Piezo-ICSI程序:

使用直徑100-mm的細胞培養皿上蓋,準備操作盤；按照Piezo操作系統的要求，將4μL左右的汞從后部裝入注射針中，輕輕將汞推至針尖處，在20-25℃室溫下，準備進行顯微操作。具體操作前，首先取10枚卵母細胞置于15L含3 % suerose的HEPES-CZB操作滴中備用；然后將2.5μL精子溶液與5pLHEPES-CZB+ 12 % PVP-360操作滴充分混合；再將單個精子從尾部吸入注射針，用Piezo脈沖從頸部斷開頭和尾；連續剪切5個精子后，將吸入全部精子頭的注射針轉移到放置卵母細胞的操作滴中，準備將精子頭逐個注射至卵母細胞質中。注射時，從時鐘9點的方向吸住卵母細胞，使紡錘體保持在6點或12點的位置，從3點的方向輕輕進針，同時用Piezo脈沖擊穿透明帶，將透明帶碎片吹出注射針的同時，將精子頭吹至針尖處，繼續進針，直至針尖插入卵母細胞深處，幾乎貼近對側質膜時，用Piezo弱脈沖擊穿卵母細胞質膜，將精子頭吐出，回吸注入卵內多余的操作液，輕輕退針，完成一次注射。依次操作，盡快實現該批卵母細胞的注射，室溫放置5min,然后用大量CZB溶液洗滌ICSI胚胎，并且移入CO?箱培養。依法進行第二批卵母細胞的精子頭注射，在注射HCG后17 h,完成全部卵母細胞的精子注射。 PMM高精度控制，顯微注射針的移動分辨率達到0.1um，可以精確穿透目標，不會誤傷其他結構。北京PMM 壓電ICSI

雖然Piezo-ICSI對于大齡試管準媽媽們的***來說非常有意義，但這項技術的使用卻對生殖中心有著比較高的門檻。日本英醫院擁有三臺Piezo-ICSI儀器，儀器的顯微鏡來自日本精工企業，手動精密操作臺來自德國。作為**精密儀器，它的每一個組件成本都達百萬，整體造價超過千萬。

使用Piezo-ICSI不單單是設備升級，對培養師的操作要求和難度也是直線升級的。具體說來，因為受精操作是在高倍顯微鏡下利用操作桿來進行的，需要培養師同時配合操作觀察操作桿、顯微鏡、受精針和顯示屏。這么聽起來是不是感覺難度似乎還可以？然而事實上，在操作的過程中，培養師需要不斷的進行距離判斷的「切換」：想象一下，**挪動1cm，鏡下實際只會挪動0.1mm，但出現在視野中的范圍，實際上會有5cm那么大！ 美國透明帶打孔壓電單精注射通過使用壓電破膜儀 PMM PIEZO-ICSI，醫生可以更加準確地選擇和捕捉精子，提高受孕的幾率。

傳統的壓電陶瓷較其它類型的壓電材料壓電效應要強，從而得到了廣泛應用。但作為大應邊，高能換能材料，傳統壓電陶瓷的壓電效應仍不能滿足要求。于是近幾年來，人們為了研究出具有更優異壓電性的新壓電材料，做了大量工作，現已發現并研制出了Pb(A1/3B2/3)PbTiO3單晶（A=Zn2+,Mg2+）。這類單晶的d33比較高可達2600pc/N(壓電陶瓷d33比較大為850pc/N),k33可高達0.95（壓電陶瓷K33比較高達0.8），其應變>1.7%，幾乎比壓電陶瓷應變高一個數量級。儲能密度高達130J/kg，而壓電陶瓷儲能密度在10J/kg以內。鐵電壓電學者們稱這類材料的出現是壓電材料發展的又一次飛躍。現在美國、日本、俄羅斯和中國已開始進行這類材料的生產工藝研究，它的批量生產的成功必將帶來壓電材料應用的飛速發展。

