Vlassov等人發表的一篇外泌體的提取方法及組成的專利文獻中介紹，通過終濃度為8%的PEG6000與生物體液共孵育14h后，10000xg離心1h，可將直徑在30-150nm之間，且包含豐富RNA的外泌體沉淀下來。因此采用終濃度為8%的PEG6000沉淀血清中的外泌體，為了進一步純化胎盤相關外泌體，將獲得的包含外泌體的沉淀用PBS重新懸浮后，加入非線性蔗糖密度梯度層，10000xg超速離心5h，將分層液采用PEG6000進行2次沉淀。經過多次實驗反復驗證，確定同時表達外泌體標志蛋白分子及胎盤特異性蛋白分子的胎盤來源外泌體所在密度層。外泌體具有異質性，即使是同一種細胞分泌的外泌體都有可能具有比較大功能區別。湖北外泌體質譜

所有真核細胞類型包括造血細胞、上皮細胞、神經細胞、干細胞、脂肪細胞和病癥細胞均可在培養條件下分泌外泌體。體內所有體液，包括血液、唾液、腦脊液、腹水，甚至尿液中都可以分離得到外泌體。這些外泌體傳輸多種信號分子，包括蛋白質、信使核糖核酸（mRNA）和非編碼核糖核酸（RNA），其攜帶的分子可以被其他細胞吸收。因此，外泌體可以將生物信息轉移到相鄰細胞。這種細胞間通信不只涉及生理功能，還涉及一些疾病的發病機理，包括瘤、心血管疾病和神經退行性疾病等。安徽外泌體熒光標記度梯度離心法，用此種方法分離到的外泌體純度高。

瘤釋放的外泌體可以通過削弱免疫效應細胞的反應和激發免疫抑制細胞的擴增，來營造一個免疫抑制的環境。瘤釋放的外泌體可以替代瘤細胞接受免疫系統的攻擊，從而幫助瘤細胞逃過免疫系統的識別。瘤釋放的外泌體可以引發炎癥，利用基質浸潤細胞的反應營造出利于瘤生長的微環境。研究表明，在過去短短的5年里，對外泌體的研究已經取得了比較好的的進展。如今，收集并分析瘤釋放的外泌體已經成為液體活檢的一個重要研發方向。靶向瘤釋放外泌體的治理策略將對改善病癥患者的命運發揮出舉足輕重的影響。

獲得囊泡粒徑分布的兩種方法動態光散射(DLS)和納米顆粒跟蹤分析(NTA)都被廣fan應用于外泌體顆粒數目和粒徑分布的測量，但兩種方法也各有不足。動態光散射法中散射光強度依賴于顆粒質量(體積)，混合體系中大囊泡的存在(即使只有很少的量)將嚴重影響測量結果，因此動態光散射法更適用于單分散體系。而且動態光散射法所得的結果強烈依賴于所應用的數學算法。而采用納米顆粒跟蹤分析儀對不同粒徑范圍的囊泡進行檢測時，為了得到準確的濃度和粒徑信息，需要根據所要測量的顆粒粒徑范圍對儀器分別校準，操作繁瑣。受檢測靈敏度所限，納米顆粒跟蹤分析儀適用于粒徑范圍50nm～1μm的顆粒，粒徑小于50nm的外泌體無法檢測。除此之外，兩種方法都依賴光散射和粒子的布朗運動進行分析，難以區分合成的納米材料、大蛋白質聚合體和生物囊泡?；顑鹊耐饷隗w動態（哪個外泌體遷移至何處）也會成為今后需要努力研究的重要課題。

各種細胞粘著分子在外泌體膜表面表達，由其決定外泌體被運輸往哪一種細胞，期望開發利用該特征的新型DDS。外泌體在體液中十分穩定，同時外囊泡所含的蛋白質和RNA被外泌體的脂質雙層膜所包被也不會分解。另外在從體液中提取外泌體后，體液可長期穩定保存，因此外泌體有望成為臨床檢測的新型疾病生物標記。外泌體與各種疾病的相關性被檢測出，特別是血液中釋放的病細胞來源的外泌體，其與正常細胞來源外泌體在結構分子上的差異倍受矚目，并作為癥狀早期診斷技術，應用于與癥狀進展相關的研究。甚至人們期望將尿液中的外泌體作為腎臟、前列腺疾病、膀胱疾病的新型診斷標記，髓液中的外泌體作為腦內種瘤和神經退行性疾病的新型標記物。隨著今后的研究發展，外泌體功能逐步清晰，并擴大臨床應用。湖北外泌體質譜

外泌體分析會引起何種生理作用，這是進一步研究的發展方向。湖北外泌體質譜

外泌體的提取方法：免疫磁珠法，這種方法可以保證外泌體形態的完整，特異性高、操作簡單、不需要昂貴的儀器設備，但是非中性pH和非生理性鹽濃度會影響外泌體生物活性，不便進行下一步的實驗。PS親和法，該方法將PS（磷脂酰絲氨酸）與磁珠結合，利用親和原理捕獲外泌體囊泡外的PS。該方法與免疫磁珠法相似，獲得的外泌體形態完整，純度較高。由于不使用變性劑，不影響外泌體的生物活性，外泌體可用于細胞共培養和體內注射。PS法可提取相當高純度的外泌體。色譜法，這種方法分離到的外泌體在電鏡下大小均一，但是需要特殊的設備，應用不寬泛。湖北外泌體質譜

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