使用較低溫甘油保存法保存銅綠假單胞菌時,若采用1.5毫升離心管保存菌種,移種時要特別注意無菌操作,盡量采用螺口的帶蓋冷凍管保存菌種,以減少污染的機會。采用螺口的帶蓋冷凍管的方法保存腸桿菌科的細菌及革蘭陽性需氧桿菌如炭疽芽孢桿菌、臘樣芽孢桿菌等均取得良好的保存效果。銅綠假單胞菌保存低溫存法,簡單保存法,將瓊脂斜面孢子培養物、菌絲懸浮液以及由麩皮、大米、小米等谷物原料制成的孢子培養物置于4攝氏度冰箱保存,保存時間不超過1~2個月,若將谷物原料制備的孢子瓶抽真空并在棉塞上浸蠟,以隔絕外界空氣和水汽,保持時間可達3~4個月。銅綠假單胞菌原稱綠膿桿菌。南京桿狀銅綠假單胞菌直銷
銅綠假單胞菌是一種常見的條件致病菌,屬于非發酵革蘭氏陰性桿菌。菌體細長且長短不一,有時呈球桿狀或線狀,成對或短鏈狀排列。菌體的一端有單鞭毛,在暗視野顯微鏡或相差顯微鏡下觀察可見細菌運動活潑。銅綠假單胞菌為專性需氧菌,生長溫度范圍25~42攝氏度,較適生長溫度為25~30攝氏度,特別是銅綠假單胞菌在4攝氏度不生長,而在42攝氏度可以生長的特點可用以鑒別。在普通培養基上可以生存并能產生水溶性的色素,如綠膿素與帶熒光的水溶性熒光素等。在血平板上會有透明溶血環。銅綠假單胞菌有菌體o抗原和鞭毛h抗原。o抗原含有內毒養素和原內毒養素蛋白質兩種成份。原內毒養素蛋白質是一種高分子、低毒性,原性強的保護性抗原,不只存在于不同血清型銅綠假單胞菌中。鄭州CMCC(B)10104凍干粉銅綠假單胞菌的O抗原包含外膜蛋白,為保護性抗原。
銅綠假單胞菌的液氮較低溫保存法,將生長穩定期的細胞懸浮在10%甘油或其他低冰點液體中,密封于安瓿管內,然后控制冷卻速度,使安瓿管溫度逐步下降至-35攝氏度時,即可置于-150攝氏度~-196攝氏度的液氮罐中保存。大多數微生物如病毒、噬菌體、多種細菌、放線菌、酵母和原蟲、特別是一些用冷凍干燥法有困難的微生物,都可用此法保存。微生物菌種應保藏于低溫、清潔和干燥的地方,室溫放置時問過長會導致菌種衰退;菌種操作應在無菌條件下進行,防止雜菌污染,斜面菌種保藏時間通常為1-2個月,應根據菌種狀況及時轉接;凍干菌種保藏時間通常為5~10年;菌種使用過程中如出現雜菌污染或菌種生產性能下降,應及時更換新的菌種。
銅綠假單胞桿菌的凍結保存記錄內容包括冷凍的日期、細胞代號、冷凍管數、冷凍保存中溫度下降的情況、保存位置以及操作者。不使用銅綠假單胞桿菌前,要使用高壓蒸汽滅菌,其自身具有殺菌作用。高壓滅菌反而破壞了其分子結構,可以降低冷凍保護的效果。對細胞注意凍結保存管投入液氮,操作簡單地從液氮向液氮罐內迸發。如果液氮可能會迸發,會凍壞皮膚。操作中盡量帶防寒手套、口罩、工作服或防寒鞋。要注意控制冰箱的質量。在凍結之前確保細胞有活力,沒有微生物污染,值得凍結在這樣的細胞上。另外,幾個細胞凍結后,使1~2管復活,觀察其活力,觀察微生物是否受到污染。在銅綠假單胞菌中,綠膿素的生物合成是以群體效應來調控。
關于銅綠假單胞菌的砂土保存法,主要是取清潔的砂,過60目篩去掉大砂粒,并用磁鐵吸去砂中鐵屑,再用NaOH溶液、10%HCl溶液和水交替清洗數次,干燥后,置于試管或安瓶管中保持2~3cm深,再經干熱滅菌后,加入1毫升菌種培養液,經充分混勻后,放入真空干燥器中,完全干燥后熔封保存。也可用二份洗凈的砂(經HCl預處理)和一份貧瘠、過篩的黃土攙和后滅菌,再進行菌種保藏。在螺旋口試管中裝入1/2管高的硅膠(或無水CaSO4),上鋪玻璃棉,再放上10~20粒磁珠,經干熱滅菌后,接入菌懸液,然后冷藏、室溫保藏或減壓干燥后密封保藏。本法對酵母菌很有效,特別適用于根瘤菌,可保存長達兩年半時間。銅綠假單胞菌有菌體o抗原和鞭毛h抗原。遼寧銅綠假單胞菌凍干粉
銅綠假單胞菌為專性需氧菌。南京桿狀銅綠假單胞菌直銷
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