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來源: 發(fā)布時間:2021-11-06

    非洲豬瘟的影響范圍是非常大的,很多家豬或者野豬都極易受到非洲豬瘟病毒的傳染,再加上對于非洲豬瘟,我們無法一勞永逸的解決,養(yǎng)殖戶只能不斷檢測,避免豬瘟的苗頭出現(xiàn),同時注意養(yǎng)殖場內(nèi)的消毒工作,可以有效的減少非洲豬瘟傳染的概率。在分子生物學(xué)中,經(jīng)常會遇到細(xì)胞分裂的處理,這些處理方式利用人工來做的話,花費(fèi)的時間往往極多,這就造成不必要的人力、物力浪費(fèi),是非常不合算的,所以我們一般利用基因擴(kuò)增儀器進(jìn)行這方面的處理,在很多實驗室的使用過程中,取得了良好的成效。利用基因擴(kuò)增儀器既可節(jié)省試驗時間,提高實驗效率,又能節(jié)約實驗成本,同時根據(jù)不同的試驗進(jìn)行不同的設(shè)置,基因擴(kuò)增儀器是為滿足當(dāng)今分子生物實驗室的需求所設(shè)計,該儀器可以進(jìn)行任何實時PCR檢測,如病原體、突變、SNP的分析和快速篩選、細(xì)胞RNA水平的檢測和量化等。封閉的反應(yīng)體系,將污染降低。該儀器能夠?qū)?shù)據(jù)進(jìn)行實時收集和分析,其高效的數(shù)據(jù)管理能力使用戶迅速生成數(shù)據(jù)和進(jìn)行重復(fù)實驗。目前,PCR已成為實驗室中的一項常規(guī)技術(shù),是分子生物學(xué)家們不可缺少的工具.PCR儀銷售電話

力康熒光定量pcr儀X960型數(shù)據(jù)分析系統(tǒng):向?qū)降娜形牟僮鹘缑?,直觀、清晰、功能 -實時記錄熒光信號的原始數(shù)據(jù);涵蓋多種分析模式:相對/ 定量、標(biāo)準(zhǔn)溶解曲線、終點(diǎn)法等位基因鑒定、高分辨率溶解曲線、等溫擴(kuò)增等;內(nèi)置統(tǒng)計分析工具和自定義公式編輯工具,數(shù)據(jù)無需導(dǎo)出,直接在儀器軟件中分析完成。力康熒光定量pcr儀X960型其他人性化設(shè)計:具有梯度、Touchdown等高級編程功能、WIFI或LAN連接PC端-可實現(xiàn)一臺PC機(jī)連接多臺qPCR;低噪音、低能耗、長壽命。上海梯度PCR儀價格表格聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PCR)是一種用于放大擴(kuò)增特定DNA的分子生物學(xué)技術(shù),它可看作是生物體外的特殊DNA復(fù)制.

    PCR儀的基本原理類似于DNA的天然復(fù)制過程,其特異性依賴于與靶序列兩端互補(bǔ)的寡核苷酸引物。PCR由變性--退火--延伸三個基本反應(yīng)步驟構(gòu)成:1、模板DNA的變性:模板DNA經(jīng)加熱至93℃左右一定時間后,使模板DNA雙鏈或經(jīng)PCR擴(kuò)增形成的雙鏈DNA解離,使之成為單鏈,以便它與引物結(jié)合,為下輪反應(yīng)作準(zhǔn)備;2、模板DNA與引物的退火(復(fù)性):模板DNA經(jīng)加熱變性成單鏈后,溫度降至55℃左右,引物與模板DNA單鏈的互補(bǔ)序列配對結(jié)合;3、引物的延伸:DNA模板--引物結(jié)合物在TaqDNA聚合酶的作用下,以dNTP為反應(yīng)原料,靶序列為模板,按堿基配對與半保留復(fù)制原理,合成一條新的與模板DNA鏈互補(bǔ)的半保留復(fù)制鏈重復(fù)循環(huán)變性--退火--延伸三過程,就可獲得更多的“半保留復(fù)制鏈",而且這種新鏈又可成為下次循環(huán)的模板。每完成一個循環(huán)需2~4分鐘,2~3小時就能將待擴(kuò)目的基因擴(kuò)增放大幾百萬倍(Plateau)。到達(dá)平臺期所需循環(huán)次數(shù)取決于樣品中模板的拷貝。在此同時認(rèn)識到蛋白質(zhì)是接受RNA的遺傳信息而合成的。50年代Zamecnik等在形態(tài)學(xué)和分離的亞細(xì)胞組分實驗中已發(fā)現(xiàn)微粒體(microsome)是細(xì)胞內(nèi)蛋白質(zhì)合成的部位。

普通PCR儀:一次PCR擴(kuò)增只能運(yùn)行一個特定退火溫度的PCR儀稱作傳統(tǒng)PCR儀,也叫普通PCR儀。如果要做不同的退火溫度需要多次運(yùn)行。主要是用于簡單的、對目的基因退火溫度的擴(kuò)增。該儀器主要應(yīng)用于科學(xué)研究、教學(xué)、醫(yī)學(xué)臨床、檢驗檢疫等機(jī)構(gòu)。

