重組蛋白的細(xì)菌表達(dá)系統(tǒng)有各種各樣的載體和宿主菌可供選擇，大部分工程菌的增殖時(shí)間短,不僅便于快速評(píng)價(jià)實(shí)驗(yàn)結(jié)果，而且降低了技術(shù)和設(shè)備無(wú)菌要求的嚴(yán)格性。無(wú)害大腸桿菌是腸道正常微生物群的一部分與生物體為共生關(guān)系，可以通過(guò)產(chǎn)生維生素K 2使機(jī)體受益，并防止病原菌在腸道增殖。大腸桿菌是用于重組蛋白生產(chǎn)的宿主菌,它不僅具有遺傳背景清楚、培養(yǎng)操作簡(jiǎn)單、轉(zhuǎn)化和轉(zhuǎn)導(dǎo)效率高、生長(zhǎng)繁殖快、成本低廉,可以快速大規(guī)模地生產(chǎn)目的蛋白等優(yōu)點(diǎn),而且其表達(dá)外源基因產(chǎn)物的水平遠(yuǎn)高于其它基因表達(dá)系統(tǒng),表達(dá)的目的蛋白量甚至能超過(guò)細(xì)菌總蛋白量的30%，對(duì)小分子蛋白的生產(chǎn)具有極大的優(yōu)勢(shì)，因此大腸桿菌是目前應(yīng)用多的重組蛋白質(zhì)表達(dá)系統(tǒng)。重組蛋白在多種細(xì)胞培養(yǎng)中的應(yīng)用。普欣LIF重組蛋白

量化生產(chǎn)的重組蛋白種類有限，如果購(gòu)買不到所需蛋白，則需要重組蛋白定制服務(wù)。對(duì)于特定的應(yīng)用，使用正確的蛋白表達(dá)系統(tǒng)是實(shí)驗(yàn)成功的因素。以義翹神州為例，義翹神州的重組蛋白表達(dá)服務(wù)，擁有多年的重組蛋白表達(dá)經(jīng)驗(yàn)，提供從基因合成、載體構(gòu)建到蛋白表達(dá)及純化的一站式服務(wù)。擁有多種重組蛋白表達(dá)系統(tǒng)，包括原核生物蛋白表達(dá)系統(tǒng)、酵母蛋白表達(dá)系統(tǒng)、昆蟲(chóng)細(xì)胞蛋白表達(dá)系統(tǒng)（桿狀病毒）、哺乳動(dòng)物細(xì)胞蛋白表達(dá)系統(tǒng)。具備多種純化體系，為蛋白表達(dá)與純化方面提供多種選擇。自公司成立以來(lái)，已成功表達(dá)約6000 個(gè)毫克至克級(jí)的不同種屬的重組蛋白。每年1000個(gè)新蛋白的研制和生產(chǎn)能力以及快速解決研發(fā)和生產(chǎn)問(wèn)題的能力。擁有近百個(gè)2L 到1000L 不同體積的發(fā)酵罐和超過(guò)30 種重組蛋白純化體系，可以滿足高通量及大規(guī)模的重組蛋白表達(dá)需求。PeproTechBMP-3重組蛋白怎么樣重組蛋白的保存和運(yùn)輸條件。

哺乳動(dòng)物蛋白表達(dá)系統(tǒng)在生產(chǎn)重組蛋白中的應(yīng)用中，優(yōu)勢(shì)明顯。具體表現(xiàn)為以下方面，能實(shí)現(xiàn)翻譯后修飾及正確的蛋白折疊復(fù)性：哺乳動(dòng)物為真核細(xì)胞，細(xì)胞器可以對(duì)蛋白正確折疊加工。表達(dá)水平高:載體可在哺乳動(dòng)物細(xì)胞中高表達(dá)重組蛋白，表達(dá)量可高達(dá)1-3g/L。蛋白表達(dá)高效穩(wěn)定：高效啟動(dòng)子控制，穩(wěn)定表達(dá)，并可以選擇多種表達(dá)，如瞬時(shí)表達(dá)、穩(wěn)定細(xì)胞株表達(dá)、營(yíng)養(yǎng)缺陷型細(xì)胞株表達(dá)(DHFR/GS)、大規(guī)模懸浮細(xì)胞表達(dá)等。適合大規(guī)模蛋白表達(dá):常用的哺乳動(dòng)物表達(dá)宿主細(xì)胞（HEK293和CHO），使用懸浮細(xì)胞培養(yǎng)，可以在一個(gè)月內(nèi)可產(chǎn)生數(shù)克級(jí)蛋白。

