昆蟲細胞是多種重組蛋白的多功能表達宿主。其較強的折疊能力和較高的培養密度使其成為表達細胞內復雜蛋白和病毒蛋白的理想選擇。2007年,由昆蟲細胞系以病毒樣顆粒(VLPs)的形式生產的病毒疫苗Cervarix被批準用于人類。除了在疫苗開發方面的潛力外,昆蟲細胞產生的高活性蛋白還應用于生物物理學和生物化學的各個學科,如結構解釋、藥物設計、測定方法建立和診斷試劑開發等等。許多生物廠家利用昆蟲細胞進行重組蛋白產品開發和承包研究項目。高純度、高活性、低內毒素,高批次間一致性是選購重組蛋白的重點。小鼠BMP-3重組蛋白
重組蛋白具有極高的經濟價值和科研價值,但是在哺乳動物細胞中使用穩定轉染方法將會消耗大量的時間,而傳統的瞬時轉染方法,在產量上也難以令人滿意。所以重組蛋白大規模的瞬時表達技術是近年來的一個研究熱點,已有報道能放大到 100L反應器中生產重組蛋白,產量(分泌型蛋白)可達 1-10mg/L。不過該方法技術條件要求高,如質粒的純度、轉染的效率等。哺乳動物細胞表達系統中,重組蛋白的表達水平與許多 因素相關,如轉錄和翻譯調控元件、RNA剪接過程、mRNA穩 定性、基因在染色體上的整合位點、重組蛋白對細胞的毒性作 用以及宿主細胞的遺傳特性等。BMP-7重組蛋白定制多肽類激素藥是重組蛋白藥物中的明星產品。
為了保證重組蛋白良好的穩定性和生物學活性,通常加8%(質量比體積)的海藻糖和甘露醇作為凍干保護劑。海藻糖是一種以兩個葡萄糖分子通過 α,α,1,1-糖苷鍵連接的二糖。海藻糖是一種非還原糖,不與氨基酸或蛋白質發生反應。它本身不存在于哺乳動物體內,但哺乳動物體內卻存在分解海藻糖的酶,且海藻糖作為一種小分子的半抗原,哺乳動物對其免疫反應性很低。這使得海藻糖對live實驗或異種移植等實驗的干擾極小。海藻糖不僅可以防止蛋白在脫水狀態下改變其結構,更能在高溫、低溫、高滲透壓的條件下保留蛋白的生物學活性。目前,海藻糖以其高效的蛋白保護性能與相對低廉的價格漸漸代替 BSA,是免疫實驗產品和蛋白類產品添加劑的新寵。
重組蛋白的細菌表達系統有各種各樣的載體和宿主菌可供選擇,大部分工程菌的增殖時間短,不僅便于快速評價實驗結果,而且降低了技術和設備無菌要求的嚴格性。無害大腸桿菌是腸道正常微生物群的一部分與生物體為共生關系,可以通過產生維生素K 2使機體受益,并防止病原菌在腸道增殖。大腸桿菌是用于重組蛋白生產的宿主菌,它不僅具有遺傳背景清楚、培養操作簡單、轉化和轉導效率高、生長繁殖快、成本低廉,可以快速大規模地生產目的蛋白等優點,而且其表達外源基因產物的水平遠高于其它基因表達系統,表達的目的蛋白量甚至能超過細菌總蛋白量的30%,對小分子蛋白的生產具有極大的優勢,因此大腸桿菌是目前應用多的重組蛋白質表達系統。重組蛋白疫苗有著天然的優勢。
功能性ELISA是一類以ELISA形式進行的、基于體外配體結合的分析法。該方法用于檢測目的蛋白與其天然結合物配體之間(如生長因子與其受體)的結合能力。如果在該檢測中生長因子能夠與其天然受體相結合,則該生長因子很可能是具有功能的。ED50為OD值讀取過程中能夠提供50%信號強度的生長因子濃度(在包被了受體的平板上)。重組蛋白使用了基于細胞的檢測分析或功能性ELISA分析對其生物學活性進行了檢測,產品頁上會提供相應的ED50值。也有些重組蛋白沒有提供生物活性數據。在大多數情況下,這表明沒有進行生物活性測試,但它并不一定意味著蛋白是沒有活性的。在沒有生物活性數據的情況下,這些蛋白可用做蛋白質分子量標準,蛋白免疫印記陽性對照(如果是全長的重組蛋白)或免疫原。其它可能的用途是配體結合試驗或ELISA的標準品。R&D Systems是全球重組蛋白生產的前列。R&DSystemsIGF-II重組蛋白怎么樣
重組蛋白的生物活性接近于天然蛋白質,因此在生物制藥領域應用廣泛。小鼠BMP-3重組蛋白
蛋白的溶解性與很多因素有關,其中比較重要的是pH值和離子強度。購買的重組蛋白按照說明上所標明的溶解液來溶解。如果您所用的溶解液的pH值和離子強度與說明書中所標明的不符,很多時候會造成細胞因子或重組蛋白不能完全溶解或者根本無法溶解,這樣所配得的細胞因子或重組蛋白必然活性不夠或喪失。重組蛋白溶解時一定要溶解到指定的濃度,高于或低于該濃度范圍,都可能會導致重組蛋白不穩定,出現活性下降的現象。另外,重組蛋白在溶解時,一定不能用渦旋儀進行快速振蕩,以免出現蛋白鏈斷裂。重組蛋白的凍干粉是非常容易溶解的,一般用移液器的吸頭輕輕吹幾下,即可使細胞因子或重組蛋白完全溶解。小鼠BMP-3重組蛋白
上海研助寶生物醫藥有限公司坐落在中國(上海)自由貿易試驗區祖沖之路2288弄2號814室,是一家專業的非臨床診斷用生物試劑、實驗室儀器的銷售,從事計算機科技、網絡科技、化工科技、新材料科技、能源科技、生物醫藥科技、環保科技領域內的技術開發、技術咨詢、技術服務、技術轉讓,廣告的設計、制作、代理、發布,專利代理,從事貨物及技術的進出口業務。公司。一批專業的技術團隊,是實現企業戰略目標的基礎,是企業持續發展的動力。上海研助寶生物醫藥有限公司主營業務涵蓋試劑,儀器,耗材,試劑盒,堅持“質量保證、良好服務、顧客滿意”的質量方針,贏得廣大客戶的支持和信賴。公司憑著雄厚的技術力量、飽滿的工作態度、扎實的工作作風、良好的職業道德,樹立了良好的試劑,儀器,耗材,試劑盒形象,贏得了社會各界的信任和認可。