梯度PCR儀:一次性PCR擴(kuò)增可以設(shè)置一系列不同的退火溫度條件(溫度梯度,通常有12種溫度梯度)的PCR儀稱作梯度PCR儀。因為被擴(kuò)增的不同DN段,其適退火溫度是不同的,通過設(shè)置一系列的梯度退火溫度進(jìn)行擴(kuò)增,從而一次性PCR擴(kuò)增,就可以篩選出表達(dá)量高的適退火溫度,進(jìn)行有效的擴(kuò)增。用于研究未知DNA退火溫度的擴(kuò)增,這樣節(jié)約成本的同時也節(jié)約了時間。梯度PCR儀在不設(shè)置梯度的情況下也可以做普通PCR擴(kuò)增。主要應(yīng)用于科研、教學(xué)機(jī)構(gòu)。梯度PCR儀主要用于研究未知DNA退火溫度的擴(kuò)增,這樣既節(jié)約時間,也節(jié)約成本。在不設(shè)置梯度的情況下亦可當(dāng)做普通的PCR用。梯度PCR儀多應(yīng)用于科研、教學(xué)機(jī)構(gòu),檢驗、檢疫等。 由于PCR簡便易行、靈敏度高等有點(diǎn),該技術(shù)被應(yīng)用于多數(shù)分子實驗的研究中。

原位PCR儀:用于從細(xì)胞內(nèi)靶DNA的定位分析的細(xì)胞內(nèi)基因擴(kuò)增儀稱作原位PCR儀。如病源基因在細(xì)胞的位置或目的基因在細(xì)胞內(nèi)的作用位置等。是保持細(xì)胞或組織的完整性,使PCR反應(yīng)體系滲透到組織和細(xì)胞中,在細(xì)胞的靶DNA所在位置上進(jìn)行基因擴(kuò)增。不但可以檢測到靶DNA,又能標(biāo)出靶序列在細(xì)胞內(nèi)的位置,對于在分子和細(xì)胞水平上研究疾病的發(fā)病機(jī)理和臨床過程及病理的轉(zhuǎn)變有重大的實用價值。主要應(yīng)用于臨床、科研。原位PCR儀,主要應(yīng)用于:檢測外源性基因片段,提高檢出率,集中在病毒的檢查上,如HIV、HPV、HBV、CMV等;觀察病原體在體內(nèi)分布規(guī)律;內(nèi)源性基因片段,如人體的單基因病、重組基因、易位的染色體、Ig的mRN段、基因片段等;檢測導(dǎo)入基因;遺傳病基因檢測如β-地中海貧血。實時熒光定量PCR儀:在普通PCR儀的基礎(chǔ)上增加一個熒光信號采集系統(tǒng)和計算機(jī)分析處理系統(tǒng)的PCR儀稱作熒光定量PCR儀。其PCR擴(kuò)增原理和普通PCR儀擴(kuò)增原理相同,只是PCR擴(kuò)增時加入的引物是利用同位素、熒光素等進(jìn)行標(biāo)記,使用引物和熒光探針同時與模板特異性結(jié)合擴(kuò)增。擴(kuò)增的結(jié)果通過熒光信號采集系統(tǒng)實時采集信號連接輸送到計算機(jī)分析處理系統(tǒng)得出量化的實時結(jié)果輸出。把這種PCR儀叫做實時熒光定量PCR儀。而核酸檢測方法中,PCR儀無疑是本次臨床檢測的關(guān)鍵利器。上?;驍U(kuò)增PCR儀價格信息

通過PCR進(jìn)行基因分型,也是對遺傳病中的突變進(jìn)行遺傳分析的一個基本方式。PCR儀銷售電話

    基本的PCR須具備:1.要被復(fù)制的DNA模板2.界定復(fù)制范圍兩端的引物(四種脫氧核苷酸)及水。利用升溫使DNA變性,在聚合酶的作用下使單鏈復(fù)制成雙鏈,進(jìn)而達(dá)到基因復(fù)制的目的。PCR的設(shè)想核酸研究已有100多年的歷史,二十世紀(jì)60年代末、70年代初人們致力于研究基因的體外分離技術(shù),Korana于1971年提出核酸體外擴(kuò)增的設(shè)想:“經(jīng)過DNA變性,與合適的引物雜交,用DNA聚合酶延伸引物,并不斷重復(fù)該過程便可克隆tRNA基因”。1985年美國PE-Cetus公司人類遺傳研究室的Mullis等發(fā)明了具有劃時代意義的聚合酶鏈反應(yīng)。其原理類似于DNA的體內(nèi)復(fù)制。Mullis使用的DNA聚合酶是大腸桿菌DNA聚合酶I的Klenow片段,其缺點(diǎn)是:①Klenow酶不耐高溫,90℃會變性失活,每次循環(huán)都要重新加。②引物鏈延伸反應(yīng)在37℃下進(jìn)行,容易發(fā)生模板和引物之間的堿基錯配,其PCR產(chǎn)物特異性較差,合成的DN段不均一。此種以Klenow酶催化的PCR技術(shù)雖較傳統(tǒng)的基因擴(kuò)增具備許多突出的優(yōu)點(diǎn),但由于Klenow酶不耐熱,在DNA模板進(jìn)行熱變性時,會導(dǎo)致此酶鈍化,每加入一次酶只能完成一個擴(kuò)增反應(yīng)周期,給PCR技術(shù)操作程序添了不少困難。這使得PCR技術(shù)在一段時間內(nèi)沒能引起生物醫(yī)學(xué)界的足夠重視。 PCR儀銷售電話

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