外泌體在各種疾病的診斷和治理中的應(yīng)用研究火熱。外泌體的復(fù)雜性，為疾病檢測(cè)和監(jiān)測(cè)提供了一個(gè)多指標(biāo)的診斷窗口。此外，能夠向病變細(xì)胞輸送功能性物質(zhì)的特性使外泌體有潛力作為基因和藥物遞送的載體。有研究總結(jié)了從外泌體中篩選的生物標(biāo)志物，可用于疾病的診斷、預(yù)后及治理。外泌體在生物液體中寬泛分布，包括血液、尿液、唾液、胸腹水、腦脊液、膽汁、乳汁以及淚液等，其復(fù)雜的內(nèi)容物被認(rèn)為是疾病診斷的無(wú)創(chuàng)或微創(chuàng)生物標(biāo)志物，具有檢測(cè)包括病癥在內(nèi)的許多病理狀況的潛力，可以用于對(duì)心血管疾病和病癥等多種疾病的診斷和監(jiān)測(cè)。外泌體膜蛋白可以與靶細(xì)胞膜蛋白結(jié)合，進(jìn)而喚醒靶細(xì)胞細(xì)胞內(nèi)的信號(hào)通路。體液外泌體提取試劑盒方法

外泌體即細(xì)胞分泌的直徑約40-100nm的微小膜泡，多種細(xì)胞在正常及病理狀態(tài)下均可分泌外泌體。一開始被當(dāng)做細(xì)胞排泄物，但是近幾年，研究發(fā)現(xiàn)外泌體可謂是小身體大作用。種瘤發(fā)生轉(zhuǎn)移后，如何靶向呈遞藥物一直是種瘤醫(yī)治中的一個(gè)巨大挑戰(zhàn)。發(fā)表于NanoLett的一項(xiàng)研究中，研究人員利用外泌體制備藥物的遞送系統(tǒng)（LD-MDS），并取得成功。在這項(xiàng)研究中，研究人員將相關(guān)藥物錨定在活巨噬細(xì)胞膜上，細(xì)胞自身相關(guān)蛋白酶響應(yīng)開啟并將藥物轉(zhuǎn)載進(jìn)入外泌體，順利遞送至肺轉(zhuǎn)移灶并且轉(zhuǎn)化為納米囊泡和次級(jí)納米囊泡，促進(jìn)轉(zhuǎn)移性4T1病細(xì)胞的有效內(nèi)化和細(xì)胞死亡。之后，受損的4T1病細(xì)胞可以釋放次級(jí)納米囊泡和游離藥物分子，再破壞鄰近的病細(xì)胞。研究顯示，LD-MDS對(duì)體內(nèi)直徑小于100μm的肺轉(zhuǎn)移病灶顯示出優(yōu)異的靶向效率，并顯著壓制肺轉(zhuǎn)移。細(xì)胞外泌體提取試劑盒方法尚未完全發(fā)現(xiàn)調(diào)節(jié)外泌體細(xì)胞結(jié)合的途徑。

外泌體的提取分離方法：1、PEG-base沉淀法：聚乙二醇（PEG）可與疏水性蛋白和脂質(zhì)分子結(jié)合共沉淀，早先應(yīng)用于從血清等樣本中收集病毒，現(xiàn)在也被用來沉淀外泌體，其原理可能與競(jìng)爭(zhēng)性結(jié)合游離水分子有關(guān)。利用PEG沉淀外泌體存在不少問題：比如純度和回收率低，雜蛋白較多（假陽(yáng)性），顆粒大小不均一，產(chǎn)生難以去除的聚合物，機(jī)械力或者吐溫-20等化學(xué)添加物將會(huì)破壞外泌體等，因此發(fā)表文章時(shí)易受質(zhì)疑。2、試劑盒提取：近幾年來，市場(chǎng)上已出現(xiàn)各種商業(yè)化的外泌體提取試劑盒，有的是通過特殊設(shè)計(jì)的過濾器過濾掉雜質(zhì)成分，有的則采用空間排阻色譜法(SEC)進(jìn)行分離純化，也有的則利用化合物沉淀將法外泌體沉淀出來。

