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小鼠重組蛋白

來源: 發布時間:2022-06-11

不同細胞研究中添加的重組蛋白有所不同。人胚胎干(ES)細胞研究中的重組蛋白主要有,細胞培養用人重組actin A,bFGF,IGF-II等,細胞分化用BMP-4,EGF和HGF。間充質干(MSC)細胞研究中的重組蛋白主要有,間充質干(MSC)細胞培養和自我更新的生長因子:LIF,bFGF,EGF,HGF,PDGF和Wnt3,MSC分化的生長因子或細胞因子:BMP-2與TGF-β1。神經干細胞(NSC)研究中的重組蛋白主要有,重組EGF,重組bFGF,和重組VEGF,用于神經干細胞的擴增。此外,包括BDNF在內的多幾種神經營養因子例如BDNF,CNTF,和GDNF也可適用于相關研究。購買的重組蛋白如何保存?小鼠重組蛋白

量化生產的重組蛋白種類有限,如果購買不到所需蛋白,則需要重組蛋白定制服務。對于特定的應用,使用正確的蛋白表達系統是實驗成功的因素。以義翹神州為例,義翹神州的重組蛋白表達服務,擁有多年的重組蛋白表達經驗,提供從基因合成、載體構建到蛋白表達及純化的一站式服務。擁有多種重組蛋白表達系統,包括原核生物蛋白表達系統、酵母蛋白表達系統、昆蟲細胞蛋白表達系統(桿狀病毒)、哺乳動物細胞蛋白表達系統。具備多種純化體系,為蛋白表達與純化方面提供多種選擇。自公司成立以來,已成功表達約6000 個毫克至克級的不同種屬的重組蛋白。每年1000個新蛋白的研制和生產能力以及快速解決研發和生產問題的能力。擁有近百個2L 到1000L 不同體積的發酵罐和超過30 種重組蛋白純化體系,可以滿足高通量及大規模的重組蛋白表達需求。無動物源性Wnt-4重組蛋白重組蛋白的表達系統有多種。

客戶購買的重組蛋白一般為裝在塑料管中的凍干粉,凍干粉在運輸過程中可能會因顛簸而漂散并粘貼于管壁或管蓋上,所以在打開塑料瓶蓋前,需將凍干粉通過離心收集到管底,以便用很小體積的液體即可將凍干粉完全溶解。那么應該用多少轉速、多長時間離心試劑管,才能達到良好的收集效果?答:有些小型高速離心機(多為進口品牌)的面板上有一個Spin鍵,按了此鍵后,離心機會自動快速上升到速度(10000rpm或12000rpm),上升后速度即刻下降,直至停止旋轉,整個過程大約30s。這個Spin鍵足以很好的將細胞因子或蛋白收集到管底。但有些實驗室沒有這樣的高速離心機,只有轉速為4000-4500rpm的離心機。這種情況下,需3000-3500rpm離心5min,也能達到類似的效果。

單克隆抗體是一類重組蛋白,不論是科研還是醫療中,都有很大應用。突出的表達重組單克隆抗體的宿主細胞系是CHO、NS0、SP2/0、HEK293和PER.C6。然而,大多數文獻都是關于CHO細胞的,該細胞仍然是現今工業生產重組蛋白藥物的主力,占到了70%(Jayapal等人,2007)。CHO細胞是于1986年一個被批準的重組生物制藥的表達系統(組織型纖溶酶原actin物;t-PA)。從那時起,CHO細胞就是是重組蛋白表達的選擇。盡管有其他哺乳動物表達系統可用,CHO細胞仍然是優化重組蛋白表達研究的中心。不同表達系統所生成的重組蛋白間有何主要區別?

在昆蟲細胞表達系統中,昆蟲細胞需要桿狀病毒作為重組蛋白表達的中間體。桿狀病毒是一組不同的DNA病毒,能夠侵染各種昆蟲細胞。它們就像一個穿梭機,將目標基因導入給定的宿主細胞。加州親筆多核多角體病毒(AcMNPV) 在利用桿狀病毒這方面表現出突出的特征。簡單地說,將編碼感興趣蛋白質的基因插入一個主要載體,然后將其克隆到一個名為Bacmid的次要載體上。Bacmid被轉移到一株細菌(通常是大腸桿菌)中進行初步病毒生產和組裝,以獲得一代桿狀病毒(P1)。P1病毒在昆蟲細胞中被擴增(例如sf9)以獲得合適的滴度(P2),然后P2病毒被用于侵染相同或不同的昆蟲細胞系(例如High-five)以實現重組蛋白表達。進口重組蛋白品牌有哪些?GMP級BMP-9重組蛋白

選擇高品質重組蛋白和生長因子。小鼠重組蛋白

市場上重組蛋白通常以凍干形式售賣,這是因為蛋白質對熱敏感,凍干能使蛋白質在存儲過程中保持活性,延長保存時間,同時也能降低運輸成本。但是凍干對蛋白質的活性會有一定的影響,可能造成蛋白質部分失活、聚集和其它變性等。這個時候,就需要通過加入保護劑(穩定劑,添加劑,輔料)和控制凍干的各種條件來盡可能降低這些負面的影響,盡可能的保護蛋白的活性。常見的保護劑或穩定劑包括糖類,多元醇,聚合物,表面活性劑,某些蛋白和氨基酸等。小鼠重組蛋白

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