前沿性檢查：目前不作為生育力低下男性初步評(píng)估的常規(guī)方法。這一部分包括了非常專業(yè)化的、主要用于研究的方法和其他新興檢測(cè)技術(shù)。有研究認(rèn)為，氧化應(yīng)激可能是影響人類精子功能和妊娠結(jié)局的重要因素；新的證據(jù)也表明了精子DNA完整性和染色質(zhì)組裝與生育力的關(guān)系。前沿性檢查一節(jié)中詳細(xì)介紹了精子氧化應(yīng)激和活性氧實(shí)驗(yàn)、精子染色質(zhì)檢測(cè)(苯胺藍(lán)和色霉素A3染色)的具體實(shí)驗(yàn)操作及討論。手冊(cè)重寫(xiě)了計(jì)算機(jī)輔助精子分析(CASA)部分，強(qiáng)調(diào)了CASA對(duì)于檢測(cè)精子濃度的局限性與質(zhì)控要求，增加了CASA檢測(cè)精子超活化運(yùn)動(dòng)的內(nèi)容。對(duì)精子跨膜離子流和轉(zhuǎn)運(yùn)的功能分析，可更好地了解男性不育因素和男性生殖***疾病。為此，手冊(cè)新增了檢測(cè)精子跨膜離子流和轉(zhuǎn)運(yùn)的內(nèi)容。CASA系統(tǒng)操作簡(jiǎn)便，檢測(cè)速度快，且重復(fù)性優(yōu)于人工檢測(cè)。北京Hamilton Thorne精子分析

檢查具備條件

受檢者，經(jīng)歷一段經(jīng)常排精過(guò)程后，禁房事5－7天（上次排精到取標(biāo)本間隔時(shí)間至少不得少于100小時(shí)）； [1]備大口有蓋清潔干燥容器一個(gè)，以**方式獲取精液，一次全部射入容器，蓋上蓋，記錄標(biāo)本離體時(shí)間； 貼身保溫，30分鐘內(nèi)送到化驗(yàn)室，并向檢驗(yàn)員提供標(biāo)本取出時(shí)間。 精液常規(guī)觀察：精液總?cè)萘浚ê辽踊顒?dòng)情況，精子密度（個(gè)/毫升），精液液化時(shí)間（標(biāo)本取出到精液液化的時(shí)間），不動(dòng)精子（個(gè)/高倍視野）等。見(jiàn)不動(dòng)精子，須染色方可區(qū)分：不活動(dòng)的精子、死精子、未成熟精子等。找不到精子必須離心后檢驗(yàn)，仍然找不到精子；方可報(bào)告無(wú)精。經(jīng)三次取樣化驗(yàn)，結(jié)果仍然找不到精子方可確認(rèn)無(wú)精子癥。 人精子分析LIN所有操作人員都應(yīng)接受規(guī)范的CASA分析儀使用培訓(xùn)，嚴(yán)格按照使用指南進(jìn)行操作?。

精子計(jì)數(shù)是在顯微鏡下計(jì)算一次排出的精液中精子的數(shù)量將精子計(jì)數(shù)值乘以精液量就可得出一次**的量。

精液液化后將樣本按一定比例稀釋和固定后，滴于血細(xì)胞計(jì)數(shù)板上，在顯微鏡下計(jì)數(shù)紅細(xì)胞計(jì)數(shù)區(qū)內(nèi)的所有精子數(shù)并換算為每m1內(nèi)所含精子數(shù)。此外還可用電子細(xì)胞計(jì)數(shù)儀經(jīng)調(diào)整閾值設(shè)置后計(jì)數(shù)精子數(shù)量。

將已經(jīng)液化的精液標(biāo)本均勻混合，用白細(xì)胞計(jì)數(shù)吸管吸精液至0.5刻度，再吸稀釋液至11刻度，振蕩三分鐘，然后置于血球計(jì)數(shù)板內(nèi)，計(jì)數(shù)二大格（每格面積1平方毫米）之精子數(shù)，在尾數(shù)后加5個(gè)“0”即得每毫升精液內(nèi)精子數(shù)。例如計(jì)數(shù)為1280個(gè)，則每毫升精子應(yīng)為128,000,000。精液稀釋液之配制：重碳酸鈉5克、福爾馬林1毫升、蒸餾水加至100毫升。稀釋液內(nèi)重碳酸鈉有消化粘液的作用，福爾馬林有使精子制動(dòng)的作用。如精液之稠度過(guò)高而不易吸取時(shí)，可以精液1毫升混勻于稀釋液19毫升內(nèi)，稀釋后進(jìn)行計(jì)數(shù)。如精子的數(shù)目極少，亦可改為稀釋10倍計(jì)數(shù)。每次排精75%的精子是從附睪尾部所貯存的，還有25%是由輸精管道的其他部分來(lái)的，因此單憑一次排精的精子計(jì)數(shù)來(lái)衡量睪丸生精機(jī)能是不***的。只有在排精后間隔4-5天以后多次精液檢查，才能比較正確地從這些精子計(jì)數(shù)來(lái)反映睪丸的生精機(jī)能。

