熒光定量PCR儀因操作方便、運行速度快、實驗結果準確，受到越來越多的分子生物學研究者青睞。在實驗技術成熟的現今，難得不是實驗技術上的問題——而是選擇哪一種熒光定量PCR儀——你要征詢實驗室成員的意見、分析實驗室目前乃至將來的需求、平衡實驗室的預算，更要詳細研究各種極富誘惑力的宣傳資料。面對各種不同性能的產品，您又該如何選擇呢？首先建議大家走出認識熒光定量PCR的兩個誤區：誤區一：儀器通道越多越好隨著PCR技術的成熟運用，多重擴增越來越熱鬧，熒光定量PCR儀也不能幸免。在使用有些廠家5通道的熒光定量儀時，為了確保實驗結果的精確性和準確性都要在實驗中使用ROX（一種熒光染料）或Referencedye，這些熒光染料都必須單獨使用一個檢測通道。這樣以來，真正能檢測多重PCR熒光信號的有效通道只有4個，而且使用校正染料可能會增加后期的使用成本。考慮多重熒光定量PCR的通道數的時候也應該從實驗室實際情況出發，多重PCR并非人人適用、人人可用，因為它使實驗復雜化了。誤區二：real-timePCR儀無需梯度功能對于使用染料法的定量PCR反應，雖然有各種各樣的PCR引物設計軟件或者經驗公式計算熔解溫度（Tm值），但運用的公式不同、引物序列不同。PCR擴增過程中，熒光定量PCR儀通過熒光信號，對PCR進程進行實時檢測。PCR儀廠家報價

    PCR實驗室又叫基因擴增實驗室。PCR是聚合酶鏈式反應(PolymeraseChainReaction)的簡稱。是一種分子生物學技術，用于放大特定的DN段，可看作生物體外的特殊DNA復制。其特點是能將微量的DNA大幅增加，是分子生物學研究和實驗的常規方法，PCR實驗室廣泛應用于生物學各個領域，PCR實驗室主要實驗項目：檢測，乙型肝炎，禽疫病，基因的檢測和診斷，DNA指紋，個體識別，親子鑒定及法醫物證等等。pcr實驗室設計建設中容易出現的問題：1、PCR實驗室的空氣流向必須嚴格按照試劑儲存和準備區→標本制備區→擴增區→擴增產物分析區空氣壓力逐漸遞減方式進行，防止擴增產物順空氣氣流進入擴增前的區域。需要嚴格的通風設計，若通風設計不合理，會使風速流向混亂，甚至危害人們健康。2、人流路徑與物流路徑設計不合理進入實驗室區域工作人員應該按照以下路徑：公共清潔區——更衣間（更換潔凈服）——緩沖間——污染實驗區工作人員退出實驗室的路徑為：污染試驗區——緩沖間——淋浴間。 力康核酸定量PCR儀價格便宜PCR儀被大量運用于醫學、生物學實驗室中。

    實時熒光定量pcr儀，由熒光定量系統和計算機組成，用來監測循環過程的熒光。與實時設備相連的計算機收集熒光數據。數據通過開發的實時分析軟件以圖表的形式顯示。原始數據被繪制成熒光強度相對于循環數的圖表。原始數據收集后可以開始分析。實時設備的軟件能使收集到的數據進行正常化處理來彌補背景熒光的差異。正常化后可以設定域值水平，這就是分析熒光數據的水平。實時熒光定量pcr儀組成熒光定量系統和計算機作用，監測循環過程的熒光，數據形式顯示，通過開發的實時分析，軟件以圖表的表現。實時熒光定量pcr儀優勢：樣品到達域值水平所經歷的循環數稱為Ct值（限制點的循環數）。域值應設定在使指數期的擴增效率為大，這樣可以獲得準確，可重復性的數據。如果同時擴增的還有標有相應濃度的標準品，線性回歸分析將產生一條標準曲線，可以用來計算未知樣品的濃度。實時熒光定量pcr儀技術原理：所謂real-timeQ-PCR技術，是指在PCR反應體系中加入熒光基因，利用熒光信號累積實時監測整個PCR進程，后通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。在real-time技術的發展過程中，兩個重要的發現起著關鍵的作用：（1）在90年代早期，TaqDNA多聚酶的5′核酸外切酶活性的發現。

