重組蛋白的細菌表達系統有各種各樣的載體和宿主菌可供選擇,大部分工程菌的增殖時間短,不僅便于快速評價實驗結果,而且降低了技術和設備無菌要求的嚴格性。無害大腸桿菌是腸道正常微生物群的一部分與生物體為共生關系,可以通過產生維生素K 2使機體受益,并防止病原菌在腸道增殖。大腸桿菌是用于重組蛋白生產的宿主菌,它不僅具有遺傳背景清楚、培養操作簡單、轉化和轉導效率高、生長繁殖快、成本低廉,可以快速大規模地生產目的蛋白等優點,而且其表達外源基因產物的水平遠高于其它基因表達系統,表達的目的蛋白量甚至能超過細菌總蛋白量的30%,對小分子蛋白的生產具有極大的優勢,因此大腸桿菌是目前應用多的重組蛋白質表達系統。重組蛋白藥物的發展動態。人TGF重組蛋白定制
為了保證重組蛋白良好的穩定性和生物學活性,通常加8%(質量比體積)的海藻糖和甘露醇作為凍干保護劑。海藻糖是一種以兩個葡萄糖分子通過 α,α,1,1-糖苷鍵連接的二糖。海藻糖是一種非還原糖,不與氨基酸或蛋白質發生反應。它本身不存在于哺乳動物體內,但哺乳動物體內卻存在分解海藻糖的酶,且海藻糖作為一種小分子的半抗原,哺乳動物對其免疫反應性很低。這使得海藻糖對live實驗或異種移植等實驗的干擾極小。海藻糖不僅可以防止蛋白在脫水狀態下改變其結構,更能在高溫、低溫、高滲透壓的條件下保留蛋白的生物學活性。目前,海藻糖以其高效的蛋白保護性能與相對低廉的價格漸漸代替 BSA,是免疫實驗產品和蛋白類產品添加劑的新寵。BMP-8重組蛋白R&D Systems是全球重組蛋白生產的前列。
重組人胰島素是上市的重組蛋白藥物,用于1型和2型糖尿病,經過30多年的發展,目前胰島素已從一代動物源性胰島素發展到第四代長效胰島素類似物。目前重組蛋白藥物主要包含:1. 多肽類------重組人胰島素、胰島素類似物、重組人生長因子和重組人促卵泡成熟因子等。2. 細胞因子-----重組人促卵泡成熟因子、重組人干擾素α、β、γ、重組人粒細胞巨噬細胞刺激因子、重組人白細胞介素2、11、重組人表皮生長因子、重組人成纖維細胞生長因等。3. 重組酶----重組人尿激酶原、重組人α葡萄糖苷酶制劑等,以及其它如重組人骨形成蛋白2和重組水蛭素等多個細分領域。
重組蛋白疫苗是采用基因工程技術,將病毒的目的抗原基因構建在表達載體上,將已構建的表達蛋白載體轉化到細菌、酵母或哺乳動物或昆蟲細胞中,在一定的誘導條件下,表達出大量的抗原蛋白,再經提純并添加佐劑而制成疫苗。重組蛋白疫苗主要有三個優勢:不養活病毒,無需擔心病毒外泄,對生產車間的生物安全等級要求低;利用轉基因技術生產病毒S蛋白上的RBD蛋白,能實現高產量、高純度、低成本;重組蛋白疫苗只含RBD蛋白,純度高,安全性更好。高純度、高活性、低內毒素,高批次間一致性是選購重組蛋白的重點。
重組蛋白的許多生產廠家都是不限制產品使用期限的,不規定重組蛋白和抗體產品的失效期或生產日期。在適當的存儲條件下,重組蛋白和抗體可以保持活性穩定多年。這些條件包括以凍干粉形式存儲蛋白,以大于 0.1 mg/mL 的蛋白濃度存儲冷凍的產品(-20 °C 或 -80 °C)以及限制凍融循環的次數。但是,廠家常規質量控制測試可確保所有產品在銷售時都具有可接受的生物活性。在實驗室的正常條件下使用時,我們保證產品達到或超過我們提供的技術參數。由于無法控制終端用戶的存儲條件,通常,保質期為自購買之日起 6-12 個月。若有特殊要求,請參見各產品說明書。重組蛋白的表達與純化方法。無動物源性LIF重組蛋白定制
如何長期保存重組蛋白?人TGF重組蛋白定制
蛋白質是基因功能的執行者,蛋白間相互作用構成機體生命活動的基礎。當體內行使特定功能的蛋白發生變異或濃度異常時,都會導致疾病的發生。因此,理論上蛋白類藥物可用于任何發病機制清楚、病理學靶點明確的疾病。蛋白質藥物,特別是重組蛋白、工程化抗體等生物技術藥物取得的良好療效及巨大的經濟效益。重組蛋白藥物主要有多肽類、細胞因子、血漿蛋白因子、重組酶及融合蛋白等類別。中國重組蛋白藥物市場以仿制藥為主,重組人胰島素、重組干擾素、重組粒細胞集落刺激因子為市場份額多的重組蛋白藥物,發展前景廣闊。人TGF重組蛋白定制
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