精液顯微鏡檢查

(1)精子存活率：排精后30～60分鐘，正常精子存活率應(yīng)為80%～90%，精子存活率降低是導(dǎo)致不育的重要原因。(2)精子活動(dòng)力：指精子活動(dòng)狀態(tài)，也是指活動(dòng)精子的質(zhì)量。世界衛(wèi)生組織(WHO)推薦將精子活動(dòng)力分為4級(jí)：①精子活動(dòng)好，運(yùn)動(dòng)迅速，活潑有力，直線向前運(yùn)動(dòng)；②精子活動(dòng)較好，運(yùn)動(dòng)速度尚可，游動(dòng)方向不定，呈直線或非直線運(yùn)動(dòng)，帶有回旋；③精子運(yùn)動(dòng)不良，運(yùn)動(dòng)遲緩，原地打轉(zhuǎn)或抖動(dòng)，向前運(yùn)動(dòng)能力差；④死精子，精子完全不活動(dòng)。正常精子活動(dòng)力應(yīng)在③級(jí)以上，若＞40%的精子活動(dòng)不良(③、④)級(jí)，常是導(dǎo)致男性不育的重要原因。精子活動(dòng)力低，主要見(jiàn)于精索靜脈曲張、泌尿生殖系統(tǒng)非特異性***，應(yīng)用某些藥物如抗瘧藥、雄***等所致。 不同品牌CASA分析的結(jié)果差異較大，因此，更高效精確的精液質(zhì)量檢測(cè)系統(tǒng)對(duì)促進(jìn)男科學(xué)發(fā)展具有重要的意義。

Hamilton Thorne精子分析儀IVOS Ⅰ與IVOS Ⅱ一致性比對(duì)分析

根據(jù)質(zhì)量控制的要求,對(duì)新精子分析系統(tǒng)進(jìn)行性能驗(yàn)證后,應(yīng)與舊系統(tǒng)進(jìn)行一致性評(píng)價(jià),從而保證檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性。方法:選用原有Hamilton Thorne精子分析儀IVOSⅠ為參比儀器,新購(gòu)儀器IVOSⅡ?yàn)閷?shí)驗(yàn)儀器,對(duì)精子分析系統(tǒng)的主要參數(shù)(精子濃度、前向運(yùn)動(dòng)精子百分率、總活力)進(jìn)行分析比對(duì)。結(jié)果:兩臺(tái)儀器的方法內(nèi)和方法間離群值檢驗(yàn)、偏倚圖和散點(diǎn)圖的線性關(guān)系和離群值檢測(cè)所有參數(shù)均能符合比對(duì)要求,檢測(cè)結(jié)果具有相關(guān)性;對(duì)實(shí)驗(yàn)儀器的檢測(cè)結(jié)果適合范圍的檢驗(yàn),當(dāng)其精子濃度r=0.988,前向運(yùn)動(dòng)精子百分率r=0.975,總活力r=0.981,r均≥0.975,表明取值范圍合適;對(duì)預(yù)期偏倚(Bc)的接受性評(píng)價(jià)表明當(dāng)精子濃度在12×10~6/ml,允許總誤差(TEa)為6.67%;當(dāng)前向運(yùn)動(dòng)精子百分率<31%,TEa為2.34%,兩項(xiàng)檢測(cè)的Bc上限<1/2允許誤差(Ea),實(shí)驗(yàn)儀器經(jīng)比對(duì)分析顯示符合質(zhì)控要求。結(jié)論:通過(guò)比對(duì)分析,得出兩臺(tái)精子分析系統(tǒng)的主要參數(shù)(精子濃度、前向運(yùn)動(dòng)精子百分率、總活力)結(jié)果具有可比性,檢測(cè)結(jié)果一致,可同時(shí)用于臨床標(biāo)本的檢測(cè)。 傳統(tǒng)的CASA系統(tǒng)仍使用傳統(tǒng)閾值圖像處理方法，準(zhǔn)確率有待提高。兔子精子分析DCL

IVOS具有高分辨率和高靈敏度的特點(diǎn)，能夠捕捉到微小的細(xì)節(jié)和變化，進(jìn)一步提高了精子分析的準(zhǔn)確性。北京Hamilton Thorne精子分析

醫(yī)生為了鑒定男性生育能力，常囑男方作精液檢查，正常精液顏色為灰白色或乳白色。如節(jié)欲時(shí)間長(zhǎng)者，可呈淡黃色，若出現(xiàn)鮮紅色. 暗紅色，則提示患者有炎癥或生殖道損傷。每次排精量為2~6毫升，常受排精次數(shù)與頻率的影響。新鮮精液呈稠厚膠凍狀，1小時(shí)之內(nèi)應(yīng)液化為稀薄的液體，用一根小玻璃棒插入精液中再提起，所形成的精液絲長(zhǎng)度一般不超過(guò)2厘米，否則視為異常。精液呈弱堿性，PH值為7.2~7.8。正常精子數(shù)應(yīng)超過(guò)2000萬(wàn)/毫升。排精后1小時(shí)內(nèi)活動(dòng)精 ＞=50%。世界衛(wèi)生組織推薦精子活動(dòng)力分為四級(jí)：0級(jí)：不活動(dòng)；1級(jí)：精子原地?cái)[動(dòng)；2級(jí)：有中等的前向運(yùn)動(dòng)；3級(jí)：前向運(yùn)動(dòng)活躍，快速直線運(yùn)動(dòng)。正常的精子活動(dòng)力為2~3級(jí)的精子＞=40%~50%.精子形態(tài)：畸形精子小于50%。分析男性生育能力不能單從精液的一項(xiàng)指標(biāo)定論，應(yīng)對(duì)精子數(shù)量 活力 活動(dòng)率 液化時(shí)間 畸形率等多方面進(jìn)行綜合能力分析。 采集精液前5～7天內(nèi)必須停止性生活，并且不得有**、夢(mèng)遺等情況，還應(yīng)禁煙戒酒，忌服對(duì)生精功能有影響的藥物等。北京Hamilton Thorne精子分析