    并含有能用于探針捕捉雜交實驗的足夠信息。這一長度范圍的產物可以通過采用兩步擴增循環方法得到，從而減少擴增時間。其他PCR方法有不同的佳產物長度。例如，通過定量的RNA-PCR檢測基因表達時，產物應該足夠大以便構成競爭性模板，這樣，產物和競爭物都能夠在凝膠上很容易的分辨出來。這些產物一般在250～750bp范圍內。⑦補充說明若在cDNA序列內找尋PCR引物，需特別注意兩點：首先，盡力將引物和產物保持在mRNA的編碼區域內，因為這是生成蛋白質的獨特序列，不像3’末端非編碼區域與許多其他mRNA有同源性；第二，盡力把引物放在不同的外顯子上，以便使RNA特異的PCR產物與從污染DNA中產生的產物在大小上相區別。若PCR的目的是克隆一個基因或cDNA的特異序列，產物的大小是根據具體應用預選的。在這里，計算機程序可以提供關于期望區域側翼選擇引物對的信息。在選擇用來擴增來自不同物種DNA的引物時，應避開mRNA的5’和3’末端非翻譯區序列，因為它們可能沒有任何的同源性。3．簡并引物設計①設計簡并引物時，一定要檢查靶擴增區域選定氨基酸遺傳密碼的簡并度。很顯然，我們期望選擇簡并度低的氨基酸，達到提高特異性的目的。②充分注意物種對于密碼子的偏好性。 普通PCR儀主要應用于科研、教學、臨床醫學、檢驗、檢疫等。

力康GM05智能梯度基因擴增儀（控溫儀）性能特點：高清晰超大7寸液晶顯示屏-可選鍍金/鍍銀模塊，提高熱傳導效率，使實驗更高效；方便靈活的模塊更換裝置，輕松更換模塊；熱蓋旋鈕無級可調，適用各型號試管；樣品座工作區域全密閉設計，可確保低溫保存干燥清潔；可任意角度定位熱蓋；具備斷電記憶功能；環境溫度自動讀取，自動修正溫控誤差；支持用戶實驗預約設定，鬧鐘提醒功能；支持程序搜索功能，支持常用程序優先選擇功能；支持多重嵌套循環；支持梯度PCR、TouchdownPCR、LongPCR設定；可外接移動硬盤和鼠標，支持觸摸和鼠標操作；可實現遠程故障判斷；具有TM值計算功能，可更好地幫助用戶進行引物設計；可單獨配備PC機操作軟件，PC機與主機可分別各自控制，并實現一機多控。PCR儀是利用DNA聚合酶進行專一性的連鎖復制。上海力康國產品牌PCR儀價格表格

PCR技術起初的臨床應用就是從檢測鐮狀細胞和β-地中海貧血的基因突變開始的。PCR儀廠家報價

    1．一般性原則(1)長度：一般引物互補區的長度為16-25bp，引物互補區的4×(G十C)十2×(A十T)不要沒有必要大于70，一般也不要低于50(2)G十c含量：好在45％一55％之間，但有時受模板限制，無法理想化。但在有幾種選擇時，可以把G十c含量接近50%作為參數之一(3)堿基分布的隨機性：應避免連續出現4個以上的單一堿基。尤其是不應在其3’端出現超過3個的連續G或C，否則會使引物在G十C富集序列區錯誤引發。(4)引物自身：不能含有很長的牢固的自身互補序列，尤其是引物3‘端回折形成的發夾不要一般超過3堿基，否則會影響引物與模板的結合(5)引物之間：兩個引物之間不應有很長的牢固的互補或同源堿基，尤應避免3’端的互補重疊。2.具體原則①引物長度；特異性一般通過引物長度和退火溫度控制。如果PCR的退火溫度設置在近于引物Tm值（引物/模板雙鏈體的解鏈溫度）幾度的范圍內，18到24個堿基的寡核苷酸鏈是有很好的序列特異性的。引物越長，擴增退火時被引發的模板越少。為優化PCR反應，使用確保溶解溫度不低于54℃的短的引物，可獲得好的效率和特異性。總的來說，好在特異性允許的范圍內尋求安全性。每增加一個核苷酸，引物特異性提高4倍；這樣，大多數應用的短引物長度為18個核苷酸。 PCR儀廠家報價

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