疾病的發生和進程密切相關。由于外泌體的特殊結構和功能,使得它具有潛在的應用價值,一方面可以作為診斷多種疾病的生物指標,另一方面也可以作為診療手段,未來有可能作為藥物的天然載體用于臨床診療。外泌體研究,應選用血漿還是血清?答:血清是血液凝固之后收集的液體,所以其中少了纖維蛋白原,凝血因子,以及多了比較多凝血產物。纖維蛋白原可轉化為纖維蛋白,具有凝血功能。在凝血過程中血小板會分泌大量的外泌體,有研究發現血清中有接近50%的外泌體來自額外的分泌。1983年,外泌體初次于綿羊網織紅細胞中被發現。細菌提取試劑盒步驟

外泌體可參與到機體免疫應答、抗原提呈、細胞遷移、細胞分化等方方面面。海洋生物外泌體circRNA測序

各種細胞粘著分子在外泌體膜表面表達,由其決定外泌體被運輸往哪一種細胞,期望開發利用該特征的新型DDS。外泌體在體液中十分穩定,同時外囊泡所含的蛋白質和RNA被外泌體的脂質雙層膜所包被也不會分解。另外在從體液中提取外泌體后,體液可長期穩定保存,因此外泌體有望成為臨床檢測的新型疾病生物標記。外泌體與各種疾病的相關性被檢測出,特別是血液中釋放的病細胞來源的外泌體,其與正常細胞來源外泌體在結構分子上的差異倍受矚目,并作為癥狀早期診斷技術,應用于與癥狀進展相關的研究。甚至人們期望將尿液中的外泌體作為腎臟、前列腺疾病、膀胱疾病的新型診斷標記,髓液中的外泌體作為腦內種瘤和神經退行性疾病的新型標記物。海洋生物外泌體circRNA測序

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