ICSI技術作為輔助受精的一種手段，在近10年獲得長足發展。ICSI技術在動物受精機理研究、野生動物遺傳資源保存、拯救珍稀動物和胚胎工廠化生產等方面有著非常廣闊的應用前景。該技術已經成為人類臨床醫學上***男性不育癥的重要手段，并在全世界得到廣泛應用。

盡管ICSI已取得很大成就，但是其存在的問題也不容忽視。首先，由于人為地選擇，動物自身對精子優勝劣汰的選擇遭到破壞。這對動物種群的發展產生的影響還需長期深入的研究。如果能詳細了解精子的表型和基因型之間的關系，相信ICSI技術的可靠性會有所明確。其次，作為胚胎生物技術的一部分。ICSI 技術也存在總體效率低的問題，而且胚胎移植后妊娠率低而流產率高亦是目前存在的普遍問題。另外，存在出生動物的死亡和畸形等不良后果。因此要更深入地研究其機理和操作等問題，進一步改善ICSI技術。比如Piezo-ICSI技術就可以有效提高成功率。 PMM PIEZO具備良好的可擴展性，可以根據不同的需求進行調整和升級，滿足不同醫療機構的需求。

如今壓電陶瓷已經被科學家應用到**建設、科學研究、工業生產以及和人民生活密切相關的許多領域中，成為信息時代的多面手。在航天領域，壓電陶瓷制作的壓電陀螺，是在太空中飛行的航天器、人造衛星的“舵”。依靠“舵”，航天器和人造衛星，才能保證其既定的方位和航線。傳統的機械陀螺，壽命短，精度差，靈敏度也低，不能很好滿足航天器和衛星系統的要求。而小巧玲瓏的壓電陀螺靈敏度高，可靠性好。在潛入深海的潛艇上，都裝有人稱水下偵察兵的聲納系統。它是水下導航、通訊、偵察敵艦、清掃敵布水雷的不可缺少的設備，也是開發海洋資源的有力工具，它可以探測魚群、勘查海底地形地貌等。在這種聲納系統中，有一雙明亮的“眼睛”——壓電陶瓷水聲換能器。當水聲換能器發射出的聲信號碰到一個目標后就會產生反射信號，這個反射信號被另一個接收型水聲換能器所接收，于是，就發現了目標。目前，壓電陶瓷是制作水聲換能器的比較好材料之一。日本PRIME TECH 從PMM 150FU到PMM 4G，再到新一代的PMM 6。日本透明帶壓電

PMM通過將精子尾部與頭部割離,精子頭部吸入平口,在中低檔能量下即可穿透透明帶,進行單精子顯微注射。北京PMM 壓電ICSI

為什么具有“脆性卵膜”的卵子ICSI后容易退化？如下：一、卵子成熟度不足。卵子的成熟包括核成熟（以排出***極體為標志）以及胞質成熟，而胞質成熟往往滯后于核成熟，兩者并不完全同步。有對照研究表明，脆性卵膜組的成熟卵細胞比例***低于正常破膜組，ICSI后卵子退化率也高于正常破膜組，這提示了卵子成熟度與卵膜脆性具有一定的相關性，并**終影響了卵子ICSI后是否存活。二、雌***水平。到目前為止，關于雌***水平對脆性卵膜的影響，現有的研究結論并不一致，但歸根到底仍然可能是通過影響卵子成熟來改變卵膜的特性。三、ICSI機械操作。一方面ICSI是侵襲性操作，可能破壞卵膜、細胞骨架等細胞器，另一方面是具有脆性卵膜的卵子缺乏“漏斗”的保護作用，細胞骨架和卵膜更容易在ICSI過程中崩解。為避免脆性卵膜卵子ICSI后退化，除了改善注射方式（如進針前利用激光穿透或削薄透明帶，操作盡可能輕柔等），還可采用改進的Piezo-ICSI（壓電脈沖破膜輔助ICSI），能有效改善注射后卵子退化的情況。此外，在臨床促排卵方面，也可考慮調整藥物用量，在保證卵泡大小均勻的情況下，盡量推遲扳機時間，提高卵母細胞成熟度，減輕ICSI后卵子退化的比例，以盡可能保證ART***的效果。北京PMM 壓電ICSI