數字PCR也叫Digital PCR(dPCR),是近幾年發展起來的一種核酸定量分析技術。相較于傳統熒光定量PCR來說,數字PCR對結果的判定不依賴于擴增曲線循環Ct值,不受擴增效率的影響,能夠直接讀出DNA的分子個數,能夠對起始樣本核酸分子***定量。
數字PCR基本原理是將一個樣本分成幾十到幾萬份,然后再將其分配到不同的反應單元中,使每個微滴單元包含一個或多個拷貝的核酸分子(即DNA模板),每個單元都會對目標分子進行擴增,然后再對每個單元進行熒光信號的統計并計算。相對而言,傳統PCR或qPCR反應都是發生于同一體系當中,這也是數字PCR與其比較大的區別。
基因表達差異的監測。上海MicroDrop-100數字PCR解決方案
與常規PCR方法相比,數字PCR有如下優勢:
1、能夠***定量:常規PCR定量需要制定已知拷貝數的標準DNA曲線,但是由于待檢樣本與標準曲線不在統一體系,條件上會存在差異,另外加上PCR擴增效率的差異從而影響定量結果的準確性。而數字PCR不受標準曲線和擴增動力學影響,可進行***定量。
2、樣本需求量低:適用于珍貴樣本或核酸降解嚴重的樣本。
3、靈敏度高:數字PCR是將傳統PCR反應體系分割成數萬個**PCR反應,這些反應可以精確地檢測很小的目的片段差異、單拷貝甚至低濃度的混雜樣本。且能避免非同源異質雙鏈的形成。
4、高耐受性:由于目的序列被分配到多個**反應體系中,***降低了背景信號和***物對反應的干擾,擴增基質效應大大減小。 廣州廣州永諾數字PCR支持多重數字PCR,可選全中文分析軟件。
MiniDrop數字PCR儀由Creator微滴生成儀、Detector微滴檢測儀、MD Microchip微流控芯片及MD Plotter數據分析軟件組成,該系統的**為微流控微滴生成技術,采用原創性的油液,在40um微管道中利用氣壓驅動在2分鐘內生成50萬微滴,單次運行生成400萬微滴,微滴體積達皮升級,檢測線性范圍達到5個數量級,各項指標均超越國內外的主流產品。
MiniDrop創新性采用高壓驅動的方法將樣本分割成50萬份,打破了國外廠商在微滴式數字PCR領域的壟斷。
微滴式數字PCR系統為微流控微滴生成技術,采用原創性的油液,單個樣本在微米級流道中利用氣壓驅動在3分鐘內生成10萬微滴,單次運行生成80萬微滴,微滴體積達皮升級,檢測線性范圍達到6個數量級,各項指標均超越國內外主流產品。
在液滴生成數上,MicroDrop?能達到國外同級別產品的5倍。與此同時,設備制作成本只有國外同類產品的一半。這減低了精細醫療的成本,打破了國外廠商在微滴式數字PCR領域的壟斷。這意味著在未來,采用外周血、唾液、尿液、腦脊液等樣本進行低成本、高靈敏、快速的無創檢測成為可能。
CRISPR-Cas9基因編輯結果驗證。
數字PCR可以直接計算目標序列的拷貝數,因此無需依賴于對照樣品和標準曲線就可以進行精確的***定量檢測;此外,由于數字PCR在進行結果判讀時*判斷有/無兩種擴增狀態,因此也不需要檢測熒光信號與設定閾值線的交點,完全不依賴于Ct值的鑒定,因此數字PCR的反應受擴增效率的影響**降低,對PCR反應***物的耐受能力**提高;數字PCR實驗中標準反應體系分配的過程可以極大程度上降低與目標序列有競爭性作用的背景序列濃度,因此數字PCR技術也特別適合在復雜背景中檢測稀有突變。檢測靈敏度高達萬分之前列式數字PCR哪家好
準確的定量結果和優異的重復性。上海MicroDrop-100數字PCR解決方案
產品特點
無需依賴傳統熒光定量PCR的標準曲線即可實現核酸的***定量。
全封閉防污染設計,一鍵式自動化操作。
采用主流可靠的解決方案,系統由微滴生成儀、微滴檢測儀、數據分析軟件組成,并可選配同品牌封膜儀、PCR儀等
微滴生成采用油包水乳化微滴技術,在微管道中利用氣壓驅動,2mins生成高達10萬個皮升級的微滴,高效高產,支持多重數字PCR的開發。
微滴生成芯片為高精度微流控芯片設計,三維微納防污染結構,一張芯片可同時處理8個樣本。
微滴檢測使用雙通道熒光,支持EvaGreen染料法及探針法。
檢測線性范圍達到6個數量級,基因突變檢測靈敏度高達0.01%。
檢測通量高,可一次檢測高達96個樣本,支持靈活設定。
全中文分析軟件,人性化界面設置,多種分析工具供用戶選擇。
本系統為開放式平臺,可使用第三方PCR反應液,支持用戶自行開發試劑、產品。
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