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廣州微流控芯片數字PCR如何選型

來源: 發布時間:2022-02-10

        精細診斷是精細醫學的關鍵環節,液體活檢作為一種無創、均一的檢測技術,迅速成為精細診斷領域的新星,2015年被《麻省理工大學科技評論》評選為年度**突破技術, 2017年入選世界經濟論壇評出的全球**新興技術,引發了全球科研、臨床和產業界的極大熱情,已在**、產前診斷、***移植等疾病領域***被應用。

       數字PCR技術與高通量的二代測序技術,共同組成液體活檢領域的兩大利器;數字PCR技術是公認的液體活檢領域靈敏度比較高的檢測方法,采用有限稀釋的方法將目標分子分割到**的反應體系中,在不依賴標準曲線條件下實現靶標***定量檢測,能檢測低至0.01%的突變基因;Bio-Rad及Thermo Fisher目前是這一領域的主導者,分別采用微滴或芯片方式將樣本分割成兩萬份,MiniDrop?創新性采用高壓驅動的方法將樣本分割成50萬份,打破了國外廠商在微滴式數字PCR領域的壟斷。



MicroDrop?數字PCR平臺是由永諾生物自主研發并已投入生產的微滴式數字PCR檢測系統。廣州微流控芯片數字PCR如何選型

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       在定量PCR時,我們常常糾結一個問題,究竟是相對定量還是***定量呢?如今,你無需糾結了,因為數字PCR(digital PCR)來了。盡管這兩種技術有些類似,都是估計起始樣品中的核酸量,但它們有一個重要的區別。定量PCR是依靠標準曲線或參照基因來測定核酸量,而數字PCR則讓你能夠直接數出DNA分子的個數,是對起始樣品的***定量。因此特別適用于依靠Ct值不能很好分辨的應用領域:拷貝數變異、突變檢測、基因相對表達研究(如等位基因不平衡表達)、二代測序結果驗證、miRNA表達分析、單細胞基因表達分析等。廣州微流控芯片數字PCR如何選型線性范圍達到6個數量級,靈敏度低至萬分之一。

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       微滴式數字PCR系統在傳統的PCR擴增前對樣品進行微滴化處理,即將含有核酸分子的反應體系分成成千上萬個納升級的微滴,其中每個微滴或不含待檢核酸靶分子,或者含有一個至數個待檢核酸靶分子。經PCR擴增后,逐個對每個微滴進行檢測,有熒光信號的微滴判讀為1,沒有熒光信號的微滴判讀為0,根據泊松分布原理及陽性微滴的個數與比例即可得出靶分子的起始拷貝數或濃度。


與傳統PCR相比所具有的優勢

       不依賴Ct值或內參基因,即可確定低至單拷貝的待檢靶分子的***數目。微滴技術讓數字PCR更低成本,且更實用。





       MicroDrop-100微滴式數字PCR是具有國內自主知識產權的第三代JUE對定量PCR系統,整套系統由MicroDrop-100A微滴生成儀、 MicroDrop-100B微滴檢測儀以及結果數據分析設備等構成。系統通過自主設計的微流控芯片,利用油水相不兼容的原理,在2分鐘時間內將PCR體系分割成100,000油包水的體系,每個體系為**的PCR反應體系,體積約為0.2nL,單次實驗一次可生成8個樣本的油包水體系。由于油包水體系的分割效應,使得數字PCR受PCRYi制物的影響相對較小,有利于復雜環境樣本的實驗操作。區別于熒光定量PCR的過程性判讀方法,數字PCR結果判讀為終點法,故其對PCR擴增效率的依賴也相對較小。  采用主流可靠的解決方案,由微滴生成儀、微滴檢測儀、數據分析軟件組成。

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二代測序輔助建庫

       目前靶向測序建庫方法包括擴增子方法,在均相溶液中,當擴增引物增加時,由于擴增引物之間的相互作用,從而影響擴增的效率;如果將其分散到大量微液滴中擴增,將可降低引物間相互作用,提高擴增效率。同時還可以實現對于少量模板的有效擴增,得到更多的有效測序數據。


CRISPR-Cas9基因編輯結果驗證

       CRISPR-Cas9技術的發明,是基因編輯技術的一大突破,但如何驗證實驗是否成功,仍需要高靈敏度的檢測方法,數字PCR技術可以滿足這一需求。Broad研究所張鋒團隊發明了以CRISPR為基礎的SHERLOCK技術可以對核酸進行高靈敏度的定性檢測,但精確定量評估時仍采取了數字PCR進行確認。 MiniDrop?研發團隊由微流控、光學、機電學、化學、臨床醫學、分子生物學等多學科交叉領域的**組成。南通廣東數字PCR正規代理

全封閉防污染設計,一鍵式自動化操作。廣州微流控芯片數字PCR如何選型

無創產前檢查

       鐮狀細胞貧血(sickle cell anemia)是HBB基因突變引起的常染色體顯性遺傳病,有嚴重的危害,可以導致高達5%的胎兒死亡率及4.62%的孕婦死亡率。而精細有效的無創產前診斷是預防鐮狀細胞貧血患兒出生的有效方法。研究人員采用dPCR技術檢測孕婦胎兒游離DNA(cff-DNA)HBB基因突變。結果顯示,dPCR技術能夠確定87%的男性胎兒(n=45)和75%的女性胎兒(n=20)HBB基因的突變狀態。當cff-DNA濃度大于7%時,可以**的檢測出HBB基因突變[3],可以說是相當厲害了。


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浚和(上海)儀器有限公司是一家供應國內外先進儀器和設備的專業供應商和服務商,致力于為客戶提供專業的定制化解決方案。多年來,持續為醫藥、化工、高校、科研單位、檢測院等多個行業提供先進的產品和專業的服務。

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公司主要經營產品包括:等離子清洗機、真空泵、噴霧干燥器、數字PCR、高壓滅菌鍋、培養箱、切片機、水分測定儀、激光粒度儀、光譜儀、溫濕度記錄儀等,目前主要合作品牌有:日本雅馬拓YAMATO、日本KASHIYAMA、日本HORIBA、廣州永諾 、日本KEM等。同時,公司還提供專業的技術服務,如設備的維護、驗證等。

浚和儀器將始終以行業特點為立足點,以客戶需求為導向,不斷地提高自身專業技術能力,不停地完善客戶服務質量,在發展中保持創新的精神,力求與客戶共同進步,為行業的發展作出不懈的努力。