PCR(聚合酶鏈式反應(yīng))是利用DNA在體外攝氏95°高溫時變性會變成單鏈,低溫(經(jīng)常是60°C左右)時引物與單鏈按堿基互補配對的原則結(jié)合,再調(diào)溫度至DNA聚合酶適反應(yīng)溫度(72°C左右),DNA聚合酶沿著磷酸到五碳糖(5'-3')的方向合成互補鏈。PCR儀實際就是一個溫控設(shè)備,能在95℃,55℃,72℃之間很好地進行溫度控制。PCR擴增儀又稱為PCR基因擴增儀、PCR核酸擴增儀、聚合酶鏈反應(yīng)核酸擴增儀,是利用PCR(Polymerasechainreaction,聚合酶鏈反應(yīng))技術(shù)對特定DNA擴增的一種儀器設(shè)備,被運用于醫(yī)學(xué)、生物學(xué)實驗室中,例如用于判斷檢體中是否會表現(xiàn)某遺傳疾病的圖譜、傳染病的診斷、基因復(fù)制以及親子鑒定等。 臨床診斷、法醫(yī)學(xué)調(diào)查和農(nóng)業(yè)生物技術(shù)研究等領(lǐng)域要求設(shè)備有可靠的性能、靈敏度和標準,pcr儀正巧合適。上海力康實驗室PCR儀近期價格
非洲豬瘟的影響范圍是非常大的,很多家豬或者野豬都極易受到非洲豬瘟病毒的傳染,再加上對于非洲豬瘟,我們無法一勞永逸的解決,養(yǎng)殖戶只能不斷檢測,避免豬瘟的苗頭出現(xiàn),同時注意養(yǎng)殖場內(nèi)的消毒工作,可以有效的減少非洲豬瘟傳染的概率。在分子生物學(xué)中,經(jīng)常會遇到細胞分裂的處理,這些處理方式利用人工來做的話,花費的時間往往極多,這就造成不必要的人力、物力浪費,是非常不合算的,所以我們一般利用基因擴增儀器進行這方面的處理,在很多實驗室的使用過程中,取得了良好的成效。利用基因擴增儀器既可節(jié)省試驗時間,提高實驗效率,又能節(jié)約實驗成本,同時根據(jù)不同的試驗進行不同的設(shè)置,基因擴增儀器是為滿足當(dāng)今分子生物實驗室的需求所設(shè)計,該儀器可以進行任何實時PCR檢測,如病原體、突變、SNP的分析和快速篩選、細胞RNA水平的檢測和量化等。封閉的反應(yīng)體系,將污染降低。該儀器能夠?qū)?shù)據(jù)進行實時收集和分析,其高效的數(shù)據(jù)管理能力使用戶迅速生成數(shù)據(jù)和進行重復(fù)實驗。檢驗室國產(chǎn)PCR儀制造廠家PCR已發(fā)展成為分子生物學(xué)領(lǐng)域的一項關(guān)鍵技術(shù)和常規(guī)技術(shù),極大地推動了生命科學(xué)各個領(lǐng)域的發(fā)展。
1957年Hoagland、Zamecnik及Stephenson等分離出tRNA并對它們在合成蛋白質(zhì)中轉(zhuǎn)運氨基酸的功能提出了假設(shè);1961年Brenner及Gross等觀察了在蛋白質(zhì)合成過程中mRNA與核糖體的結(jié)合;1965年Holley測出了酵母丙氨酸t(yī)RNA的一級結(jié)構(gòu);特別是在60年代Nirenberg、Ochoa以及Khorana等幾組科學(xué)家的共同努力破譯了RNA上編碼合成蛋白質(zhì)的遺傳密碼,隨后研究表明這套遺傳密碼在生物界具有通用性,從而認識了蛋白質(zhì)翻譯合成的基本過程。從分子生物學(xué)的發(fā)展過程,可以看到在近半個世紀中它是生命科學(xué)范圍發(fā)展*為迅速的一個前沿領(lǐng)域,推動著整個生命科學(xué)的發(fā)展。至今分子生物學(xué)仍在迅速發(fā)展中,新成果、新技術(shù)不斷涌現(xiàn),但分子生物學(xué)的歷史還短,積累的資料還不夠。例如:在地球上千姿萬態(tài)的生物攜帶龐大的生命信息,迄今人類所了解的只是極少的一部分,還未認識核酸、蛋白質(zhì)組成生命的許多基本規(guī)律;又如即使到2005年我們已經(jīng)獲得人類基因組DNA3×109bp的全序定了人的5-10萬個基因的一級結(jié)構(gòu),但是要徹底搞清楚這些基因產(chǎn)物的功能、調(diào)控、基因間的相互關(guān)系和協(xié)調(diào),要理解80%以上不為蛋白質(zhì)編碼的序列的作用等等,都還要經(jīng)歷漫長的研究道路。可以說分子生物學(xué)的發(fā)展前景光輝燦爛。
