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上海支原體預防貨期

來源： 發布時間：2024-06-18

支原體污染后的細胞是否應該直接丟棄還是嘗試重新培養，這取決于多種因素，包括細胞的重要性、污染的程度、以及是否有有效的方法來清*支原體。以下是一些處理支原體污染的常見方法：
1. 直接丟棄：對于非重要的細胞，如果培養中的細胞、WCB的細胞等，可以采取直接將培養物與用過的培養基滅活后丟棄的方式。
2. 使用支原體清除劑：支原體清除劑處理細胞，作用濃度為25μg/ml，兩周可以清*支原體。
3. 使用支原體清*培養基：每2~3天更換一次新鮮培養液，并用無菌的PBS洗滌細胞，處理15天后進行支原體檢測，以確定支原體是否被完全去除。
4. 支原體去除試劑：這是一種混合制劑，可以通過抑制DNA和支原體生長所必須的相關蛋白合成來取得良好的支原體清*效果，且對細胞無傷害
如何檢測新鮮的培養基是否有支原體污染？上海支原體預防貨期

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支原體檢測的應用場景非常廣*，以下是一些主要的應用領域：
1. 細胞培養：在實驗室和生物制品工廠中，細胞培養過程容易受到支原體污染。支原體污染可能導致細胞功能改變，影響實驗結果和生物制品的質量。因此，支原體檢測在細胞培養的質量控制中至關重要。科研中常用等溫擴增的方法簡單便捷。
2. 生物制品生產：在生物制品的生產過程中，如疫苗、生物藥物等，需要確保產品無支原體污染，以保證其安全性和有效性。監管機構要求在生產的關鍵階段進行支原體檢測。通常采用qPCR的方式進行。
北京細胞培養支原體去除價格支原體檢測有哪些方法？

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目前有 210 +種不同種類的支原體分布于人類、動物、昆蟲和植物中，其中 20 +種在細胞培養中被發現為污染物。支原體在實驗室中的傳播來源多種多樣，主要來源包括實驗室人員、胎牛血清（FBS）或新生牛血清（NBS）、以及由豬來源的胰蛋白酶溶液。此外，來自其他實驗室或商業供應商的細胞培養物、培養基、污染的試劑；非無菌供應品、培養基和溶液；實驗室人員；培養箱；液氮；空氣顆粒和氣溶膠；抗*素的過度使用；細胞培養器皿的不正確密封；以及其他的支原體細胞培養物等都可能成為支原體的傳播途徑。

支原體預防的實驗步驟主要包括以下幾個方面：
1. 無菌操作技術：在細胞培養過程中，嚴格遵守無菌操作規程，包括穿戴適當的實驗服、手套，使用無菌工具和耗材。
2. 環境控制：保持實驗室環境清潔，定期消毒工作臺和實驗室表面，使用層流罩或生物安全柜進行細胞操作。
3. 細胞培養基和試劑的無菌過濾：所有加入到細胞培養基中的試劑和補充物，如血清、抗*素等，都應通過無菌過濾以去除支原體。
4. 細胞培養基和試劑的檢測：在添加到細胞培養物之前，對新的細胞培養基和試劑進行支原體檢測，以確保它們沒有被污染。
5. 定期檢測：即使采取了預防措施，也應定期對細胞培養物進行支原體檢測，以確保及時發現并處理潛在的污染。
6. 避免交叉污染：避免從一個細胞培養物到另一個的交叉污染，使用的移液器和工具，避免在不同細胞培養物之間重復使用。
7. 細胞培養物的篩選：使用已知無支原體污染的細胞株進行實驗，或者在開始實驗前對細胞株進行篩選。
8. 使用預防性試劑：在某些情況下，可以在細胞培養過程中添加特定的預防性試劑，如支原體預防劑，以降低污染風險。
細胞培養中污染了支原體會怎么樣？

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方法

靈敏度

優勢

劣勢

培養法

☆☆☆

ü 便捷

ü 便宜

ü 金標準

ü 費勞力

ü 耗時長

ü 需要特定的培養基

ü 特定支原體種類需要特定的培養基

DNA染色

(DAPI or Hoescht)

☆

ü 迅速

ü 便捷

ü 便宜

ü 可能難以判讀結果

ü 無法鑒別支原體種屬

ü 可能假陽性可能性

間接染色

☆☆☆

ü 迅速

ü 便宜

ü 易檢測

ü 費時

ü 需要細胞系指示

ELISA

☆☆

ü 迅速

ü 客觀，易判讀結果

ü 可以鑒別支原體種屬

ü 受抗體限制

ü 價格高

免疫染色

☆☆

ü 迅速

ü 可檢測支原體種屬

ü 價格略高

ü 可檢測的支原體種屬有限

放射自顯影

☆☆

ü 迅速

ü 難以判讀結果

ü 無法鑒別支原體種屬

ü 費勞力

生物發光

☆☆

ü 迅速

ü 便捷

ü 便宜

ü 難以判讀結果

ü 無法鑒別支原體種屬

PCR

☆☆☆

ü 便宜

ü 迅速

ü 具有特異性

ü 可能假陽性可能性

ü 檢測特異性依賴引物特異性

ü 需要提取DNA

Real-Time PCR

☆☆☆

ü 便捷

ü 迅速

ü 具有特異性

ü 結果可靠

ü 高通量

ü 可能假陽性可能性

ü 檢測特異性依賴引物特異性

ü 需要提取DNA

LAMP

☆☆

ü 便捷

ü 無需DNA提取

ü *需10min左右的實驗操作時間

ü 具有特異性

ü 高通量

ü 可能假陽性可能性

ü 檢測特異性依賴引物特異性 支原體檢測PCR法和LAMP方法的優劣勢比較。上海細胞支原體檢測時間

支原體檢測方法LAMP法？上海支原體預防貨期

支原體污染是細胞培養中普遍的問題之一，細胞庫中或正在使用的細胞中，支原體的污染率約為15%-35%。并對培養細胞的生理和代謝造成諸多影響：
01/ 爭奪營養：支原體的污染會阻礙細胞生長和增殖 
02/ 改變蛋白質、RNA 或 DNA 合成的水平 
03/ 改變基因表達、細胞信號傳導和形態 
04/ 損害膜和細胞器 
05/ 導致突變和染色體變化 
06/ 時間、金錢和有價值的細胞丟失：支原體的污染會導致嚴重的經濟損失以及研究時間損失
07/ 實驗結果的不可靠性 
08/ 生物安全問題
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