Ham’sF-12K培養基是Ham’sF-12營養混合物的Kaighn’s改進型,在Ham’sF-12的基礎上提高了氨基酸和**酸的濃度,降低了葡萄糖的用量,并修改了鹽的成分和含量(Konigsbergs)。Ham’sF-12K培養基**初設計用于培養原代人肝細胞以及分化的大鼠和雞的細胞。針對***的細胞培養應用,我們提供多種組分的Ham’sF-12K改良培養基。酚紅在培養基中被用來作為PH值的指示劑,用以持續監測培養液的酸堿度,在低PH值時酚紅使培養液呈黃色,而較高的PH值時使培養液呈紫色,PH值~,**適合細胞培養。但酚紅也有一些缺點,研究表明酚紅可以模擬固醇類***(特別是雌***)的作用,因此在用到雌***敏感的細胞時(如乳腺組織),比較好使用不含酚紅的培養基。酚紅會干擾流式細胞分析時候的檢測。此外,一些無血清培養基的配方中若存在酚紅會干擾鈉-鉀平衡。青霉素-鏈霉素混合液通常也被稱為“雙抗”,是體外培養中為預防微生物污染**常用的***,其中,青霉素能夠干擾細菌細胞壁的合成,對革蘭陽性菌特別有效;而鏈霉素能夠與細菌核糖體30S亞單位結合,抑制細菌蛋白質的合成,對革蘭氏陰性菌和革蘭氏陽性菌均有效,但對革蘭氏陰性菌特別有效。青霉素和鏈霉素聯合使用可以預防絕大部分的細菌污染。 TNM-FH昆蟲培養基不含蛋白質、脂類或任何生長因子,故此產品需搭配血清或無血清添加物使用。貴州醫療細胞培養基源頭廠家
隨意調節葡萄糖的濃度,方便快捷。高糖型培養基普遍應用于生長快、粘附性低的細胞、雜交瘤的骨髓瘤細胞、克隆細胞、DNA轉染的轉化細胞、各種原代病毒宿主細胞、單一細胞的培養以及疫苗的生產,例如利用CHO細胞表達EPO和生產乙肝疫苗。低糖培養基更適合代謝作用較慢、依賴性貼壁細胞的培養。HEPES是一種優良的生物緩沖劑,對細胞無毒性作用,添加HEPES的培養基能夠較長時間保持恒定的PH范圍,可以有效的防止培養液PH波動較大對細胞生長產生不利的影響。可用于無CO2培養箱。酚紅在培養基中被用來作為PH值的指示劑,用以持續監測培養液的酸堿度,在低PH值時酚紅使培養液呈黃色,而較高的PH值時使培養液呈紫色,PH值~,適合細胞培養。但酚紅也有一些缺點,使用不含酚紅的培養基。酚紅會干擾流式細胞分析時候的檢測。此外,一些無血清培養基的配方中若存在酚紅會干擾鈉-鉀平衡。青霉素-鏈霉素混合液通常也被稱為“雙抗”,青霉素能夠干擾細菌細胞壁的合成,對革蘭陽性菌特別有效;而鏈霉素能夠與細菌核糖體30S亞單位結合,抑制細菌蛋白質的合成,對革蘭氏陰性菌和革蘭氏陽性菌均有效,但對革蘭氏陰性菌特別有效。青霉素和鏈霉素聯合使用可以預防絕大部分的細菌污染。云南醫療細胞培養基全國發貨MEMα是一種改良的MEM培養基,在MEM的基礎上又添加了NEAA、硫酸鋅、VB12、生物素、抗壞血酸等成分。
細胞培養基的種類很多,按其來源分為合成培養基和天然培養基(目前使用的培養基絕大部分是合成培養基),按其物質狀態分為干粉培養基和液體培養基兩類。干粉培養基需由實驗者自己配制并滅菌,液體培養基由專業商家提供,用戶可直接使用,非常方便。1、合成培養基的主要成分有:氨基酸、碳水化合物、無機鹽、維生素及其它輔助物質:氨基酸氨基酸是組成蛋白質的基本單位。不同種類的細胞對氨基酸的要求各異,但有幾種氨基酸細胞自身不能合成,必須依靠培養液提供,這幾種氨基酸稱為必需氨基酸。其中谷氨酰胺是細胞合成核酸和蛋白質必需的氨基酸,在缺少谷氨酰胺時,細胞生長不良而死亡。因此,各種培養液中都有較大量的谷氨酰胺。但是,由于谷氨酰胺在溶液中很不穩定,應置于-20℃冰箱中保存,在使用前加入培養液內。已含谷氨酰胺的培養液在4℃冰箱中儲存2周以上時,還應重新加入原來量的谷氨酰胺。碳水化合物碳水化合物是細胞生長主要能量來源,其中有的是合成蛋白質和核酸的成分。主要有葡萄糖、核糖、脫氧核糖和醋酸等。無機鹽培養液中無機鹽的主要功能是幫助細胞維持滲透壓平衡。此外,通過提供鈉,鉀和鈣離子,幫助細胞調節細胞膜功能。