在利用外泌體運(yùn)輸PTX進(jìn)行抗中流的研究中，由于間充質(zhì)干細(xì)胞可以歸巢(homing)至中流細(xì)胞微環(huán)境并且可以不通過基因操作即可對(duì)PTX運(yùn)輸，因此Pessina等采用間充質(zhì)干細(xì)胞SR4987作為分泌外泌體的母代細(xì)胞，而后將SR4987與PTX共混，使SR4987分泌的外泌體含有PTX，再利用超速離心法將載有PTX的外泌體分離出來，研究其對(duì)體外人胰腺ai細(xì)胞株的影響。結(jié)果表明外泌體可以有效的運(yùn)載PTX并不破壞其功能，小泡(主要指外泌體)溶液的蛋白質(zhì)濃度在0.047～0.095mg/mL之間時(shí)可以誘導(dǎo)中流細(xì)胞凋亡50%，這種抑制效果與純PTX對(duì)體外ai細(xì)胞的抑制效果相當(dāng)。外泌體是指包含了復(fù)雜RNA和蛋白質(zhì)的小膜泡(30-150nm)。

外泌體是由細(xì)胞細(xì)胞質(zhì)內(nèi)的晚期內(nèi)泡小體以膜融合的方式通過胞吐方式主動(dòng)分泌到細(xì)胞外環(huán)境的一種直徑30-100nm的微型囊泡，其形態(tài)規(guī)則，呈圓形或橢圓形杯狀結(jié)構(gòu)，不同類型細(xì)胞分泌的外泌體具有很多共性，包括膜上富含脂筏及豐富的跨膜蛋白，如四次跨膜蛋白家族成員CD63、CD81等，表面為類似于細(xì)胞膜的脂質(zhì)雙分子層，具有一定的疏水性。外泌體能夠攜帶微小RNA(microRNAs,miRNAs)、RNA、蛋白質(zhì)等生物活性分子，并在細(xì)胞外環(huán)境穩(wěn)定存在，而且通過傳遞供體細(xì)胞信息，調(diào)節(jié)靶細(xì)胞的代謝通路。外泌體可由多種類型細(xì)胞分泌，妊娠期母體血清中存在表達(dá)胎盤堿性磷酸酶（placentalalkalinephosphatase,）的胎盤來源外泌體，并且在妊娠中發(fā)揮重要的作用。外泌體由于包含的內(nèi)容物具有明顯的組織特異性，為其能成為瘤早期診斷的生物標(biāo)志物提供了重要保障。上海血液外泌體

外泌體能向病變細(xì)胞輸送功能性物質(zhì)，所以有很大潛力作為基因和藥物遞送的載體。體液外泌體提取試劑盒方法

外泌體攜帶的與疾病進(jìn)展緊密關(guān)聯(lián)的分子標(biāo)志物可用于疾病進(jìn)展的監(jiān)視、檢測(cè)和診斷,是一種潛在的非侵入性生物標(biāo)志物。由于外泌體本身可以作為抗原提呈小泡,且有較長(zhǎng)的循環(huán)半衰期,可用于免疫學(xué)相關(guān)研究,同時(shí),源自ai細(xì)胞的外泌體可以被工程化,發(fā)揮免疫刺激作用,可作為中流疫苗應(yīng)用于ai癥的免疫zhiliao。此外,外泌體穩(wěn)定而廣fan地分布在qi官和組織中,具有低免疫原性、高耐受性等特點(diǎn),且良好的膜滲透性可使其通過血腦屏障,因此可用作組織和qi官特異藥物輸送系統(tǒng),兼有高輸送效率和低副作用。因此,外泌體適合用作藥物載體遞送zhiliao劑(如阿霉素或姜黃素),zhiliao性miRNA、siRNA等核酸和蛋白質(zhì),運(yùn)送至靶位點(diǎn)后實(shí)現(xiàn)靶向zhiliao。體液外泌體提取試劑盒方法

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