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什么是數字ELISA使用速度

來源: 發布時間:2024-12-25

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8孔芯片,使用更靈活、低成本;移液槍手動操作,常規熒光顯微鏡檢測,

低成本檢測,用時更短(15min),試劑用量更低

超敏:芯棄疾.數字ELISA,與Simoa同樣的檢測方案,將檢測結果二維化,使用成像方式,可精確量檢測區多少個微球載體上發生免疫反應,具有陽性熒光信號,理論可達fg級;使用常規ELISA試劑,測試IL-6等演示指標,也可輕松達到亞pg級(0.2-0.5pg/mL)10微升樣本,2-4項指標) 芯棄疾JX-8B數字ELISA,每個實驗室都能用的單分子檢測;什么是數字ELISA使用速度

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每個生物實驗室都用得起的單分子免疫檢測

從TNF-α數字ELISA測定的檢測限為~150aM(2.5fg/mL),相當于全血中的~600aM(10fg/mL);市場上可用的ELISA對TNF-α的比較高靈敏度在血清中的LOD為21fM(0.34pg/mL)(補充圖3)。兩種方法的目標蛋白零濃度尖峰均為為這些實驗提供有用的陰性對照:25%的血清含有多種蛋白質的微摩爾濃度,在這些高蛋白質背景之上可以檢測到非常低濃度的目標蛋白。我們還開發了一個證明用于顯示低濃度核酸可以檢測到的DNA的主要數字分析方法,而無需復制目標


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    芯棄疾JX-8B數字ELISA產品每個生物實驗室都用得起的單分子免疫檢測我們的方法利用了亞飛克爾反應室陣列(圖1C)我們稱之為單分子陣列(SiMoA)——可以分離和檢測單個酶分子20-24。這種方法借鑒了Walt等人20-23的工作陣列用于研究單個酶的動力學和抑制作用。我們的目標是利用捕獲和檢測單個酶的能力來檢測用酶標記的單個蛋白質分子。在這個單分子免疫測定的第一步(圖1A),在微球(直徑μm)上形成一個三明治抗體復合物,結合的復合物用酶標記,如同常規的基于微球的ELISA。當測定含有極低濃度蛋白質的樣品,蛋白質的比值分子(以及由此產生的酶標記復合物)與微球的比例很小(通常小于1:1),因此含有標記免疫復合物的微球百分比遵循泊松分布,導致單個微球上存在單一免疫復合物。例如,如果在(3000個分子)的蛋白質中捕獲并標記了50μM的蛋白質,并且在200,000個微球上進行標記,則珠子,然后,。無法檢測到這些低數量的酶使用標準檢測技術(例如,平板閱讀器)的標簽,因為熒光染料由每種酶生成的產物擴散到一個大卵試驗體積(通常為),并進入其中需要數十萬種酶標簽才能產生高于該水平的熒光信號背景。

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參考的其他高靈敏檢測方法: 芯棄疾單分子ELISA檢測盒,微量極速檢測,微量檢測15min就完成檢測!

兩種更多測試的模擬分析信號放大技術是免疫PCR和生物條形碼分析。免疫PCR通過將檢測抗體標記為DNA分子,然后使用PCR進行擴增和定量,從而提高靈敏度。生物條形碼分析利用了與DNA“條形碼”標記的抗分析物納米顆粒,這些納米顆粒在與捕獲在金微粒上的分析物結合后,從納米顆粒上脫雜以進行定量。這兩種方法相對于傳統免疫分析法的靈敏度提高了10到100倍,但尚未整合到所需的全自動系統中,也未用于多重分析。為了比較大限度地加速藥物發現、驗證新型生物標志物并將分子水平診斷引入臨床主流,需要一種具有高效率、高質量數據和成本效益的穩健、多重超靈敏蛋白質檢測技術。
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動力學上,對于200,000個微球分散在100μL中,珠子之間的平均距離約為80μm。大小為TNF-α和PSA(分別為17.3和30kDa)的蛋白質將在不到1min的時間內擴散80μm。表明,在2小時的孵育過程中,蛋白質分子的捕獲不會受到限制動力學上。其次,必須有足夠的珠子被加載到陣列上以限制泊松噪聲。200,000個珠子加載到50,000孔陣列中,通常會導致20,000–30,000個微球被困在1mL孔中。對于典型的背景信號為1%活性微球(見下文),這種裝載導致背景信號為200-300個活性微球檢測到,對應于泊松噪聲的可接受變異系數(CV)為6-7%。第三,過高的微球濃度可能導致:a)非特異性結合增加,降低信噪比;以及b)分析物與微球的比例過低,導致活性微球的比例過低,從而導致泊松噪聲引起的高CV。這些因素的平衡NatBiotechnol.作者手稿;可在PMC2010年12月1日獲得。Rissin等人第5頁因素意味著每100μLoftest樣品含有20萬到100萬顆珠子是比較好的數字ELISA。同時,為了獲得可接受的背景信號(1%)和泊松噪聲)。 芯棄疾JX-8B數字ELISA,低成本單分子檢測;進口數字ELISA使用效果

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開放:可匹配各種免疫檢測項目,兼容各種自行開發的試劑;

測試結果:國產普通熒光顯微鏡,科研或預研場景;

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