方法:使用兩種已知濃度的質控乳膠珠溶液,1份濃度為(35±5)×106/ml,另1份濃度為(18.0±2.5)×106/ml,評價4種計數方法的準確性和精確性,并比較4種方法計數精液的結果。結果:計數乳膠珠時,CellVU計數池的結果**接近已知濃度,分別為(39.70±4.76)、(19.09±2.02)×106/ml,變異系數(CV)值分別為12.80%和10.58%;血細胞計數池和Makler計數池結果均高于已知濃度,前者為(44.84±4.86)×106/ml、(21.04±1.87)×106/ml,CV值分別為10.81%和8.89%,后者為(52.36±7.78)×106/ml、(24.54±3.67)×106/ml,CV值分別為14.86%和14.96%;CASA系統結果低于已知濃度,為(28.53±2.06)、(14.62±0.95)×106/ml,但CV值比較低,分別為7.22%和6.50%。計數精液時,CellVU計數池與CASA系統結果差異無***性(P=0.71),分別為(45.28±34.52)、(41.96±31.93)×106/ml,血細胞計數池和Makler計數池結果差異無***性(P=0.14),分別為(76.98±59.90)、(63.89±53.84)×106/ml,CellVU計數池、CASA系統與血細胞計數池、Makler計數池結果間差異***(P<0.05或P<0.01)。結論:計數精液時,CASA系統與CellVU計數結果差異無***性。各實驗室可選擇合適的手工或CASA計數方法。WHO第6版明確提出:使用CASA系統須遵循適當的程序步驟,才能獲得可靠和可重復的結果。香港密度精子分析BCF
精子分析儀工作原理
以灰度識別CASA為例,采用高分辨率的攝影技術與顯微鏡結合,**標本液化后吸入計數,通過顯微鏡放大后,用圖像采集系統獲取精子動、靜態圖像后輸入計算機。根據設定的精子大小和灰度、精子運動移位及運動參數,對采集圖像進行精子密度、活動力、活動率、運動特征等幾十項檢驗項目動態分析,由計算機處理后,打印出“**分析檢查報告以及精子動態特征分布圖”。一次能對1000個精子進行動態檢測分析,2-3分鐘即可完成檢測 [1]。
優點:
操作簡便,用量少,檢測速度快,重復性優于人工檢測,并且能夠快速、準確的測定精子密度、活力、精子分級等,還可提供精子運動狀態的多種參數等。
缺點:
影響分析結果的因素較多,除**本身性質所含的固有誤差外,不同的精子計數池的相對準確性和精確性可產生明顯不一致的效果。 北京瀕危物種精子分析DCL全自動精子分析儀極大提高臨床檢驗水平,廣泛應用于泌尿科,男性科以及計劃生育、優生優育研究等。
[臨床意義]1. 若數日未**、且精液量少于1.5ml者為不正常,說明精囊或前列腺有病變;若精液量減至數滴,甚至排不出,稱為無精液癥,見于生殖系統的特異性***,如結核、淋病和非特異性炎癥等。2.若精液量過多(一次超過8ml),則精子被稀釋而相應減少,有礙生育。二、顏色檢查[正常參考值]灰白或乳白色,久未**者可呈淺黃色。[臨床意義]1.黃色或棕色膿樣精液:見于精囊炎或前列腺炎等。2.鮮紅或暗紅色血性精液:見于生殖系統的炎癥、結核和**等。三、粘稠度和液化檢查[正常參考值]粘稠膠凍狀,30分鐘內自行液化。[臨床意義]1.精液粘稠度低,似米湯樣,可因精子量減少所致,見于生殖系統炎癥。??2.液化時間過長或不液化,可抑制精子活動而影響生育,常見于前列腺炎癥等。四、精子活動率檢測[正常參考值]正常精子活力一般在Ⅲ級(活動較好,有中速運動,但波形運動的較多)以上,**后1小時內有Ⅲ級以上活動能力的精于應>0.60。[臨床意義]如果0級(死精子,無活動能力,加溫后仍不活動)和Ⅰ級(活動不良,精子原地旋轉、擺動或抖動,運動遲緩)精子在0.40以上,常為男性不育癥的重要原因之一。
測定精子密度和精子總數的方法主要包括顯微鏡計數和全自動分析。1.顯微鏡計數:這是傳統的測定方法,需要收集精液,通常是使用量杯。收集后,應在實驗室中盡快進行計數。應在光學顯微鏡下將精子進行分類,這一步非常重要,因為完整的精子才能被計數。然后,將剩余的精液樣本通過自然沉降或離心的方法讓精子下沉,通過顯微鏡觀察并計數。這種方法需要一定的經驗和技巧,而且受到許多因素的影響,如精子的活動性、濃度、形態等。2.全自動分析:隨著科技的發展,現在有全自動的精子分析儀,可以快速準確地測定精子密度和總數。這種方法通過激光技術進行,可以測量大量精子,包括前向運動的精子。這些儀器通??梢蕴峁└_的結果,并且減少了人為錯誤。在進行精子計數前,男性應避免長時間禁欲,因為這可能會影響精子的數量和質量。同時,健康的飲食和生活方式也有助于提高精子的數量和質量。傳統的CASA系統仍使用傳統閾值圖像處理方法,準確率有待提高。
精液一般檢查
(1)精液量:正常人一次排精2~5ml。(2)顏色和透明度:正常剛射出的精液呈乳白色或灰白色,液化后呈半透明乳白色,久未排精者可呈淡黃色。鮮紅色或暗紅色的血精見于生殖系統炎癥、結核、和**,黃色膿樣精液,見于精囊炎或前列腺炎。(3)粘稠度和液化:正常新鮮的精液排出后數秒呈粘稠膠凍狀,在精液中纖溶酶的作用下30分鐘后開始液化。如果粘稠度降低呈米湯樣,可能是精子數量減少,見于生殖系統炎癥,精液不凝固見于精囊阻塞或損傷;如果精液1小時后不液化,可能是由于炎癥破壞纖溶酶所致,如前列腺炎,精子不液化可以抑制精子活動力而影響受孕。(4)酸堿度:pH值。正常精液呈弱堿性pH7.2~8.0,以利于中和酸性的陰道分泌物,pH值小于7或大于8都能影響精子的活動和代謝,不利于受孕。 該設備的設計緊湊,占用空間小,適合不同規模的實驗室使用。北京計數精子分析ALH
CASA系統可以給出多種精子運動狀態的參數,這些參數能夠幫助更有效地了解精子的運動特性。香港密度精子分析BCF
CASA系統在男性生殖能力檢驗應用中的功能要求和參數設置CASA是將現代化的計算機技術和先進的圖象處理技術應用于精子質量的臨床檢驗,通過對精子動(靜)態圖象中精子特性的***分析,為臨床提供有關精子質量各項指標的準確數據。CASA系統一般包括硬件和計算機軟件支持系統幾個部分:(1)相差顯微鏡、恒溫裝置和**技術板(Makler板、Macro板或MicroCell計數池等);(2)高速、高分辨率的攝像機和電視監視器組成的攝像系統;(3)計算機分析處理系統及打印機打印輸出。香港密度精子分析BCF