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北京外泌體蛋白質組學

來源: 發布時間:2023-12-09

為獲得外泌體的大小、濃度、形態及蛋白質組成等信息,可以通過電鏡、動態光散射、納米顆粒跟蹤分析儀、蛋白質免疫印跡、酶聯免疫吸附法、流式細胞儀等對外泌體進行表征。通過電鏡可獲得外泌體的形態信息,不同類型的顯微鏡由于操作環境不同,得到的外泌體形態存在差異。例如,在掃描電鏡、透射電鏡和原子力顯微鏡中,外泌體呈現囊泡獨有的茶托形,可能由于樣品在固定或染色過程中極度脫水,導致外泌體塌陷所致。與之相反,在冷凍電鏡中外泌體呈現圓形,由于不會脫水變性,所得的外泌體形態可能更加接近囊泡的真實狀態。另外,由于透射電鏡和原子力顯微鏡具有較高分辨率,也能夠提供外泌體磷脂雙分子層厚度、粒徑分布等信息。外泌體作為核酸分子的藥物載體主要用于基因治理。北京外泌體蛋白質組學

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外泌體是指包含了復雜RNA和蛋白質的小膜泡(30-150nm),現今,其特指直徑在40-100nm的盤狀囊泡。多種細胞在正常及病理狀態下均可分泌外泌體。其主要來源于細胞內溶酶體微粒內陷形成的多囊泡體,經多囊泡體外膜與細胞膜融合后釋放到胞外基質中?,F在外泌體特指直徑在40-100nm的盤狀囊泡。多種細胞在正常及病理狀態下均可分泌外泌體。其主要來源于細胞內內溶酶體微粒內陷形成的多囊泡體,經多囊泡體外膜與細胞膜融合后釋放到胞外基質中。體液提取試劑盒生產廠家干細胞外泌體可以有效活化提高細胞能量加速細胞排毒、淡化色斑。

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外泌體及活性蛋白能直接穿透皮膚間隙,快速直達基底層起效;富含100+多種胞外基質蛋白、胞外基質酶以及細胞黏附分子;能夠有效促進皮膚成纖維細胞(HDFs)中I型膠原蛋白、成纖維蛋白,促進皮膚有效快速再生(Rejuvenation);能夠有效促進皮膚成纖維細胞(HDFs)彈性蛋白生成,保持皮膚飽滿和彈性;有效降低皮膚成纖維細胞(HDFs)中膠原蛋白酶(MMP-1)的生成從而防止皮膚間質中IIIIII型膠原蛋白被降解;富含活性物質能夠促進皮膚有些血管的修復與重建再生。

在運輸DOX的研究中,Wei等選擇了已經在臨床上使用的未成熟的樹突細胞作為母代細胞,通過化學轉染使其分泌的外泌體表面含有Lamp2b,這種蛋白可以與αv整合蛋白特異性iRGD肽結合,使外泌體對DOX的運輸具有靶向性。將對iRGD肽靶向的外泌體和未經靶向性處理的外泌體用DiR染料標記,并分別靜脈注射入移植了人乳腺ai細胞的小鼠體內,觀察到靶向的外泌體在注射30min后已經出現在中流組織處,在注射2h后外泌體的含量高,而未經靶向性處理的外泌體在注射后主要集中在肝臟,幾乎很少到達中流組織處,說明對iRGD肽靶向的外泌體具有很好的靶向性。外泌體作為腦內種瘤和神經退行性疾病的新型標記物。

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外泌體作為疾病診斷的標志物具有其獨特優勢:(1)與正常細胞相比,病變細胞產生的外泌體在分泌量和內容物方面存在明顯差異。病變的細胞和組織能夠產生更多外泌體。(2)由于特殊的生成方式,外泌體的組成不同于來源細胞。其內包含的一些特異性蛋白質能夠揭示外泌體的起源、結構和運輸方式,有利于深入了解外泌體的產生機制。(3)病變細胞分泌的外泌體通過胞吐的過程進入血液、尿液等體液,囊泡狀結構能夠保護外泌體內部生物分子不受體液中蛋白酶、磷酸酶、核酸酶等干擾,有利于保持其結構完整和生物活性,通過對此類體液進行分析可以實現疾病的無創或微創檢測。外泌體在體液中十分穩定,同時外囊泡所含的蛋白質和RNA被外泌體的脂質雙層膜所包被也不會分解。北京外泌體蛋白質組學

外泌體不只可作為疾病診斷的生物標志,而且可作為天然的藥物傳遞載體。北京外泌體蛋白質組學

外泌體特指直徑在30-150nm的囊泡,其主要來源于細胞內多囊泡體,經多囊泡體外膜與細胞膜融合后釋放到胞外基質中。外泌體膜上富含參與外泌體運輸的四跨膜蛋白家族(CD63,CD81和CD9)、熱休克蛋白家族(HSP60,HSP70和HSP90),本示蹤病毒使用CD63作為生物標記,通過將CD63與熒光蛋白偶聯,帶熒光的膜蛋白會在表達至外泌體膜上,便于后續進行、觀察內化或其他實驗。慢病毒載體的構建原理就是將HIV21基因組中的順式作用元件(如包裝信號、長末端重復序列)和編碼反式作用蛋白的序列進行分離。北京外泌體蛋白質組學