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小鼠IL-1重組蛋白定制

來源: 發(fā)布時(shí)間:2022-06-13

體外生產(chǎn)重組蛋白有多個(gè)表達(dá)系統(tǒng),重組蛋白的預(yù)期用途對(duì)于表達(dá)系統(tǒng)的選擇和決定其優(yōu)先次序是很重要的。對(duì)于某些應(yīng)用 (如功能解析或藥物篩選) 來說,保持蛋白的天然功能和特性是必需的; 但如果是當(dāng)成免疫原來使用則關(guān)系不大。其他需要實(shí)際考慮的因素包括蛋白質(zhì)產(chǎn)量、時(shí)間限制或生產(chǎn)成本。明確項(xiàng)目需求對(duì)于確保選擇合適的表達(dá)系統(tǒng)、克隆策略和所需產(chǎn)品的生產(chǎn)策略是至關(guān)重要的。實(shí)際上, 在缺少目標(biāo)蛋白質(zhì)或相似蛋白質(zhì)歷史表達(dá)數(shù)據(jù)的情況下,要預(yù)測(cè)某個(gè)蛋白質(zhì)表達(dá)實(shí)驗(yàn)的結(jié)果是非常困難的。通常的做法是使用數(shù)個(gè)表達(dá)系統(tǒng), 一開始使用簡單的、性價(jià)比高的表達(dá)系統(tǒng),失敗后再使用更復(fù)雜的表達(dá)系統(tǒng)。45.蘇州近岸蛋白專注生物醫(yī)藥領(lǐng)域中的重組蛋白質(zhì)。小鼠IL-1重組蛋白定制

CHO細(xì)胞即:中國倉鼠卵巢細(xì)胞(Chinese Hamster Ovary),它是基因工程疫苗研究中具有代表性的哺乳動(dòng)物表達(dá)載體,是用來表達(dá)外源蛋白多也是成功的一類細(xì)胞。市場(chǎng)上超過70%的蛋白質(zhì)藥物選擇的制造細(xì)胞就是CHO細(xì)胞。CHO細(xì)胞可以在外源表達(dá)的蛋白質(zhì)上摻入復(fù)雜的聚糖,如N-連接聚糖。有助于蛋白質(zhì)的折疊和細(xì)胞內(nèi)運(yùn)輸。重組蛋白表達(dá)側(cè)重于大化每個(gè)分子中含有唾液酸的復(fù)雜聚糖的數(shù)量,CHO細(xì)胞糖基化之后,能增加對(duì)蛋白水解的抵抗力和延長體內(nèi)血清半衰期,所以CHO細(xì)胞成為用作重組蛋白的哺乳動(dòng)物細(xì)胞系。國產(chǎn)BMP-3重組蛋白定制比較熱門的重組蛋白主要為重組細(xì)胞因子。

目前有超過180種重組蛋白藥物被用作藥物。重組蛋白藥物是為急需新療法的患者服務(wù)的一類重要藥物。在許多疾病領(lǐng)域有**性的選擇,重組蛋白藥物現(xiàn)在是整個(gè)保健行業(yè)的一個(gè)重要組成部分。近一半的重組蛋白藥物為單克隆抗體,其余可按功能細(xì)分如下: 替換缺失或有缺陷的蛋白質(zhì);增加已經(jīng)存在的蛋白質(zhì)數(shù)量;抑制病原體,如細(xì)菌或病毒;其他分子的載體(大部分仍在開發(fā)中)。我國重組蛋白藥物目前共有20多家企業(yè)已上市 ,包括長春金賽、通化東寶、三生制藥、甘李藥業(yè)、恒瑞醫(yī)藥、安科生物等。

常見的重組蛋白藥物:生長因子viii,幫助血友病患者形成血塊;非格司汀和sargramostim(造血骨髓因子),促進(jìn)放療或移植后白細(xì)胞計(jì)數(shù);胰島素,用于糖尿病;IGF1,用于某些生長問題;干擾素(阿爾法),用于乙型和丙型肝炎、生殖器疣、某些白血病和其他疾病;干擾素(β),用于多發(fā)性硬化癥;干擾素(伽瑪),用于慢性肉芽腫病;白細(xì)胞介素-2,殺死病變細(xì)胞;生長因子,用于生長因子缺乏癥;組織纖溶酶原actin劑(t-PA),溶解血凝塊,預(yù)防心臟病發(fā)作,減輕其嚴(yán)重程度。選擇重組蛋白定制需謹(jǐn)慎。

為了保證重組蛋白良好的穩(wěn)定性和生物學(xué)活性,通常加8%(質(zhì)量比體積)的海藻糖和甘露醇作為凍干保護(hù)劑。海藻糖是一種以兩個(gè)葡萄糖分子通過 α,α,1,1-糖苷鍵連接的二糖。海藻糖是一種非還原糖,不與氨基酸或蛋白質(zhì)發(fā)生反應(yīng)。它本身不存在于哺乳動(dòng)物體內(nèi),但哺乳動(dòng)物體內(nèi)卻存在分解海藻糖的酶,且海藻糖作為一種小分子的半抗原,哺乳動(dòng)物對(duì)其免疫反應(yīng)性很低。這使得海藻糖對(duì)live實(shí)驗(yàn)或異種移植等實(shí)驗(yàn)的干擾極小。海藻糖不僅可以防止蛋白在脫水狀態(tài)下改變其結(jié)構(gòu),更能在高溫、低溫、高滲透壓的條件下保留蛋白的生物學(xué)活性。目前,海藻糖以其高效的蛋白保護(hù)性能與相對(duì)低廉的價(jià)格漸漸代替 BSA,是免疫實(shí)驗(yàn)產(chǎn)品和蛋白類產(chǎn)品添加劑的新寵。怎么才能讓重組蛋白保持良好的穩(wěn)定性和生物學(xué)活性呢?無動(dòng)物源性TNF-alpha重組蛋白

重組蛋白的表達(dá)系統(tǒng)有多種。小鼠IL-1重組蛋白定制

重組蛋白含與不含 CF 有什么區(qū)別?CF,是 Carrier Free 的意思。一般來說,為了對(duì)重組蛋白的結(jié)構(gòu)及活性進(jìn)行保護(hù),生產(chǎn)廠家會(huì)在蛋白產(chǎn)品中添加牛血清白蛋白(BSA)作為載體蛋白。但考慮到 BSA 會(huì)對(duì)某些實(shí)驗(yàn)造成影響,廠家又研發(fā)出不含載體蛋白(BSA)的產(chǎn)品,即 Carrier Free 蛋白。客戶如何選擇呢?在用途上,一般情況下,我們建議使用含有 BSA 的重組蛋白用于細(xì)胞或組織培養(yǎng),或作為 ELISA 標(biāo)準(zhǔn)品。相對(duì)而言,當(dāng) BSA 可能會(huì)干擾實(shí)驗(yàn)時(shí),比如體內(nèi)實(shí)驗(yàn)、蛋白標(biāo)記等,則推薦使用 CF 蛋白。另外,如果實(shí)驗(yàn)平臺(tái)有特殊要求,也應(yīng)根據(jù)要求選擇不含 BSA 的蛋白。小鼠IL-1重組蛋白定制

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