無血清培養基中通常需要添加一些額外的組分,才能幫助細胞貼壁生長,包括以下幾大類物質:1)促貼壁物質:一般為細胞外基質,如纖連蛋白、層粘連蛋白等。它們還是重要的分裂素以及維持正常細胞功能的分化因子,對許多細胞的繁殖和分化,起著重要作用。纖連蛋白主要促進來自中胚層細胞的貼壁與分化,這些細胞包括成纖維細胞、肉瘤細胞、粒細胞、腎上皮細胞、腎上腺皮質細胞、CHO細胞、成肌細胞等。2)促生長因子:針對不同細胞添加不同的生長因子。也是刺激細胞生長、維持細胞功能的重要物質,有些是許多細胞必不可少的,如胰島素。3)酶抑制劑:培養貼壁生長的細胞,需要用胰酶消化傳代,在無血清培養基中需含酶抑制劑,以終止酶的消化作用,達到保護細胞的目的。常用的是大豆胰酶抑制劑。4)結合蛋白和轉運蛋白:常見如轉鐵蛋白和牛血清白蛋白。牛血清白蛋白的添加量比較大,可增加培養基的粘度,保護細胞免受機械損傷。許多旋轉式培養的無血清培養基都含有牛血清白蛋白。5)微量元素:硒是常見的。Ham’s F-10適合用于人二倍體細胞的培養,低血清條件下細胞的克隆化培養,及動物的原代細胞培養。
1.細胞培養基的種類按照細胞培養基的發展歷史,細胞培養基大致可分為平衡鹽溶液、天然細胞培養基、合成細胞培養基、無血清細胞培養基、限定化學成分細胞培養基等幾大種類。(balancedsaltsolution,BSS)BSS主要是由無機鹽、葡萄糖組成,它的作用是維持細胞滲透壓平衡,保持pH穩定及提供簡單的營養。其主要用于細胞的漂洗、配制其他試劑等。幾種常用的BSS配方如下(表1-1)。D-Hank's與Hank's的一個主要區別是前者不含有Ca2+和Mg2+,因此D-Hank's常用于配制胰酶溶液。因為Ca2+、Mg2+是細胞膜的重要組成成份,參與細胞粘附等功能,使用不含Ca2+、Mg2+的BSS可避免細胞結團。此外,Hanks液和Earle液是常用的BSS基礎溶液,前者緩沖能力較弱,適合于密閉培養;后者緩沖能力較強,適合于5%CO2的培養條件。天然培養基指來自動物體液或利用組織分離提取的一類培養基,如血漿、血清、雞胚浸出液等。其優點是營養成分豐富,培養效果良好,但缺點是成分復雜,來源受限且制作過程復雜、批間差異大。目前使用的天然培養基是血清,另外各種組織提取液、促進細胞貼壁的膠原類物質在培養某些特殊細胞也是必不可少。水解乳蛋白是乳白蛋白經蛋白酶和肽酶水解的產物。MEM α培養基是一種改良的MEM培養基,與MEM培養基相比MEM α培養基營養更為豐富。云南醫療細胞培養基全國發貨
Dulbecco’s 改良培養基與MEM培養基相比,氨基酸的含量增加了2倍,維生素的含量增加了4倍。貴州醫療細胞培養基源頭廠家
Leibovitz’sL-15培養基的緩沖系統由磷酸鹽和游離堿基氨基酸組成,代替了傳統的碳酸氫鈉緩沖系統,同時,用半乳糖和**酸鈉代替葡萄糖可以防止酸性代謝副產物的形成,有助于維持培養液PH的穩定,適合用于非CO2平衡環境的細胞培養。Leibovitz’sL-15培養基適用于猴腎細胞和HEP-2的培養、原代(如胚胎和成人組織)細胞分離、多種病毒的培養以及神經元的培養等。青霉素-鏈霉素混合液通常也被稱為“雙抗”,是體外培養中為預防微生物污染常用的***,其中,青霉素能夠干擾細菌細胞壁的合成,對革蘭陽性菌特別有效;而鏈霉素能夠與細菌核糖體30S亞單位結合,抑制細菌蛋白質的合成,對革蘭氏陰性菌和革蘭氏陽性菌均有效,但對革蘭氏陰性菌特別有效。青霉素和鏈霉素聯合使用可以預防絕大部分的細菌污染。本產品含有多類細胞培養所需的氨基酸、維生素、無機鹽等多種成分,但不含蛋白質、脂類或任何生長因子,故此產品需搭配血清或無血清添加物使用。 貴州醫療細胞培養基源頭廠家
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