復蘇方：法1）從冰箱里取出細胞冷凍保存管，立即放入37℃振動水浴槽中快速解凍。2）待凍存管中細胞混合液完全融化后，立即加入1ml細胞培養基于該冷凍管中與細胞混合，再將細胞混合液從凍存管中移入含有9ml該細胞培養基的試管中，混合均勻。3）離心收集培養細胞（參考離心條件：1,000~2,000rpm，4℃，3~5min），移去上清液。4）清洗細胞，充分洗凈殘留凍存液。5）加入適量的新鮮細胞培養基，使用移液管緩緩地均勻細胞混合液。適量地稀釋后，將細胞混合液移至事先準備好的培養瓶中。6）鏡檢后，研究者可根據各自方法和需要來進行細胞培養。無需程序降溫，細胞復蘇率90%以上。鄭州正規無血清細胞凍存液直銷廠家

新常態下細胞凍存指南：細胞凍存及復蘇的基本原則是慢凍速融，實驗證明這樣可以較大限度的保存細胞活力。目前細胞凍存多采用甘油或二甲基亞砜作保護劑，這兩種物質能提高細胞膜對水的通透性，加上緩慢冷凍可使細胞內的水分滲出細胞外，減少細胞內冰晶的形成，從而減少由于冰晶形成造成的細胞損傷。復蘇細胞應采用快速融化的方法，這樣可以保證細胞外結晶在很短的時間內即融化，避免由于緩慢融化使水分滲入細胞內形成胞內再結晶對細胞造成損傷。典型的細胞凍存液是在生長培養基中加入5%到10%的DMSO和5%到40%的血清，或只是在血清中加入10%的DMSO。目前在有些實驗室中仍然采用這種自制自配的凍存液，優點是成本低，適合自己的細胞。廈門無血清細胞凍存液供應商PH，電解質等的改變，進而促使細胞死亡。

細胞凍存液的配制可選用10%的DMSO加上90%的小牛血清，可以現用現配。除了這個方式，還可選擇20%的DMSO機上80%的小牛血清，配成兩倍的儲存液，在使用時細胞懸液和凍存液按照1:1的比例混勻使用，特別的方便。凍存液可直接置于-20攝氏度的環境中保存。使用細胞凍存液需要注意以下幾點：1、在使用凍存液前，需要確保細胞凍存液已經完全融化，并要輕輕的混勻。對融化后的細胞凍存液要置于4℃的環境中保存。2、使用凍存液之前應該確保凍存前的細胞生長情況比較良好，比如說細胞需要處于對數生長期，并且凍存的時候存活率大于90%。3、在使用細胞凍存液期間，為了保證可以發揮較佳的效果，建議將細胞凍存在液氮之中，這樣可以長時間的進行保存。如果說將細胞置于-80℃的環境下保存，那么保存的時間大約為1年。4、細胞凍存液如果需要做標記的話，要使用耐受有機溶劑的馬克筆進行標記，以防被酒精或異丙醇等擦掉，不能辨識。

細胞凍存是將細胞放在低溫環境，減少細胞代謝，以便長期儲存的一種技術。細胞凍存是細胞保存的主要方法之一，起到了細胞保種的作用。細胞凍存是細胞保存的主要方法之一，利用凍存技術可以使細胞暫時脫離生長狀態而將其細胞特性保存起來，這樣在需要的時候再復蘇細胞用于實驗。目前現有技術中，細胞凍存液中的主要成分有10％二甲基亞砜(DMSO)、20％～90％胎牛血清(FBS)、剩余組分為完全培養基。培養基以及FBS可為細胞提供必要的營養物質。DMSO是一種滲透性保護劑，能夠降低細胞冰點，減少冰晶的形成，從而達到降低細胞損傷的保護效果。但FBS屬于動物源性物質，成分比較復雜，在臨床應用上存在潛在的風險，也增加了污染的幾率，并且由于凍存液中含有動物血清，會導致凍存液的成分存在不穩定的因素。快速凍存即不需要經過梯度降溫，直接將細胞放入-80 ℃冰箱24h。

細胞凍存配制含10%DMSO或甘油的細胞凍存液，4℃預冷（新鮮配制的凍存液會產生大量的熱）；取對數生長期的細胞，用細胞消化酶將單層生長的細胞消化下來；懸浮細胞則直接將細胞收集到離心管中；離心1200rpm，6min；去除上清液，逐漸加入適量預冷的細胞凍存液，用吸管輕輕吹打使細胞均勻，計數，調節凍存液中的細胞終濃度為5×10e6/ml~1×10e7/ml；將細胞分裝入凍存管中，每管1~1.5ml；在凍存管上標明細胞的名稱、凍存時間及操作人員姓名；凍存：標準的凍存程序為降溫速率-1~-2℃/min；到達-80℃時，則可迅速放入液氮中。無血清細胞凍存液的優勢：無需液氮，-80℃冰箱長期凍存。廣州無血清細胞凍存液報價

無血清細胞凍存液，2-8℃保存即可，無需再進行分裝。鄭州正規無血清細胞凍存液直銷廠家

無血清細胞凍存液相對于含血清細胞凍存液的優勢有：1.即用型，無需現配，直接將細胞懸浮于凍存液中即可。2.通用型，適用于凍存各種細胞系、原代細胞。3.無需程序降溫，可直接放置-80℃凍存，操作簡單。4.不含血清，較大減少細胞污染。5.因不含血清，批次間差異小。6.無需液氮，-80℃冰箱長期凍存。7.可培養板整板凍存，例如雜交瘤細胞凍存時可節省篩選過程。無血清細胞凍存液是不含血清和動物源成分，含DMSO、糖類、氨基酸等成分的一款通用型細胞凍存液。鄭州正規無血清細胞凍存液直銷廠家