高效液相色譜分離原理離子對(IonPairChromatography)離子對色譜法是將一種(或多種)與溶質分子電荷相反的離子(稱為對離子或反離子)加到流動相或固定相中,使其與溶質離子結合形成疏水型離子對化合物,從而控制溶質離子的保留行為。其原理可用下式表示:X水相Y-水相===XY-有機相式中:X水相--流動相中待分離的有機離子(也可是陽離子);Y-水相--流動相中帶相反電荷的離子對(如氫氧化四丁基銨、氫氧化十六烷基三甲銨等);XY---形成的離子對化合物。當達平衡時:KXY=[XY-]有機相/[X]水相[Y-]水相根據定義,分配系數為:DX=[XY-]有機相/[X]水相=KXY[Y-]水相[討論:DX與保留值的關系]離子對色譜法(特別是反相)解決了以往難以分離的混合物的分離問題,諸如酸、堿和離子、非離子混合物,特別是一些生化試樣如核酸、核苷、生物堿以及藥物等分離。上海禹重實業有限公司致力于提供液相色譜系統,有需求可以來電咨詢!舟山賽默飛世爾液相色譜系統采購
高效液相色譜法有“四高一廣”的特點:①高壓:流動相為液體,流經色譜柱時,受到的阻力較大,為了能迅速通過色譜柱,必須對載液加高壓。②高速:分析速度快、載液流速快,較經典液體色譜法速度快得多,通常分析一個樣品在15~30分鐘,有些樣品甚至在5分鐘內即可完成,一般小于1小時。③高效:分離效能高。可選擇固定相和流動相以達到比較好分離效果,比工業精餾塔和氣相色譜的分離效能高出許多倍。④高靈敏度:紫外檢測器可達0.01ng,進樣量在μL數量級。⑤應用范圍廣:百分之七十以上的有機化合物可用高效液相色譜分析,特別是高沸點、大分子、強極性、熱穩定性差化合物的分離分析,顯示出優勢。⑥柱子可反復使用:用一根柱子可分離不同化合物⑦樣品量少、容易回收:樣品經過色譜柱后不被破壞,可以收集單一組分或做制備。金華賽默飛世爾液相色譜系統廠家直銷液相色譜系統,就選上海禹重實業有限公司,讓您滿意,歡迎新老客戶來電!
高效液相色譜的應用高效液相色譜應用非常,幾乎遍及定量定性分析的各個領域。(1)分離混合物高效液相色譜法只要求樣品能制成溶液,不受樣品揮發性的限制,流動相可選擇的范圍寬,固定相的種類繁多,因而可以分離熱不穩定和非揮發性的、離解的和非離解的以及各種分子量范圍的物質。通過與試樣預處理技術相配合,高效液相色譜法所達到的高分辨率和高靈敏度,可分離并同時測定性質上十分相近的物質,能夠分離復雜混合物中的微量成分。并且隨著固定相的發展,還可在充分保持生化物質活性的條件下完成對其的分離。(2)生化分析由于高效液相色譜法具有高分辨率、高靈敏度、速度快、色譜柱可反復利用,流出組分易收集等優點,因而被廣泛應用到生物化學、食品分析、醫藥研究、環境分析、無機分析等各種領域,并已成為解決生化分析問題**有前途的方法。(3)儀器聯用高效液相色譜儀與結構儀器的聯用是一個重要的發展方向。高效液相色譜一質譜聯用技術受到普遍重視,如分析氨基甲酸酯農藥和多核芳烴等:高效液相色譜一紅外光譜聯用也發展很快,如在環境污染分析測定水中的烴類等.使環境污染分析得到新的發展。
高效液相色譜相關術語峰面積(peakarea,A)—峰與峰底所包圍的面積。保留時間(retentiontime,tR)——從進樣開始到某個組分在柱后出現濃度極大值的時間。理論塔板數(theoreticalplatenumber,N)——用于定量表示色譜柱的分離效率(簡稱柱效)。分離度(resolution,R)——相鄰兩峰的保留時間之差與平均峰寬的比值。也叫分辨率,表示相鄰兩峰的分離程度。R≥1.5稱為完全分離。《中國藥典》規定R應大于1.5。拖尾因子(tailingfactor,T)——T=,用以衡量色譜峰的對稱性。也稱為對稱因子(symmetryfactor)或不對稱因子(asymmetryfactor)。《中國藥典》規定T應為0.95~1.05。T1.05為拖尾峰。上海禹重實業有限公司是一家專業提供液相色譜系統的公司,有想法的可以來電咨詢!
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