不同表達(dá)系統(tǒng)所生成的重組蛋白間有何主要區(qū)別？以賽默飛為例，Thermo Fisher Scientific? 所提供的重組蛋白產(chǎn)品通常在大腸桿菌，昆蟲(chóng)細(xì)胞或哺乳動(dòng)物細(xì)胞等不同的表達(dá)系統(tǒng)中產(chǎn)生。不同表達(dá)系統(tǒng)之間產(chǎn)生的重組蛋白的主要差別在于這些蛋白所攜帶的翻譯后修飾，如糖基化修飾。在大腸桿菌中生成的重組蛋白未經(jīng)糖基化。在昆蟲(chóng)細(xì)胞中產(chǎn)生的重組蛋白通常經(jīng)有部分糖基化，但不含半乳糖和唾液脫鹽酸，糖鏈也無(wú)復(fù)雜分支。在哺乳動(dòng)物細(xì)胞中生成的重組蛋白會(huì)發(fā)生附帶完全的糖基化修飾。備注：Mimic? Sf9 昆蟲(chóng)細(xì)胞（來(lái)源于sf9昆蟲(chóng)細(xì)胞系，經(jīng)改造可穩(wěn)定表達(dá)多種哺乳動(dòng)物糖基轉(zhuǎn)移酶）可產(chǎn)生用于表達(dá)帶末端唾液酸和半乳糖的復(fù)雜的N-糖鏈。重組蛋白是生物醫(yī)藥行業(yè)研發(fā)及生產(chǎn)中的關(guān)鍵生物試劑。

昆蟲(chóng)細(xì)胞是多種重組蛋白的多功能表達(dá)宿主。其較強(qiáng)的折疊能力和較高的培養(yǎng)密度使其成為表達(dá)細(xì)胞內(nèi)復(fù)雜蛋白和病毒蛋白的理想選擇。2007年，由昆蟲(chóng)細(xì)胞系以病毒樣顆粒(VLPs)的形式生產(chǎn)的病毒疫苗Cervarix被批準(zhǔn)用于人類。除了在疫苗開(kāi)發(fā)方面的潛力外，昆蟲(chóng)細(xì)胞產(chǎn)生的高活性蛋白還應(yīng)用于生物物理學(xué)和生物化學(xué)的各個(gè)學(xué)科，如結(jié)構(gòu)解釋、藥物設(shè)計(jì)、測(cè)定方法建立和診斷試劑開(kāi)發(fā)等等。許多生物廠家利用昆蟲(chóng)細(xì)胞進(jìn)行重組蛋白產(chǎn)品開(kāi)發(fā)和承包研究項(xiàng)目。重組蛋白大規(guī)模的瞬時(shí)表達(dá)是研究熱點(diǎn)。BMP-10重組蛋白定制

重組蛋白定制中的注意事項(xiàng)。普欣LIF重組蛋白

體外生產(chǎn)重組蛋白的表達(dá)系統(tǒng)中，哺乳動(dòng)物細(xì)胞表達(dá)系統(tǒng)能夠?yàn)橹亟M人源蛋白提供較接近于天然狀態(tài)的翻譯后修飾，在蛋白表達(dá)過(guò)程中會(huì)形成接近天然蛋白的蛋白質(zhì)折疊和聚合，具備活性蛋白所必須的空間結(jié)構(gòu)和修飾。哺乳動(dòng)物細(xì)胞翻譯后再加工修飾產(chǎn)生的外源重組蛋白質(zhì)，在活性方面高于原核表達(dá)系統(tǒng)及酵母、昆蟲(chóng)細(xì)胞等真核表達(dá)系統(tǒng)，更接近于天然蛋白質(zhì)。這些特性使得哺乳動(dòng)物細(xì)胞表達(dá)系統(tǒng)在重組蛋白藥物，特別是重組單抗藥物的研發(fā)和生產(chǎn)中的具有極大的應(yīng)用。普欣LIF重組蛋白

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