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上海賽默飛數字PCR技術

來源: 發布時間:2023-04-07

20世紀末,Vogelstein等提出數字PCR(digitalPCR,dPCR)的概念,通過將一個樣本分成幾十到幾萬份,分配到不同的反應單元,每個單元至少包含一個拷貝的目標分子(DNA模板),在每個反應單元中分別對目標分子進行PCR擴增,擴增結束后對各個反應單元的熒光信號進行統計學分析。PCR實際上是一個在模板DNA、引物(模板片段兩端的已知序列)和四種脫氧核苷酸等存在的情況下,DNA聚合酶依賴的酶促合成反應,擴增的特異性取決于引物與模板DNA的特異結合。在數字PCR賽道,塔歌生物將加速胎兒染色體非整倍體無創產前篩查注冊證的申報。上海賽默飛數字PCR技術

數字PCR技術的出現不是為了完全取代原有分子診斷技術,而是更好的補充和完善現有技術平臺。數字PCR為不同應用場景下的多樣化核酸檢測需求提供了新的思路,尤其是在臨床檢測方面。國產數字PCR企業在商業化應用方面,也不斷“攻城略地”。數字PCR作為當下靈敏的核酸檢測技術,盡管目前國產數字PCR企業異軍突起,在臨床市場中實現了彎道超車,但未來仍然需要聚焦客戶需求,不斷夯實底層創新,同時在檢測成本、自動化、試劑盒申報注冊、出海國際化等方面不斷努力,提供更為的解決方案。國際局勢,波譎云詭。在百年未有之大變局,實現中華民族的偉大復興,需要國內企業瞄準技術高地,以爭分奪秒的精神,解決技術"卡脖子"的難題,不斷攻堅克難,自主創新,在與國際品牌的同臺競技中,彰顯中國實力。華南地區全自動多重數字PCR價格數字PCR的**原理:有限稀釋、終點PCR和泊松分布。

dPCR在使用過程中需要特別注意體積誤差造成的結果偏差。體積誤差對于測量拷貝數濃度會產生偏差。目前dPCR中體積優化方法以光學顯微鏡觀測為主。分散體積的差異會增加拷貝數結果的不確定性,Emslie等使用光學顯微鏡縱向拍照比較圖片邊緣的微小差異,考察了數字PCR系統中每個微孔內和孔與孔間的體積差異對實驗結果的影響程度。Corbisier等使用微滴數字PCR對6種不同質量分數棉籽粉質粒DNA標準物質[ERM-AD623a-f,濃度范圍(10~10)copies/ul]進行分析,優化了液滴體積得到相應校正因子,并使用該校正因子發現并校準了運行軟件中液滴體積不變的假設而引起的數據偏離,數據結果的一致性有明顯提高。

國產品牌市場份額的不斷擴大,固然有、貿易戰等因素,但更關鍵在于,國產dPCR企業,立足本土,洞察客戶需求,不斷提供各種應用場景下的解決方案。在儀器的自動化程度上,領航基因、思納福醫療、達微生物分別推出全自動一體機,領航基因更是領行業之先,推出了數字PCR工作站;在終端應用開發上,繼科維思HER2基因擴增檢測試劑盒(數字PCR法)獲得NMPA認證后,2022年新羿生物推出較早基于數字PCR技術的NMPA獲證檢測試劑盒;領航基因基于dPCR推出血流檢測試劑盒和結核與非結核分枝桿菌檢測試劑盒,并全速推進試劑盒注冊臨床試驗進度;在熒光通道上,領航基因、思納福醫療、新羿生物大幅國外進口品牌的2-4色熒光通道,分別推出7色、6色及5色熒光通道,進一步提升樣本利用率和檢測靶標覆蓋范圍,降低試驗成本。dPCR可直接溯源SI國際單位制摩爾,適合單一、雙重及多重轉基因標準物質研究,一次可識別不同的轉基因區域。

dPCR的結果統計方式有2種,一種是采用標記多種顏色,通過不同檢測通道分辨不同顏色和強度,再根據分散液滴的數量計算待測基因的含量;另一種采用概率統計的數據處理方法,即通過泊松分布的方法對結果進行分析。應用概率統計分析數據和對數據處理方法的模型直接關系著結果的準確性和分析時間的長短。常用的統計方法是假設每個微反應單元的體積相同,根據泊松統計計算拷貝數,公式為:M=-Vx1n(1-x/)其中M是目標總拷貝數量;V是微反應單元數量;x是發光的微反應單元數量。相較于qPCR,數字PCR可讓你能夠直接數出DNA分子的個數,是對起始樣品的定量。上海賽默飛數字PCR技術

使用數字PCR技術對436例非小細胞肺*樣品進行檢測,并挑選樣本驗證一致性。上海賽默飛數字PCR技術

全自動樣本制備系統DMX-1000配備氣流發生裝置和氣壓控制裝置,能夠實現高精度壓力控制,結合**產品液滴生成芯片和微流控乳液滴生成技術,DMX-1000可以在70秒內快速、穩定、高效地生成大小均一的微乳液滴。微滴數量可達2萬-60萬個,粒徑范圍30-120μm,性能穩定。除此之外,銳訊還提供微流控芯片的定制服務,以滿足不同的液滴數目和尺寸要求。平板式快速擴增儀TC-1000,不再使用傳統的96孔板,而是特制的液滴擴增芯片;不再是傳統的“燒開水”加熱模式,代之以平板式單液滴層均勻受熱的方式。在這樣的改進之下,TC-1000完成40個PCR循環只需約45分鐘(TC-2.0升級版更是把時間縮短到了25分鐘!),大幅縮短了等待時間,提升了實驗進度。這對實驗人員而言,無疑是莫大的福利——高效完成工作,不加班——愛工作,也愛生活。上海賽默飛數字PCR技術

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