在血液和大多數體液(如尿液、腦脊液、唾液、胸腹腔積液、羊水和乳汁等)中均可檢測到外泌體。血液外泌體的檢測通常采用EDTA抗凝血分離的血漿,miRNA等一些微小RNA則采用血清樣本。泌尿系統中存在大量的RNA水解酶可降解尿液中的裸miRNAs,但外泌體外膜則可幫助RNA免于被降解,因此研究尿液外泌體miRNAs更具有應用價值。相較于血清中相關miRNA的水平,腦脊液外泌體中的miR-21可作為膠質瘤診斷和預后的指標,特別對預測中流復發或轉移具有價值。唾液樣本在安靜狀態下主要來源于舌下腺和頜下腺,刺激狀態下則主要來源于腮腺。超速離心是從生物體液或細胞上清分離外泌體的金標準方法。廣州外泌體NTA
科學家也嘗試利用外泌體的壓制發病機制功能。例如,類風濕關節炎患者的滑膜成纖維細胞所釋放的外泌體,高濃度集聚誘導細胞死亡的TNF-α,可使類風濕關節炎惡化。通過上述介紹可以知道癥狀細胞來源的外泌體含有與癥狀進展相關的分子,神經細胞來源的外泌體含有與神經退行性疾病相關的分子,因此,通過壓制或去除這些外泌體,有希望壓制疾病發生。隨著今后的研究發展,外泌體功能逐步清晰,并擴大臨床應用,有望將外泌體應用在各種疾病醫治上。甚至可嘗試利用外泌體將siRNA和抗藥劑等運輸到目標細胞中。湖南CD9外泌體慢病毒外泌體的檢測和提取還遇到一個困難即:對各種外泌體的分類。
前列腺ai患者尿液外泌體中的miR-574-3p、miR-141-5p和miR-21-5p的表達水平明顯上升,表明這些miRNAs可用于前列腺ai的早期篩查。膽管ai是惡性程度較高的消化系統中流,發展隱蔽且臨床癥狀及體征出現晚,故給早期診斷帶來困難。高通量小RNA測序篩查了來自膽管ai和膽囊ai患者外泌體中一系列差異表達的miRNA,小RNA長度在正常個體、膽管ai患者和膽囊ai患者之間的分布存在明顯差異,膽管ai患者的外泌體中miR-96-5p、miR-151a-5p、miR-191-5p、miR-4732-3p明顯升高,而膽囊ai患者的外泌體中miR-151a-5p略有升高,為膽管ai和膽囊ai提供了一套新的生物診斷標志物。
外泌體及活性蛋白能直接穿透皮膚間隙,快速直達基底層起效;富含100+多種胞外基質蛋白、胞外基質酶以及細胞黏附分子;能夠有效促進皮膚成纖維細胞(HDFs)中I型膠原蛋白、成纖維蛋白,促進皮膚有效快速再生(Rejuvenation);能夠有效促進皮膚成纖維細胞(HDFs)彈性蛋白生成,保持皮膚飽滿和彈性;有效降低皮膚成纖維細胞(HDFs)中膠原蛋白酶(MMP-1)的生成從而防止皮膚間質中IIIIII型膠原蛋白被降解;富含活性物質能夠促進皮膚有些血管的修復與重建再生。泌體是細胞內源性的小囊泡,由大多數細胞分泌。
外泌體的提取方法:免疫磁珠法,這種方法可以保證外泌體形態的完整,特異性高、操作簡單、不需要昂貴的儀器設備,但是非中性pH和非生理性鹽濃度會影響外泌體生物活性,不便進行下一步的實驗。PS親和法,該方法將PS(磷脂酰絲氨酸)與磁珠結合,利用親和原理捕獲外泌體囊泡外的PS。該方法與免疫磁珠法相似,獲得的外泌體形態完整,純度較高。由于不使用變性劑,不影響外泌體的生物活性,外泌體可用于細胞共培養和體內注射。PS法可提取相當高純度的外泌體。色譜法,這種方法分離到的外泌體在電鏡下大小均一,但是需要特殊的設備,應用不寬泛。隨著今后的研究發展,外泌體功能逐步清晰,并擴大臨床應用。成都CD81外泌體慢病毒包裝
外泌體作為核酸分子的藥物載體主要用于基因治理。廣州外泌體NTA
通過改變外泌體的溶解性或者分散性,可以將它們從體液或細胞培養液中沉淀出來。常見的方法是使用聚乙二醇或凝集素來沉淀樣品中的外泌體。聚乙二醇是一種水溶性非離子化合物,不含水的聚乙二醇可以通過“劫持”水分子增加疏水性蛋白和脂質分子的相互結合力,從而迫使其脫離溶液,進而在低速離心條件下發生沉降。凝集素是一種具有高度特異性的碳水化合物結合蛋白,可通過與外泌體質膜糖蛋白上的糖鏈結合來改變外泌體的溶解性。此外,還可使用魚精蛋白、醋酸鈉、有機溶劑沉淀等方法進行沉淀分離。廣州外泌體NTA
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