研究方向病原微生物的檢測(cè)(***、細(xì)菌等)疾病預(yù)防控制中心、出入境檢驗(yàn)檢疫局系統(tǒng)的實(shí)驗(yàn)室目前主要采用基于TaqMan探針?lè)ǖ亩縋CR體系對(duì)病原微生物進(jìn)行核酸水平的檢測(cè),而這些目前正在使用著的檢測(cè)體系可以無(wú)縫地轉(zhuǎn)移到QX200上,從而滿足該類實(shí)驗(yàn)室對(duì)于檢測(cè)結(jié)果的要求:靈敏度更高、重復(fù)性更好、無(wú)需依賴標(biāo)準(zhǔn)曲線的***定量結(jié)果,同時(shí)操作簡(jiǎn)便。對(duì)于其他類型的研究實(shí)驗(yàn)室,也可以利用ddPCR靈敏度高的特點(diǎn),對(duì)各種樣品中的病原微生物展開***的研究。如HIV抗逆轉(zhuǎn)錄***治療過(guò)程中***殘留量的監(jiān)控;HBV耐藥突變的檢測(cè);HCV的分子分型;抗甲氧西林金黃色葡萄球菌的院內(nèi)***監(jiān)控;環(huán)境微生物不同功能基因之間的連鎖分析等等。數(shù)字PCR ,就選浚和(上海)儀器科技有限公司,有需求可以來(lái)電咨詢!江蘇分析數(shù)字PCR要多少錢
與常規(guī)的PCR的方法相比,dPCR有很好的優(yōu)勢(shì)。***定量常規(guī)PCR和實(shí)時(shí)熒光PCR定量檢測(cè)都需要已知拷貝數(shù)的標(biāo)準(zhǔn)DNA制定標(biāo)準(zhǔn)曲線,由于樣品測(cè)定在各種條件上不會(huì)完全一致,會(huì)造成PCR擴(kuò)增效率的差異,從而影響定量結(jié)果的準(zhǔn)確性。而ddPCR不受標(biāo)準(zhǔn)曲線和擴(kuò)增動(dòng)力學(xué)影響,可以進(jìn)行***定量。樣品需求量低在檢測(cè)珍貴樣品和樣品核酸存在降解時(shí)具有明顯的優(yōu)勢(shì)。高靈敏度ddPCR本質(zhì)上是 將一個(gè)傳統(tǒng)的PCR反應(yīng)分成了數(shù)萬(wàn)個(gè) 的PCR反應(yīng),在這些反應(yīng)中可以精確地檢測(cè)到很小的目的片段的差異、單拷貝甚至是低濃度混雜樣品,且能避免非同源異質(zhì)雙鏈的形成。高耐受性由于目的序列被分配到多個(gè)微滴中,***降低了體系間的影響以及背景序列和***物對(duì)反應(yīng)的干擾,擴(kuò)增基質(zhì)效應(yīng)大大減小。江蘇分析數(shù)字PCR要多少錢浚和(上海)儀器科技有限公司力于提供數(shù)字PCR ,歡迎您的來(lái)電!
研究方向基因表達(dá)差異研究檢測(cè)時(shí)完全不依賴傳統(tǒng)的Ct值即可實(shí)現(xiàn)真正意義上的***定量,從而提供了比實(shí)時(shí)熒光定量PCR更精確的基因差異表達(dá)研究,尤其對(duì)于那些靶基因表達(dá)差異微小的情況:microRNA、lncRNAs等的表達(dá)分析、等位基因的不平衡表達(dá)、單細(xì)胞基因表達(dá)分析、Exosome內(nèi)核酸分子定量分析等。拷貝數(shù)變異(CNV)研究微滴化的樣品處理及檢測(cè),這種擺脫Ct值的計(jì)算方法而直接獲取目標(biāo)基因的***拷貝數(shù),為拷貝數(shù)變異的研究提供了***的檢測(cè)精度。是其他諸如二代測(cè)序、芯片雜交等平臺(tái)無(wú)法達(dá)到的,因此采用數(shù)字PCR能夠有效對(duì)NGS、aCGH的實(shí)驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行驗(yàn)證,并具有成本低、通量高的特點(diǎn)。
研究方向無(wú)創(chuàng)產(chǎn)前篩查無(wú)創(chuàng)傷的產(chǎn)前診斷,如21號(hào)染色體為3倍體的唐氏綜合征、已知父母基因型的胎兒地貧檢測(cè)或已知父母基因型的其它核酸病檢測(cè)(孟德爾相關(guān)遺傳疾病)。目前標(biāo)本來(lái)源主要為血液,而待檢測(cè)的胎兒DNA受到母體DNA的干擾,影響了檢測(cè)的準(zhǔn)確性。而QX200檢測(cè)系統(tǒng)獨(dú)特的微滴化技術(shù)完全可以作為二代測(cè)序法的補(bǔ)充來(lái)進(jìn)行的無(wú)創(chuàng)傷產(chǎn)前診斷,從而提高工作效率及節(jié)約成本。轉(zhuǎn)基 因食品或成分的檢測(cè)目前在確定轉(zhuǎn)基因作物或成分的含量時(shí)采取定量PCR的標(biāo)準(zhǔn)曲線法,這種方法需要依賴于已知濃度的標(biāo)準(zhǔn)品(CertifiedReferenceMaterialsCalibrants,CRMCs)。ddPCR***定量的方式可以徹底解決這些標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的定標(biāo)工作。數(shù)字PCR ,就選浚和(上海)儀器科技有限公司,用戶的信賴之選,歡迎新老客戶來(lái)電!