基因擴增儀因操作方便、運行速度快、實驗結(jié)果準確,受到越來越多的分子生物學(xué)研究者青睞。面對各種不同性能的基因擴增儀,又該如何選擇呢?基因擴增儀的選購誤區(qū)誤區(qū)一:儀器通道越多越好隨著基因擴增技術(shù)的成熟運用,多重擴增越來越熱鬧,基因擴增儀也不能幸免。從單通道基因擴增儀發(fā)展到如今各個廠家都推出4通道、5通道甚至6通道基因擴增儀,眼花繚亂的選擇讓人無所適從,就有人一不小心走進了“通道越多越好”的誤區(qū)。在使用有些廠家5通道的基因擴增儀時,為了確保實驗結(jié)果的精確性和準確性都要在實驗中使用ROX或Referencedye,這些熒光染料都必須單獨使用一個檢測通道。這樣以來,真正能檢測多重PCR熒光信號的有效通道只有4個,而且使用校正染料可能會增加后期的使用成本。考慮多重基因擴增儀的通道數(shù)的時候也應(yīng)該從實驗室實際情況出發(fā),多重基因擴增儀并非人人適用、人人可用,因為它使實驗復(fù)雜化了。誤區(qū)二:基因擴增儀無需梯度功能對于使用染料法的定量PCR反應(yīng),雖然有各種各樣的PCR引物設(shè)計軟件或者經(jīng)驗公式計算熔解溫度(Tm值),但運用的公式不同、引物序列不同,Tm值的差異會很大。引物的熔解溫度決定了退火溫度。而且模版中堿基的組合千變?nèi)f化,對于特殊片斷。 基于聚合酶制造的PCR儀實際就是一個溫控設(shè)備,能在變性溫度,復(fù)性溫度,延伸溫度之間很好地進行控制。
力康X960全自動醫(yī)用PCR分析系統(tǒng)是新推出的實時熒光定量PCR儀,秉承力康品牌一貫的 ,產(chǎn)品具有兩通道和五通道兩種配置選擇,標配96孔鍍金模塊,滿足不同應(yīng)用需求。力康X960型全自動醫(yī)用PCR分析系統(tǒng)是特異性靶基因檢測與定量分析的一體化平臺,將PCR熱循環(huán)儀、熒光檢測和各種應(yīng)用分析軟件結(jié)合于一體,實時動態(tài)觀察PCR每一循環(huán)中每個孔中擴增產(chǎn)物情況,無需凝膠電泳分析,無需純化PCR產(chǎn)物,無需進行其他任何實驗操作即可快速得到分析結(jié)果。實時熒光定量RT-PCR技術(shù)是近年來的新型檢測技術(shù),已成為分子醫(yī)學(xué)/生物學(xué)研究的工具,并在許多領(lǐng)域得到了應(yīng)用.上海力康國產(chǎn)品牌PCR儀銷售電話
PCR儀是利用DNA聚合酶進行專一性的連鎖復(fù)制。上海力康實驗室PCR儀近期價格
1.一般性原則(1)長度:一般引物互補區(qū)的長度為16-25bp,引物互補區(qū)的4×(G十C)十2×(A十T)不要沒有必要大于70,一般也不要低于50(2)G十c含量:好在45%一55%之間,但有時受模板限制,無法理想化。但在有幾種選擇時,可以把G十c含量接近50%作為參數(shù)之一(3)堿基分布的隨機性:應(yīng)避免連續(xù)出現(xiàn)4個以上的單一堿基。尤其是不應(yīng)在其3’端出現(xiàn)超過3個的連續(xù)G或C,否則會使引物在G十C富集序列區(qū)錯誤引發(fā)。(4)引物自身:不能含有很長的牢固的自身互補序列,尤其是引物3‘端回折形成的發(fā)夾不要一般超過3堿基,否則會影響引物與模板的結(jié)合(5)引物之間:兩個引物之間不應(yīng)有很長的牢固的互補或同源堿基,尤應(yīng)避免3’端的互補重疊。2.具體原則①引物長度;特異性一般通過引物長度和退火溫度控制。如果PCR的退火溫度設(shè)置在近于引物Tm值(引物/模板雙鏈體的解鏈溫度)幾度的范圍內(nèi),18到24個堿基的寡核苷酸鏈是有很好的序列特異性的。引物越長,擴增退火時被引發(fā)的模板越少。為優(yōu)化PCR反應(yīng),使用確保溶解溫度不低于54℃的短的引物,可獲得好的效率和特異性。總的來說,好在特異性允許的范圍內(nèi)尋求安全性。每增加一個核苷酸,引物特異性提高4倍;這樣,大多數(shù)應(yīng)用的短引物長度為18個核苷酸。 上海力康實驗室PCR儀近期價格
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