培養基是指供給微生物、植物或動物(或組織)生長繁殖的,由不同營養物質組合配制而成的營養基質。一般都含有碳水化合物、含氮物質、無機鹽(包括微量元素)、維生素和水等幾大類物質。培養基既是提供細胞營養和促使細胞增殖的基礎物質,也是細胞生長和繁殖的生存環境。培養基由于配制的原料不同,使用要求不同,而貯存保管方面也稍有不同。一般培養基在受熱、吸潮后,易被細菌污染或分解變質,因此一般培養基必須防潮、避光、陰涼處保存。對一些需嚴格滅菌的培養基(如組織培養基),較長時間的貯存,必須放在3-6℃的冰箱內。由于液體培養基不易長期保管,均改制成粉末。常用的培養基制備方法包括固體培養基和液體培養基。金氏B培養基
預裝培養基是一種快速而方便的微生物培養技術,通常在無菌的紙板或管中提供。它們已經含有必要的營養成分,可以直接使用于微生物,從而將實驗室的培養基制備時間從幾個小時縮短到幾分鐘。此外,預裝培養基通常具有長期的穩定性,可以存儲數月甚至數年而不影響到較終的微生物培養結果。雖然預裝培養基可以提供必要的營養成分,但它們不能提供微生物所需要的所有物質。一些微生物需要特定的營養成分,如果預裝培養基缺少這些必要成分,它們將無法生長和繁殖。此外,某些微生物需要特定的肥料和環境條件來繁殖,而預裝培養基通常無法滿足這些要求。AAM培養基干粉培養基可以添加不同的生長因子,這些物質有助于促進或抑制細胞分裂和生長。
干粉培養基是一種在體積很小的瓶子里包含了原材料、微量元素和保持pH緩沖液的粉末狀態培養基。因其干燥的特點,具有很長時間的保存期限,在良好的保存環境下,可以達到數年乃至十年的保存。這使得干粉培養基非常適合涉及多個實驗、多個批次的工作。干粉培養基只需要在配制時加入一定的水,就可以得到所需的液體培養基,降低了配制的難度和操作的復雜度。這種方法避免了由于不同配制批次需要不同的調整,從而導致實驗結果的上下波動的情況。干粉培養基的優點之一是可以自由調整,根據需要添加不同的成分,達到特定實驗目的的需要。例如,添加具有特定作用的內分泌物質,如去氧地酸、細胞因子等,可以促進細胞增殖或發育。此外,通過添加一些抑菌物質,如維生素或其他抑菌劑,可以有效地抑制不需要的微生物污染。
基礎培養基:含有基礎生長所需的基本營養成分,較常用的是肉浸液,俗稱肉湯,主要成分含牛肉浸液和蛋白胨。基礎培養基普遍用于細菌的增菌、檢驗,也是制備其他培養基的基礎成分。營養培養基:在基礎培養基中可加入葡萄糖、血液、生長因子等特殊成分,供營養要求較高的細菌和需要特殊生長因子的細菌生長。較常用的是血瓊脂平板、巧克力血平板等。特殊培養基:包括厭氧培養基和細菌L型培養基等。前者是培養專性厭氧菌的培養基,除含營養成分外,還加入還原劑以降低培養基的氧化還原電勢,如皰肉培養基、巰基乙醇酸鈉培養基等。后者是針對細胞壁缺損的細菌L型,由于胞內滲透壓較高,故培養基必須采用高滲低瓊脂培養基。如果細菌的生長受到限制,可以嘗試調整培養基的成分或添加輔助物質,例如控制培養基中氧氣的含量。
預裝培養基的保存方法:預裝培養基的保存在實驗中也是非常重要的一步。由于培養基中含有大量的微生物和營養成分,因此需要進行正確的儲存,以確保實驗結果的準確和穩定。在保存預裝培養基時,一定要注意以下幾點:儲存的環境一定要干燥、潔凈、通風,并且要避免陽光直射。儲存溫度通常在2℃-8℃之間,在保存時需要進行冷藏處理,避免高溫環境下的微生物污染。使用之前需要在無菌操作區域中先將培養基倒入無菌的器皿中,再進行培養實驗。除了在儲存和使用時需要注意的細節,還有一些其他對預裝培養基進行選擇和應用的一些要點。在選擇預裝培養基時,需要根據實驗需求選擇相應的培養基,比如可以選擇差異性培養基、選擇性培養基及其它特殊性質的培養基。其次,在使用預裝培養基時,需要注意其適用范圍,以免出現不必要的實驗失敗。干粉培養基的制備需要遵循嚴格的衛生標準和生物安全操作指南,以確保培養基的純度和無菌性。強化梭菌培養基(RCM)
雜質會影響培養基的成分,因此制備培養基時需要進行滅菌。金氏B培養基
干粉培養基在制備過程中必須加水。這是因為這種培養基是以干燥的粉末形式保存和運輸,與水分離開,保持較長時間的穩定性。但是,在實驗中需要使用有效的培養基來支持微生物在合適的環境下生長。為了制備可用的培養基液,必須將干粉培養基與水混合。在將水與干粉培養基混合時,需要非常小心仔細地操作。首先,需要嚴格遵守廠家提供的混合比例。某些干粉培養基需要添加一定的水,以制成較稠厚的培養液,而有些需要加入較多的水,才能制成較稀的培養液。因此,在準備工作中,請確保了解您所使用的干粉培養基的混合比例。金氏B培養基