實驗儀器：Sysmex CyFlow® Ploidy Analyser 倍性分析儀（Sysmex Partec）試劑盒：CyStain® UV Precise P（Sysmex Partec）實驗步驟：1、取新鮮待測植物葉片 0.5 平方厘米，置于培養皿中2. 取 Partec CyStain UV Precise P 裂解液 400ul 加于植物葉片周圍，用刀片將葉片切碎，以充分提取出完整的細胞核，持續 30-60 秒3. 將培養皿中的液體用 30um 濾網過濾至樣品管中4. 向樣品管中加入 Partec CyStain UV Precise P 的 DAPI 染液 1600ul5. 上機（CyFiow Analyser倍性分析儀）檢測。CyFlow Analyser倍性分析儀為DNA倍性分析和基因組大小檢測提供了專門且適合的DNA熒光染料(DNPI、PI等)。配備532nm光源倍性分析儀儀器

樣品的新鮮程度直接影響實驗的結果。由于次生代謝產物的影響，會導致信號峰過寬，甚至檢測不到信號峰的情況。嫩葉的選擇要選擇新鮮、完全展開、無蟲咬、無枯萎、分裂不活躍的部位。嫩葉的檢測效果明顯好于較老的葉片。倍性檢測首先需要裂解液裂解細胞獲得游離細胞核，然后用 DAPI 染液將細胞核染色體上的 A-T 堿基染色，再用倍性分析儀儀器檢測細胞核里被染色的 A-T 堿基發出的熒光強度。比如二倍體的熒光強度是 100（橫坐標），那么四倍體的熒光強度就是 200（橫坐標），如下圖所示，用 DAPI 染色法檢測蠶豆的倍性。結果的縱坐標是細胞數量的顯示，通常來說，信號峰高說明信號比較好，雜質少。中國全自動倍性分析儀系統CyFlow Analyser倍性分析儀 染色速度快：DNA倍體標本上機檢測小于2分鐘。

流式細胞分析是一種現代分析技術，其在生物學和醫學領域被范圍廣使用，具有“實驗室的 CT”之稱。雖然流式細胞術在植物研究中起步較晚，但由于它具有制樣簡單用量少、操作高效快速且數據重復性高等優勢，已逐漸發展為一種常用的植物基因組大小或植物倍性研究方法。植物的核 DNA 含量和倍性水平是植物學研究中重要的基礎研究指標。流式細胞術的應用，提高了植物核 DNA 含量檢測的準確度和檢測速度.流式細胞儀克服了傳統鑒定方法操作難、時間長等不足，可進行快速、大量的染色體倍性分析，為后續棉花倍性育種提供技術支撐。

提取高質量的細胞核用于倍性檢測至關重要，Peng 等比較了刀切法和研磨法提取棉花細胞核的效果，結果發現，刀切法提取的細胞核質量更高，因此我們選擇刀切法來提取棉花細胞核。根據其他植物材料已有的研究報道，植物取材需要考慮樣品易獲性、細胞核型的穩定性和保存性等因素。如果材料選取不當，會導致提取的細胞核顆粒較少，生成大量的雜質，甚至形成變異系數較大的 DNA 峰。本研究以棉花的老葉和嫩葉為材料制備樣品進行對比，結果表明棉花幼嫩葉片檢測效果好，完全可以作為倍性鑒定試材。CyFlow Analyser倍性分析儀靈活便捷：結構緊湊，便于移動，適用于多種工作場所。

CyFlow Ploidy Analysere倍性分析儀一機全能：1、特殊設計，專為醫學、農業科學、育種及水產養殖領域提供完美的倍性和周期解決方案2、配備365nm光源，高效激發DAPI染料，避免RNA的影響和次生代謝物的影響3、配備532nm光源，高效激發PI染料，激發效率遠超488nm和561nm激光器4、超高熒光分辨率， DNA檢測CV<1%，適合高精度倍性實驗。5、采用TVAC定體積相對計數功能，無需相對計數微球，隨時掌握樣本濃度6、樣本流速從0-20ul/s連續精確可調，適合極低濃度樣本的檢測7、可選配自動上樣器CyFlow Robby，兼容48孔板，96孔板和流式管，實現無人值守的高通量上樣8、結合配套植物倍性試劑，可在5min內完成植物倍性檢測實驗。9、支持樣本快速處理和檢測；10、基于PI和DAPI的熒光DNA分析；11、提供樣本快速處理試劑盒，用于 DAPI 和PI 標記的倍體分析；12、配套的儀器質控試劑；13、所有樣本的細胞核染色(包括 ，葉、根、愈合組織、懸浮組織、雜交細胞等)；14、可用于任何動物組織、培養細胞、懸浮細胞的倍體分析。流式細胞儀是以流式細胞術為理論基礎，集流體力學、激光技術、和計算機為一體的一種新型高科技儀器。珠三角Sysmex倍性分析儀生命科學用品

Ploidy Analyser倍性分析儀采用Partec*染色技術。配備532nm光源倍性分析儀儀器

精細化學品行業的傳統領域主要包括數字PCR，純水機，病理切片機，倍性分析儀等領域。經過長期積累，我國精細化工行業在傳統領域已經基本滿足了國民經濟發展的需要，部分產品已具有一定的國際競爭力，染料、農藥的產量已處于全球**，涂料產量已達到全球第四位。精細化工在生產過程中會產生廢水、廢氣、固體廢物等有害物質，企業需加入大量資本用于這些有害物質的治理，使服務型企業生產符合我國環境保護標準。隨著我國環境保護標準日益提高，企業必須持續加大污染物處理技術研發、環境保護設施加入和污染物處置力度。此外，由于發達地區人力成本高，超過**保護期的農藥原藥和醫藥原料藥已無生產優勢，以中國與印度為象征的發展中國地區逐漸成為農藥、醫藥中間體和銷售的主要生產基地。隨著我國環境保護政策、安全生產政策和職工福利政策的日益完善，以及美歐等發達家對精細化學品中間體進口標準的日益嚴格，精細化工中間體行業的準入門檻越來越高，這些都需要精細化工中間體生產商在環保、安全、產品研發和經營規模等方面進行較大的加入，導致其初始及持續加入不斷攀升。配備532nm光源倍性分析儀儀器

廣州雙螺旋科學儀器有限公司公司是一家專門從事數字PCR，純水機，病理切片機，倍性分析儀產品的生產和銷售，是一家服務型企業，公司成立于2015-04-17，位于廣州市黃埔區銳豐三街4號617房。多年來為國內各行業用戶提供各種產品支持。主要經營數字PCR，純水機，病理切片機，倍性分析儀等產品服務，現在公司擁有一支經驗豐富的研發設計團隊，對于產品研發和生產要求極為嚴格，完全按照行業標準研發和生產。臻準,美國艾科浦,銳訊生物,Sysmex,Eprerdia為用戶提供真誠、貼心的售前、售后服務，產品價格實惠。公司秉承為社會做貢獻、為用戶做服務的經營理念，致力向社會和用戶提供滿意的產品和服務。廣州雙螺旋科學儀器有限公司注重以人為本、團隊合作的企業文化，通過保證數字PCR，純水機，病理切片機，倍性分析儀產品質量合格，以誠信經營、用戶至上、價格合理來服務客戶。建立一切以客戶需求為前提的工作目標，真誠歡迎新老客戶前來洽談業務。