數字PCR是一種核酸分子***定量技術。當前核酸分子的定量有三種方法,光度法基于核酸分子的吸光度來定量;,Ct值就是指可以檢測到熒光值對應的循環數;數字PCR是***的定量技術,基于單分子PCR方法來進行計數的核酸定量,是一種***定量的方法。主要采用當前分析化學熱門研究領域的微流控或微滴化方法,將大量稀釋后的核酸溶液分散至芯片的微反應器或微滴中,每個反應器的核酸模板數少于或者等于1個。這樣經過PCR循環之后,有一個核酸分子模板的反應器就會給出熒光信號,沒有模板的反應器就沒有熒光信號。根據相對比例和反應器的體積,就可以推算出原始溶液的核酸濃度。能檢測低至0.01%的突變基因。上海流式數字PCR解決方案
**個體化診療
通過檢測T790M位點突變情況,可以更好地評估一代TKI***的療效及耐藥情況并指導第三代TKI靶向藥Osimertinib的使用。然而,由于qPCR平臺ARMS檢測技術的靈敏度有限,沒有辦法在含大量EGFR基因野生型背景核酸中高效準確的檢測到T790M突變。這個時候dPCR技術展現出了****的檢測精度,此外,dPCR***定量的優勢也能充分發揮出來了,可以監控突變含量變化,做到及早發現耐藥。
2.)基因表達分析
伊馬替尼(Imatinib)可以有效幫助很多慢性髓細胞白血病(CML)患者延長生存期,但是臨床上發現,伊馬替尼的療效與BCR-ABL1融合基因的轉錄產物表達量有很大的關系。研究人員采用dPCR對CML患者的BCR-ABL1融合基因轉錄產物進行測定,結果檢測下限可以達到0.001%,顯示出dPCR在痕量核酸檢測方面比qPCR具有無可比擬的優勢 南通微滴式數字PCR報價液體活檢:早篩、用藥、監測、復發。
研究方向
*****的實時監控
已有數篇文章報道了使用數字PCR技術對患者***過程中的循環**DNA(ctDNA)進行檢測,實時監控疾病進展。在非小細胞肺*、乳腺*和腸*等多種**患者中都取得了令人鼓舞的結果。與影像學及其他常規指標相比,ctDNA突變及豐度改變通常會提前數月出現,這樣就可以提醒醫生及時調整***方案,使患者得到更有效的***。
隨著數字PCR熒光通道的增加和多指標檢測的成熟,數字PCR將會進入更多應用領域,有力推動生命科學、醫學診斷、檢驗檢疫、農業等領域的快速發展。
相對于二代測序、基因芯片和定量PCR而言,數字PCR具備以下優勢:
· 能夠有效區分濃度差異微小的樣品:更好的準確度、精密度和重復性,可以用于精確測定靶基因的相對表達,基因拷貝數變異分析等。
· 數字PCR可開發針對不同**、不同樣本以及不同的樣本環境提供檢測解決方案,該技術的應用范圍廣,尤其在液體活檢領域,已開發針對肺*、乳腺*、腸*、胃*等上百個位點檢測試劑盒,可精細指導臨床***的診斷,以便患者在后續得到更及時并且適當的***方案提供。 分辨率——低至0.1倍基因表達差異。
研究方向
無創產前篩查
無創傷的產前診斷, 如21號染色體為3倍體的唐氏綜合征、已知父母基因型的胎兒地貧檢測或已知父母基因型的其它核酸病檢測(孟德爾相關遺傳疾病)。目前標本來源主要為血液,而待檢測的胎兒DNA受到母體DNA的干擾,影響了檢測的準確性。而QX200檢測系統獨特的微滴化技術完全可以作為二代測序法的補充來進行的無創傷產前診斷,從而提高工作效率及節約成本。
轉基因食品或成分的檢測
目前在確定轉基因作物或成分的含量時采取定量PCR的標準曲線法,這種方法需要依賴于已知濃度的標準品(Certified Reference Materials Calibrants, CRMCs)。ddPCR***定量的方式可以徹底解決這些標準物質的定標工作。 數字PCR儀廣泛應用于醫療、農業、環境等領域。常州國產數字PCR代理商
采用微滴式技術高達100,000個的微滴。上海流式數字PCR解決方案
與常規PCR方法相比,數字PCR有如下優勢:
1、能夠完全定量:常規PCR定量需要制定已知拷貝數的標準DNA曲線,但是由于待檢樣本與標準曲線不在統一體系,條件上會存在差異,另外加上PCR擴增效率的差異從而影響定量結果的準確性。而數字PCR不受標準曲線和擴增動力學影響,可進行完全定量。
2、樣本需求量低:適用于珍貴樣本或核酸降解嚴重的樣本
3、靈敏度高:數字PCR是將傳統PCR反應體系分割成數萬個**PCR反應,這些反應可以精確地檢測很小的目的片段差異、單拷貝甚至低濃度的混雜樣本。且能避免非同源異質雙鏈的形成。
4、高耐受性:由于目的序列被分配到多個**反應體系中,明顯降低了背景信號和yì zhì物對反應的干擾,擴增基質效應大大減小。
上海流式數字PCR解決方案
浚和(上海)儀器有限公司是一家供應國內外先進儀器和設備的專業供應商和服務商,致力于為客戶提供專業的定制化解決方案。多年來,持續為醫藥、化工、高校、科研單位、檢測院等多個行業提供先進的產品和專業的服務。
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公司主要經營產品包括:等離子清洗機、真空泵、噴霧干燥器、數字PCR、高壓滅菌鍋、培養箱、切片機、水分測定儀、激光粒度儀、光譜儀、溫濕度記錄儀等,目前主要合作品牌有:日本雅馬拓YAMATO、日本KASHIYAMA、日本HORIBA、廣州永諾 、日本KEM等。同時,公司還提供專業的技術服務,如設備的維護、驗證等。
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