要了解為什么傳統(tǒng)PCR存在限制,務(wù)必要了解PCR反應(yīng)過(guò)程中發(fā)生了什么。基本PCR運(yùn)行可以分為三個(gè)階段:指數(shù)期每個(gè)循環(huán)積聚的產(chǎn)物準(zhǔn)確加倍(假定**反應(yīng)效率)。該反應(yīng)具有高度特異性和精確度。出現(xiàn)指數(shù)式擴(kuò)增,因?yàn)樗性噭┚迈r可用,反應(yīng)的動(dòng)力學(xué)推動(dòng)反應(yīng)有利于擴(kuò)增子加倍。線性期(高變異性)隨著反應(yīng)繼續(xù),一些試劑因擴(kuò)增而被消耗。反應(yīng)開始減緩,并且每個(gè)循環(huán)的PCR產(chǎn)物不再加倍。平臺(tái)期(終點(diǎn):使用傳統(tǒng)方法進(jìn)行凝膠檢測(cè))反應(yīng)停止,不再產(chǎn)生更多產(chǎn)物,并且如果放置時(shí)間夠長(zhǎng),PCR產(chǎn)物將開始降解。因?yàn)槊總€(gè)樣品具有不同的反應(yīng)動(dòng)力學(xué),所以每支試管或每個(gè)反應(yīng)將在不同的時(shí)間點(diǎn)進(jìn)入平臺(tái)期。在平臺(tái)期可以看到這些差異。在平臺(tái)期內(nèi),傳統(tǒng)PCR進(jìn)行測(cè)量,又稱為終點(diǎn)檢測(cè)。浚和(上海)儀器科技有限公司力于提供數(shù)字PCR ,歡迎您的來(lái)電哦!海南易裝拆數(shù)字PCR維修
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dPCR的基本原理目前dPCR主要有兩種形式,芯片式和液滴式,但基本原理都是將大量稀釋后的核酸溶液分散至芯片的微反應(yīng)器或微滴中,每個(gè)反應(yīng)器的核酸模板數(shù)少于或者等于1個(gè)。這樣經(jīng)過(guò)PCR循環(huán)之后,有一個(gè)核酸分子模板的反應(yīng)器就會(huì)給出熒光信號(hào),沒(méi)有模板的反應(yīng)器就沒(méi)有熒光信號(hào)。根據(jù)相對(duì)比例和反應(yīng)器的體積,就可以推算出原始溶液的核酸濃度。可以使用幾種不同的方法來(lái)分配樣品,包括微孔板,毛細(xì)管,油乳劑和帶有核酸結(jié)合表面的小型化腔室陣列。樣品的分配使人們可以通過(guò)假設(shè)分子種群遵循泊松分布來(lái)估計(jì)不同分子的數(shù)量,根據(jù)泊松分布的原理,反應(yīng)體系中目標(biāo)分子的拷貝數(shù)可以通過(guò)公式A=-ln[(N-X)/N]*N計(jì)算,從而解決了多個(gè)目標(biāo)分子存在于單個(gè)液滴中的可能性。江蘇分析數(shù)字PCR要多少錢