基因實驗室與PCR實驗室的規(guī)劃布局要求：1、環(huán)境要求通風、溫度和濕度實驗室的長期使用，有毒、有害等污濁氣體不及時排出會危害室內操作人員健康。實驗室良好的通風環(huán)境是必要前提。除了實驗室建筑選址的朝向和所處地域的氣候特征，實驗室通風系統(tǒng)也是必須考慮的問題。通風柜作為保持實驗室內安全、衛(wèi)生的重要柜體，是建立一個科學實驗室必不可少的組成部分。潔凈度實驗室的潔凈，除了實驗室地面、實驗室器具的清潔，還要考慮實驗室內空氣的潔凈度。不良的空氣質量會影響實驗的正常進行，擴散到空氣中的有害物質也會危害到人體健康。2、設施要求給排水、排污系統(tǒng)標準規(guī)范的實驗室，都會配置有供水、排水和排污系統(tǒng)，實驗臺配置水池、滴水架、排水槽，通風柜與通風柜管道聯(lián)通。3、實驗室工作人員要求PCR實驗室內工作人員必須參加由國家衛(wèi)生部或各省臨床檢驗中心舉辦的臨床基因擴增培訓班，并持證上崗。PCR實驗室通過驗收，實驗室至少必須應有兩個以上持有“臨床基因檢測上崗證”。PCR實驗室必須建立嚴格的實驗室管理制度、建立標準化操作程序（SOP）、建立系列質量管理文件等，確保實驗室日常運行符合國家衛(wèi)生部的要求，確保檢測結果準確、確保實驗室衛(wèi)生安全。PCR儀是利用DNA聚合酶進行專一性的連鎖復制。國產(chǎn)高校科研PCR儀批發(fā)廠家

    1．一般性原則(1)長度：一般引物互補區(qū)的長度為16-25bp，引物互補區(qū)的4×(G十C)十2×(A十T)不要沒有必要大于70，一般也不要低于50(2)G十c含量：好在45％一55％之間，但有時受模板限制，無法理想化。但在有幾種選擇時，可以把G十c含量接近50%作為參數(shù)之一(3)堿基分布的隨機性：應避免連續(xù)出現(xiàn)4個以上的單一堿基。尤其是不應在其3’端出現(xiàn)超過3個的連續(xù)G或C，否則會使引物在G十C富集序列區(qū)錯誤引發(fā)。(4)引物自身：不能含有很長的牢固的自身互補序列，尤其是引物3‘端回折形成的發(fā)夾不要一般超過3堿基，否則會影響引物與模板的結合(5)引物之間：兩個引物之間不應有很長的牢固的互補或同源堿基，尤應避免3’端的互補重疊。2.具體原則①引物長度；特異性一般通過引物長度和退火溫度控制。如果PCR的退火溫度設置在近于引物Tm值（引物/模板雙鏈體的解鏈溫度）幾度的范圍內，18到24個堿基的寡核苷酸鏈是有很好的序列特異性的。引物越長，擴增退火時被引發(fā)的模板越少。為優(yōu)化PCR反應，使用確保溶解溫度不低于54℃的短的引物，可獲得好的效率和特異性。總的來說，好在特異性允許的范圍內尋求安全性。每增加一個核苷酸，引物特異性提高4倍；這樣，大多數(shù)應用的短引物長度為18個核苷酸。 上海實時熒光PCR儀銷售價格PCR的三個反應（變性-退火-延伸）0步驟反復進行，使DNA擴增量呈指數(shù)上升。

    引物設計時使合成的寡核苷酸鏈（18～24聚物）適用于多種實驗條件仍不失為明智之舉。②引物的二級結構包括引物自身二聚體、發(fā)卡結構、引物間二聚體等。這些因素會影響引物和模板的結合從而影響引物效率。對于引物的3’末端形成的二聚體，應控制其ΔG大于，因為此種情形的引物二聚體有進一步形成更穩(wěn)定結構的可能性，引物中間或5’端的要求可適當放寬。引物自身形成的發(fā)卡結構，也以3’端或近3’端對引物-模板結合影響更大；影響發(fā)卡結構的穩(wěn)定性的因素除了堿基互補配對的鍵能之外，與莖環(huán)結構形式亦有很大的關系。應盡量避免3’末端有發(fā)卡結構的引物。③引物GC含量和Tm值PCR引物應該保持合理的GC含量。含有50％的G+C的20個堿基的寡核苷酸鏈的Tm值大概在56～62℃范圍內，這可為有效退火提供足夠熱度。一對引物的GC含量和Tm值應該協(xié)調。協(xié)調性差的引物對的效率和特異性都較差，因為降低了Tm值導致特異性的喪失。這種情況下引物Tm值越高，其錯誤引發(fā)的機率也越大。若采用太高的退火溫度，Tm值低的引物對可能完全不發(fā)揮作用。在從一批在特定序列范圍內已合成好的寡核苷酸中選擇一對新的引物時，這種GC含量和Tm值的協(xié)調非常關鍵。一般來說。

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