dPCR的基本原理

       目前dPCR主要有兩種形式，芯片式和液滴式，但基本原理都是將大量稀釋后的核酸溶液分散至芯片的微反應器或微滴中，每個反應器的核酸模板數少于或者等于1個。這樣經過PCR循環之后，有一個核酸分子模板的反應器就會給出熒光信號，沒有模板的反應器就沒有熒光信號。根據相對比例和反應器的體積，就可以推算出原始溶液的核酸濃度。可以使用幾種不同的方法來分配樣品，包括微孔板，毛細管，油乳劑和帶有核酸結合表面的小型化腔室陣列。樣品的分配使人們可以通過假設分子種群遵循泊松分布來估計不同分子的數量，根據泊松分布的原理，反應體系中目標分子的拷貝數可以通過公式A=-ln[(N-X)/N]*N計算，從而解決了多個目標分子存在于單個液滴中的可能性。 全封閉防污染設計，一鍵式自動化操作。無錫微流控芯片數字PCR如何選型

相對于二代測序、基因芯片和定量PCR而言，數字PCR具備以下優勢:

● 靈敏度可達到單個核酸分子：檢測限低至0.001%，主要系為數字PCR可以實現靶標DNA/RNA的生物濃縮；

● 無需標準曲線活參照基因進行對比來測定核算量，可對靶分子起始量進行***定量，直接獨處DNA分子的個數；

● 適合環境復雜樣品的檢測：終點PCR檢測，不依賴Ct值，不依賴擴增效率，能克服PCR***劑的影響，避免樣品間的交叉***問題，適合各類復雜環境中的樣本進行***定量，如動血樣、糞便、尿液、痰液、水樣、土壤、植物等； 杭州JUE對定量數字PCR正規代理支持多重數字PCR，可選全中文分析軟件。

二代測序輔助建庫

       目前靶向測序建庫方法包括擴增子方法，在均相溶液中，當擴增引物增加時，由于擴增引物之間的相互作用，從而影響擴增的效率;如果將其分散到大量微液滴中擴增，將可降低引物間相互作用，提高擴增效率。同時還可以實現對于少量模板的有效擴增，得到更多的有效測序數據。

CRISPR-Cas9基因編輯結果驗證

       CRISPR-Cas9技術的發明，是基因編輯技術的一大突破，但如何驗證實驗是否成功，仍需要高靈敏度的檢測方法，數字PCR技術可以滿足這一需求。Broad研究所張鋒團隊發明了以CRISPR為基礎的SHERLOCK技術可以對核酸進行高靈敏度的定性檢測，但精確定量評估時仍采取了數字PCR進行確認。

       要了解為什么傳統 PCR 存在限制，務必要了解 PCR 反應過程中發生了什么。基本 PCR 運行可以分為三個階段：

指數期

       每個循環積聚的產物準確加倍（假定 ** 反應效率）。該反應具有高度特異性和精確度。出現指數式擴增，因為所有試劑均新鮮可用，反應的動力學推動反應有利于擴增子加倍。

線性期（高變異性）

       隨著反應繼續，一些試劑因擴增而被消耗。反應開始減緩，并且每個循環的 PCR 產物不再加倍。

平臺期（終點：使用傳統方法進行凝膠檢測）

       反應停止，不再產生更多產物，并且如果放置時間夠長，PCR 產物將開始降解。因為每個樣品具有不同的反應動力學，所以每支試管或每個反應將在不同的時間點進入平臺期。在平臺期可以看到這些差異。在平臺期內，傳統 PCR 進行測量，又稱為終點檢測。 檢測數量一次可達96個樣品。

研究方向

甲基化含量鑒定

作為表觀遺傳學研究中重要的一個研究方向——甲基化程度分析，現階段有不同的方法或技術來進行研究：如傳統的亞硫酸氫鹽處理后的克隆測序統計法、抗體檢測法、定量PCR檢測法等。這些方法皆因方法學的問題而不能獲得精確的定量，而微滴式數字PCR系統通過對樣品的微滴化處理及目標因子的***拷貝數定量，為甲基化程度的精確定量檢測提供了一種全新的技術。

*****的伴隨診斷

常用體液來源(如血液，胸腹水，唾液及尿液等)的待檢標本中的DNA，有正常脫落體細胞和病變脫落細胞兩種來源，前者的量遠大于后者。通過微液滴處理能在每個微液滴中有效減少正常體細胞DNA的干擾，實現**標記物的有效檢測，如EGFR，ALK，ROS1，KRAS、BRAF等基因的突變檢測、乳腺*/胃*的HER2基因擴增檢測等，應用于**精細醫學的伴隨診斷。 您了解數字PCR儀的優勢嗎？杭州JUE對定量數字PCR正規代理

超高靈敏度，適用于稀有序列及稀有突變的檢測。無錫微流控芯片數字PCR如何選型

       我國***擁有完全自主知識產權的微滴式數字PCR儀MiniDrop?研發成功并投入生產。MiniDrop?創新性采用高壓驅動的方法將樣本分割成50萬份，打破了國外廠商在微滴式數字PCR領域的壟斷。永諾生物依以微滴式數字PCR儀為**，打造了全自動液體處理工作站、核酸提取試劑盒等創新產品，致力于解決**、***領域的精細診斷這是國內***微滴式數字PCR檢測系統，能廣泛應用于醫療、農業、環境等領域，未來，采用外周血、唾液、尿液、腦脊液等樣本進行低成本、高靈敏、快速的無創檢測成為可能。無錫微流控芯片數字PCR如何選型

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公司主要經營產品包括：等離子清洗機、真空泵、噴霧干燥器、數字PCR、高壓滅菌鍋、培養箱、切片機、水分測定儀、激光粒度儀、光譜儀、溫濕度記錄儀等，目前主要合作品牌有：日本雅馬拓YAMATO、日本KASHIYAMA、日本HORIBA、廣州永諾 、日本KEM等。同時，公司還提供專業的技術服務，如設備的維護、驗證等。

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