20世紀末，Vogelstein等提出數字PCR(digitalPCR，dPCR)的概念，通過將一個樣本分成幾十到幾萬份，分配到不同的反應單元，每個單元至少包含一個拷貝的目標分子(DNA模板)，在每個反應單元中分別對目標分子進行PCR擴增，擴增結束后對各個反應單元的熒光信號進行統計學分析。PCR實際上是一個在模板DNA、引物(模板片段兩端的已知序列)和四種脫氧核苷酸等存在的情況下，DNA聚合酶依賴的酶促合成反應，擴增的特異性取決于引物與模板DNA的特異結合。檢測結果部分為陽性，部分為陰性，之后進行分子數統計，不需做標曲。華南地區雙螺旋生物儀器數字PCR熒光通道

根據泊松分布的定義和適用條件可知，如果我們設微液滴總數為N，投入的靶序列拷貝數為M，那么“每個微液滴中的靶序列拷貝數”的概率分布是近似滿足泊松分布的。理解之前，首先要明確一點，在檢測的過程中，并不是說一個樣本中檢測到了幾個亮點，這個反應當中就有幾個目標基因的拷貝。因為目標基因的片段，在微滴當中的分布，是符合泊松分布的（也就是說進不進的概率相等，并且相互獨立）。所以，一個發光的微滴中，可能有一個或者三個四個，甚至更多個目標基因的拷貝。因此，發光的微滴數與原始的基因拷貝數并不是一對一的對應關系。全自動數字PCR儀器模板 DNA 量越多，熒光達到域值的循環數越少，即 Ct 值越小。

二項式分布是一個離散概率分布，它給出了m次試驗中k次成功的可能性，每次試驗的概率為p，例如當擲骰子時，二項分布給出了在10次試驗中恰好有7次擲出4的概率。在數字PCR的情況中，投擲骰子類似于將一個目標實體隨機“投擲”到一組分區中，當目標落在選定的分區中時，就是成功。如果有n個分區，并且分區過程是完全隨機的，則目標出現在所選分區中的概率為1/n。該試驗重復m次，樣品中的每個分子一次。更多關于PCR的相關信息，歡迎咨詢廣州雙螺旋科學儀器有限公司。

數字PCR平臺的評價指標有：分割單元數，熒光通道數，操作復雜性和污染風險。但是重要的是檢測準確性，評估數字PCR平臺的一種方法是使用多個數字PCR平臺互相驗證，另一種方法是使用定值準確的標準物質。目前的三代的PCR技術各有各的優缺點，也各有各的應用領域，并不是一代取代一代的關系。技術的不斷進步給PCR技術注入了新的活力，使其能解鎖一個又一個的應用方向，使核酸檢測更方便、更準確。目前dPCR儀器的價格仍然十分昂貴，但隨著系統加工工藝的改進以及使用較便宜的材料，聚合成更小的體積[556]，其價格將會不斷的降低，使其應用到更多的檢測中。無創產前篩查有望成為數字PCR在臨床快速落地的應用。

常規PCR和實時熒光PCR定量檢測都需要已知拷貝數的標準DNA制定標準曲線，由于樣品測定在各種條件上不會完全一致，會造成PCR擴增效率的差異，從而影響定量結果的準確性。而ddPCR不受標準曲線和擴增動力學影響，可以進行定量。如何在雙通道設置及雙探針標記的情況下實現多重檢測?不同位點的雙探針檢測體系中引物和探針采用不同的終濃度，這樣陽性微滴的終點FAM/HEX熒光信號強度就會不同，利用陽性微滴不同的“分簇(cluster)”來區分不同的突變位點。采用對應的KRAS野生型和突變型細胞系對雙重ddPCR檢測體系的性能進行驗證。結果顯示除了Q61H位點外，其他位點的檢測體系在54C的情況下均能很好的區分4個明顯的cluster。楊雁峰博士堅信數字PCR是可以應用于無創產前篩查的理想技術之一，這也是他2016年創立塔歌生物的初衷。珠三角全自動數字PCR品牌

數字PCR是定量技術，基于單分子PCR方法來進行計數的核酸定量，是一種定量的方法。華南地區雙螺旋生物儀器數字PCR熒光通道

naica®六通道微滴芯片數字PCR系統，源于crystal微滴芯片數字PCR技術，自動化微滴生成和擴增，每個樣本孔可實現6熒光通道的檢測，智能化識別微滴并進行質控，3小時內即可獲得至少6個靶標基因的一定程度上拷貝數濃度，融合傳統微滴式和芯片式優勢，被稱為下一代數字PCR技術。只需一步移液操作，將PCR反應液加載于創新型微流控芯片，naica®六通道微滴芯片數字PCR系統即可自動生成單層平鋪的2D微滴陣列，隨后對每個微滴進行溫度均勻一致的PCR擴增后，進行六通道熒光信號采集，計數陰陽性微滴，通過泊松分布計算獲得靶標基因一定程度上拷貝數濃度。華南地區雙螺旋生物儀器數字PCR熒光通道

廣州雙螺旋科學儀器有限公司在數字PCR，純水機，病理切片機，倍性分析儀一直在同行業中處于較強地位，無論是產品還是服務，其高水平的能力始終貫穿于其中。公司始建于2015-04-17，在全國各個地區建立了良好的商貿渠道和技術協作關系。雙螺旋科學儀器以數字PCR，純水機，病理切片機，倍性分析儀為主業，服務于精細化學品等領域，為全國客戶提供先進數字PCR，純水機，病理切片機，倍性分析儀。多年來，已經為我國精細化學品行業生產、經濟等的發展做出了重要貢獻。