高效液相色譜相關術語

峰面積(peak area，A)—峰與峰底所包圍的面積。

保留時間(retention time，tR)——從進樣開始到某個組分在柱后出現濃度極大值的時間。

理論塔板數(theoretical plate number，N)——用于定量表示色譜柱的分離效率（簡稱柱效）。

分離度(resolution，R)——相鄰兩峰的保留時間之差與平均峰寬的比值。也叫分辨率，表示相鄰兩峰的分離程度。R≥1.5稱為完全分離。

《中國藥典》規定R應大于1.5。

拖尾因子(tailing factor，T)——T=，用以衡量色譜峰的對稱性。也稱為對稱因子(symmetry factor)或不對稱因子(asymmetry factor)。

《中國藥典》規定T應為0.95~1.05。

T1.05為拖尾峰。

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高效液相色譜分離原理

離子交換

(Ion-exchange Chromatography)

IEC是以離子交換劑作為固定相。IEC是基于離子交換樹脂上可電離的離子與流

動相中具有相同電荷的溶質離子進行可逆交換，依據這些離子以交換劑具有不同的親和力而將它們分離。以陰離子交換劑為例，其交換過程可表示如下：

X-（溶劑中） (樹脂-R4N Cl-)=== （樹脂-R4N X-) Cl- （溶劑中）

當交換達平衡時：

KX=[-R4N X-][ Cl-]/[-R4N Cl-][ X-]

分配系數為：

DX=[-R4N X-]/[X-]= KX [-R4N Cl-]/[Cl-]

[討論：DX與保留值的關系]

凡是在溶劑中能夠電離的物質通常都可以用離子交換色譜法來進行分離。

賽默飛高效液相色譜業務副總裁兼總經理Fraser McLeod表示：“在整個生物制藥的流程中，從藥物研發到質控的批次放行，數據完整性對于決策是必不可少的。為快速獲取可靠結果，靈敏度和通量非常關鍵。我們開發出的這套系統展示出在復雜分析應用時的**辨分離和重復性?！?

? Vanquish Flex UHPLC系統采用獨特設計，即便在高通量的情況下，仍可以保證分析物色譜峰擁有尖銳峰形，實現在較短時間內分析更多樣品。該系統良好的穩定性和重復性為數據質量提供了可靠保障，確保能夠分析大量的樣品，以供質控分析比較。其重要特點如下：

? 新型四元梯度泵模塊，設計穩健，性能良好，保證高通量的前提下依然可提供方法開發的靈活性。

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液相色譜類型

液相色譜按其分離機理，可分為四種類型--吸附色譜法、分配色譜法、離子交換色譜、凝膠色譜法

凝膠色譜法

目前，凝膠色譜法既適用于水溶液的體系，又適用于有機溶劑的體系。當所用的洗脫劑為水溶液時，稱為凝膠過濾色譜，凝膠過濾色譜在生物界的應用比較多；采用有機溶劑為洗脫劑時，稱為凝膠滲透色譜，凝膠滲透色譜在高分子領域應用比較多。

四種不同類型的液相色譜，可以依據樣品性質的不同，選擇不同的方法，靈活應用。

可以整個***連續記錄數據。湖南進口高效液相色譜系統價格

反梯度應用 Vanquish Duo 系統

提高定量分析水平，獲取更多未知化合物信息

反梯度的 Vanquish Duo 系統可通過電霧式檢測技術（CAD）為所有檢測分析物提供一致的響應。等度分離可產生一致的 CAD 響應，但某些分離需要采用梯度洗脫導致相應不一致。Vanquish Duo系統通過使用第二個泵對檢測器輸送反向梯度，可實現：

? 采用 CAD 檢測器在梯度洗脫條件下獲得一致的響應

? 在無標準品的情況下，可靠地定量已知和未知化合物

? 通過自動反梯度計算功能考查所有系統體積，簡化了方法設置

無論化合物何時在梯度中進行洗脫，進入檢測器的洗脫液通過反梯度補償功能，始終保持相同的溶劑組成。即使缺乏特定化合物的單個標準品，也能夠可靠地為您提供一致的定量響應信息。

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