細胞分泌外泌體的過程一般分為三個階段:(1)質膜內陷,形成早期內吞小泡;(2)內吞小泡向內萌發成熟,形成多囊泡體;(3)多囊泡體與質膜融合,并釋放出囊泡內容物,形成外泌體。外泌體具有獨特的理化性質,其密度為1.13~1.19g/mL,由平均厚度小于5nm的雙層脂膜所包裹,具有典型杯狀形態,呈現為扁平球形。外泌體表面富含多糖鏈,其質膜主要由溶血磷脂酸、磷脂酰絲氨酸、膽固醇、神經酰胺和鞘磷脂構成,另有與細胞來源相關的部分特殊脂類。外泌體可攜帶蛋白質、核酸和脂質等生物活性大分子,其中主要為蛋白質,且大部分蛋白為所有來源外泌體所共有,只有小部分與其來源有關,為其分泌細胞的特有蛋白,能夠反映分泌細胞的類型和生理病理狀態。除此之外,外泌體可攜帶大量mRNA和miRNA等核酸,并將其運輸到靶細胞,發揮相應的生物學功能。類風濕關節炎患者的滑膜成纖維細胞所釋放的外泌體。吉林外泌體tmt
Buller等利用miR-146b的質粒轉染間充質干細胞,使其分泌的外泌體負載miR-146b,并將外泌體注射至移植到小鼠體內的GBM處。結果表明,這種利用外泌體運輸miRNA進行zhiliao的方法可以有效抑制中流的生長。對于GBM類腦部中流,體內zhiliao不同于體外細胞實驗,更需考慮腦部組織微環境對藥物的影響,外泌體可運輸miRNA并不破壞其在腦部中流組織處的原本功效。然而,至今還沒有利用外泌體載藥經靜脈注射zhiliaoGBM的報道,這主要是由于跨越血腦屏障(BBB)仍然是外泌體進行腦部中流zhiliao需要解決的難題。盡管如此,Wood等報道的在進行阿茲茨海默病zhiliao時利用對腦部神經元特異性肽RVG靶向的外泌體穿過BBB的研究顯示了經靶向修飾的外泌體具備穿過BBB的潛力,因此外泌體載藥zhiliao具有廣闊的前景。成都外泌體label free外泌體普遍存在于細胞培養上清以及各種體液中,包括血液、唾液、尿液、乳汁等。
作用機制主要是旁分泌的間充質干細胞(MSC)被普遍地用于醫治各種人類疾病。已經證明沒有一個因素足以調解MSC的醫治效果。然而,由許多細胞(包括MSC)分泌的外泌體膜囊泡是有吸引力的候選物作為其功效的載體。外泌體可以運輸和運送大量的蛋白質、脂質和核酸,并可以改變細胞和身體部位的功能。除了作為細胞間通訊的關鍵作用之外,外泌體越來越多地被認為是疾病的生物標志物和預后因子。此外,它們有潛力被用作臨床應用基因和藥物遞送的載體。該文回顧了外泌體的生物發生、分子組成及其作為細胞間通訊的信使的作用,著重于其作為干細胞醫治的載體的潛力。
膜封閉的囊泡釋放到周圍環境中已經成為近幾年來越來越受關注的問題。令人信服的證據表明囊泡可交換復雜的信息有助于這種興趣的興起。但是,也已經清楚,不同類型的分泌囊泡共存,具有不同的細胞內起源和形成模式,因此可能具有不同的組成和功能。外泌體是分泌囊泡的一種亞型。它們在真核細胞內的多泡小體中形成,并且當這些多泡小體與質膜融合時分泌到細胞外。有趣的是,不同的分子家族已被證明參與細胞內形成外泌體及其隨后的分泌,這表明即使在外泌體中也存在不同的亞型。以前無法用超速離心法提取的微囊泡,也通過運用PS親和法實現高純度提取。
卵巢ai患者與良性卵巢疾病患者血清外泌體中的miRNA表達譜有明顯差異,表明血清外泌體中的miRNA可以作為卵巢ai活檢的替代診斷標志物。多項研究表明外泌體中的miR-21在包括大多數ai癥的多種病理條件下過度表達。尿液外泌體來源于泌尿系統相關的各種細胞,包括腎小球足細胞、腎小管細胞和膀胱等,因此尿液外泌體數目、形態和生化性質的改變往往反映泌尿系統疾病。通過對前列腺ai癥患者尿液中的外泌體進行轉錄組分析,鑒定到兩種已知的前列腺ai癥標志物PCA-3(prostatecanceranti[1]gen3,前列腺ai抗原3)和TMPRSS2:ERG(thefusiongeneoftransmembraneproteaseserinestoERG,跨膜蛋白酶絲氨酸與ERG的融合基因),表明尿液外泌體具有診斷和監測ai癥患者狀態的潛力。外泌體是具有生物活性的脂雙層囊泡。干細胞外泌體iTRAQ
外泌體屬于胞外囊泡類,除了外泌體之外細胞還分泌微泡以及其它的膜囊泡。吉林外泌體tmt
結果表明,PS親和法可以檢測到許多目前為止都無法檢測的外泌體蛋白質和RNA。應用Tim4的外泌體強結合能力,可用ELISA或FACS高靈敏度定性檢測、定量分析外泌體。以前無法用超速離心法提取的微囊泡,也通過運用PS親和法實現高純度提取。本指導書中對該技術進行詳細說明,這項技術的有用性今后將受到世界各方評價,有望在外泌體和微囊泡生理功能的分析研究上起重大貢獻。外泌體的檢測和提取還遇到一個困難即:對各種外泌體的分類。研究人員尚未統一定義以何種方法提取的細胞外囊泡可以稱之為外泌體,給實驗數據的分析和重復性確認帶來困難。近年,隨著國際細胞外囊泡協會的成立、世界性研究者研討會的舉辦,提案MISEV指南作為國際標準,計劃或已經開始進行EV研究的科學家請務必閱讀這些方針。吉林外泌體tmt
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