數字聚合酶鏈式反應（digitalpolymerchainreaction，dPCR）技術因具有高靈敏度、受基質干擾少等優勢而被廣用于轉基因食品檢測。本研究綜述了數字PCR技術的原理、系統各部件的優劣勢，梳理了數字PCR技術在轉基因檢測與溯源技術（標準物質）方面的進展和發展趨勢，以期為轉基因食品檢測領域提供參考依據。dPCR的擴增過程大致上可以分為3步：樣品的分散、樣品的熱循環擴增和樣品的檢測。對于數字PCR儀器系統，各個部件之間仍然有較大的改進空間，要發揮部件之間的協同作用是很重要的，而且有持續研究的價值。表1中總結了部分常見的數字PCR系統的類型，以及相對在硬件、便攜性、性價比和自動化程度上的比較。通過創新技術微流控芯片，讓數字PCR單反應耗材價格進入個位數，實現了新的進步，也降低開發難度。廣州醫療系統認證數字PCR系統

數字PCR系統的分散方式決定了分散數量，其結果基于統計的方法進行定量，增加反應單元數量（統計樣本量），可以增加其檢測的容量和動態檢測線性范圍達到和qPCR相近的動態范圍，同時減小一個反應單元中包含多個分子所造成的誤差，達到提高靈敏度和準確度。影響dPCR定量結果的因素包括：儀器采用的分散方式與數量、溶液稀釋方法、分散體積的準確性以及結果表達方式。分散方式與數量由數字PCR系統決定，分散體積和結果表達方式需要實驗人員在實驗過程中優化得到。進口數字PCR原理數字PCR即Digital PCR（dPCR)，它是一種核酸分子定量技術。

ThermoFisherQuantStudio3D是另一個經典的芯片式數字PCR平臺，其基本的檢測流程是：將反應液加入到涂布器中，通過涂布器將反應液均勻涂布在有20000個微孔的芯片上，將芯片放在PCR儀上擴增，將芯片放入讀取儀中采取拍照的方式讀取熒光信號。操作較為復雜，整個過程在封閉的芯片中進行，污染的風險較低。STILLANaica是一個較新的數字PCR平臺，基本的檢測流程是：將反應液加入芯片，將芯片放入微滴生成擴增系統，生成30,000個微滴單層平鋪于芯片中，PCR擴增在芯片上完成。然后將擴增后的芯片轉移至微滴閱讀分析系統，采取拍照的方式讀取熒光信號。由于整個過程在封閉的芯片中進行，污染的風險較低。

現有dPCR分析方法采用熒光探針和基于光的檢測方法來鑒定擴增產物。這些方法要求足夠的靶分子擴增以產生足以被檢測到的信號，但可能會導致額外的錯誤或偏差，因此，希望能夠提供一種改進的、用于檢測樣品內感興趣的核酸的方法，其采用替代性分析方法，具有提高的準確度和精確度，并且其具有可以與基于dPCR的方法關聯使用的靈敏度。dPCR還在樣品內進行單一反應，但是所述樣品被分離成大量的分區(partition)，并且所述反應在每個分區中單獨進行。這種分離允許對核酸量進行靈敏的測量。DPCR已被證明可有效用于研究基因序列中的變異，例如拷貝數變異或點突變。數字PCR是定量技術，基于單分子PCR方法來進行計數的核酸定量，是一種定量的方法。

數字PCR技術是繼一代普通PCR、二代熒光定量PCR之后的第三代PCR技術。該技術將一個樣本分成幾到幾十萬份，分配到不同的反應單元，每個單元包含一個或多個拷貝的目標分子(DNA模板)，在每個反應單元中分別對目標分子進行PCR擴增；擴增結束后，將有熒光信號的微滴判讀為1，沒有熒光信號的微滴判讀為0，終根據泊松分布原理以及陽性微滴的比例，計算出待檢靶分子的濃度或拷貝數。定量：不再依賴于Ct值和標準曲線，直接給出靶序列的起始濃度，實現真正意義上的定量。更高靈敏度與特異性：數字PCR可實現萬分之一稀有樣本的定量，可用于極微量核酸樣本檢測、復雜背景下的稀有突變檢測、表達量微小差異鑒定、單細胞基因表達等方面。數字PCR在分子診斷領域將會發揮巨大的作用，數字PCR適用于生物標志物研究、拷貝數變異分析、微生物檢測、轉基因生物檢測、mRNA和miRNA檢測、基因相對表達研究等，并對遺傳病、、產前診斷的研究提供了一種全新的技術思路與手段，具有廣的、不可替代的應用前景。相同模板進行 96 次擴增，終點處產物量不恒定，但 Ct 值卻極具重現性。全自動多重數字PCR分析應用

數字PCR技術min檢測下限可到2copies/ml，比qPCR靈敏度提升了100倍。廣州醫療系統認證數字PCR系統

dPCR的測量結果通常表示為含量，即拷貝數值或轉基因質量百分比，而QPCR結果通常表示為拷貝數的質量分數。目前市場上可購買到大多數轉基因標準物質，以qPCR定值的標準物質是以拷貝數（單倍體基因組當量）的質量分數來表示特性量；以dPCR定值的標準物質直接采用拷貝數比例來表示特性量。不同方法使用不同的表示方式，會造成測量結果不可比。因此質量分數、拷貝數和拷貝數比例之間的關系需要轉化，才能得到單位一致，數值可比的數據。EU聯合研究中心建議使用轉換因子從拷貝數換算到質量分數。廣州醫療系統認證數字PCR系統

廣州雙螺旋科學儀器有限公司主營品牌有臻準,美國艾科浦,銳訊生物,Sysmex,Eprerdia，發展規模團隊不斷壯大，該公司服務型的公司。是一家有限責任公司（自然）企業，隨著市場的發展和生產的需求，與多家企業合作研究，在原有產品的基礎上經過不斷改進，追求新型，在強化內部管理，完善結構調整的同時，良好的質量、合理的價格、完善的服務，在業界受到寬泛好評。公司擁有專業的技術團隊，具有數字PCR，純水機，病理切片機，倍性分析儀等多項業務。雙螺旋科學儀器順應時代發展和市場需求，通過**技術，力圖保證高規格高質量的數字PCR，純水機，病理切片機，倍性分析儀。