3D數字PCR為液體活檢提供技術支持液體活檢是一種非侵入性的檢測基因及臨床效果的一種方法，目前可能正在開展有關3D數字PCR在在液體活檢中的療效，為后期臨床提供更多可靠的指導作用。報道稱“無創傷性肺檢測技術即將登陸中國”。隨著基因檢測技術，如類似3D數字PCR技術的發展，推動我們將進入了“DNA的應用商城”這樣的新時代，如23andme、華大基因等專業的檢測服務機構，提供更加專業的基因檢測結果，經基因報告解讀師或遺傳咨詢師進行通俗的解讀，讓我們每一個人都能夠了解自己的基因，擁有自己的“生命之書”，讓我們更加健康的生活。精細醫療其實本質是應用生物學信息與大數據科學的交叉發展的新型醫學概念與醫療模式。對于精細醫療，重點在于“精細”，不僅只是簡單的基因測序如此簡單，更需要精細的診斷與精細的。從市場規模來看，目前數字PCR市場規模并不大，全球約1.5億至2.5億美元。美國數字PCR儀器

根據泊松分布的定義和適用條件可知，如果我們設微液滴總數為N，投入的靶序列拷貝數為M，那么“每個微液滴中的靶序列拷貝數”的概率分布是近似滿足泊松分布的。理解之前，首先要明確一點，在檢測的過程中，并不是說一個樣本中檢測到了幾個亮點，這個反應當中就有幾個目標基因的拷貝。因為目標基因的片段，在微滴當中的分布，是符合泊松分布的（也就是說進不進的概率相等，并且相互獨立）。所以，一個發光的微滴中，可能有一個或者三個四個，甚至更多個目標基因的拷貝。因此，發光的微滴數與原始的基因拷貝數并不是一對一的對應關系。美國數字PCR儀器臻準推出新款數字PCR產品：AccuONE2.0數字PCR系統。

使用ddPCR的一個主要優點在于，定量不是相對的。微滴式數字PCR計算事件的數量，因此可以確定檢測極限和比較低起始量，以便達到所需的靈敏度。在連續監控或比較不同患者的效果時，這可以更準確地比較負荷，因為所測得的豐度不是相對的。經過實驗證實，ddPCRKRASG12/G13ScreeningKit也能夠檢測患者cfDNA樣品中的KRAS突變（圖2）。這些患者的血漿樣品購自ConversantBio和ProMedDx，之前已通過FFPE基因分型被分為KRAS突變陽性或陰性。歡迎咨詢廣州雙螺旋科學儀器有限公司。

dPCR在使用過程中需要特別注意體積誤差造成的結果偏差。體積誤差對于測量拷貝數濃度會產生偏差。目前dPCR中體積優化方法以光學顯微鏡觀測為主。分散體積的差異會增加拷貝數結果的不確定性，Emslie等使用光學顯微鏡縱向拍照比較圖片邊緣的微小差異，考察了數字PCR系統中每個微孔內和孔與孔間的體積差異對實驗結果的影響程度。Corbisier等使用微滴數字PCR對6種不同質量分數棉籽粉質粒DNA標準物質[ERM-AD623a-f，濃度范圍（10~10）copies/ul]進行分析，優化了液滴體積得到相應校正因子，并使用該校正因子發現并校準了運行軟件中液滴體積不變的假設而引起的數據偏離，數據結果的一致性有明顯提高。數字PCR應用前景廣闊，可用于病原微生物檢測、基因檢測、無創產前篩查、測序結果驗證等領域。

數字PCR平臺的評價指標有：分割單元數，熒光通道數，操作復雜性和污染風險。但是重要的是檢測準確性，評估數字PCR平臺的一種方法是使用多個數字PCR平臺互相驗證，另一種方法是使用定值準確的標準物質。目前的三代的PCR技術各有各的優缺點，也各有各的應用領域，并不是一代取代一代的關系。技術的不斷進步給PCR技術注入了新的活力，使其能解鎖一個又一個的應用方向，使核酸檢測更方便、更準確。目前dPCR儀器的價格仍然十分昂貴，但隨著系統加工工藝的改進以及使用較便宜的材料，聚合成更小的體積[556]，其價格將會不斷的降低，使其應用到更多的檢測中。數字PCR在檢測珍貴樣品和樣品核酸存在降解時具有明顯的優勢。雙螺旋生物儀器數字PCR市場前景

數字PCR的應用甚廣，除了可應用于進行突變的檢測以外，也可運用于基因擴增的檢測。美國數字PCR儀器

作為時下的熱點技術，數字PCR是將核酸樣品分配到大量單獨、平行的微反應單元（nL，納升級別）中，使得每個反應單元中盡可能含有1個模板分子，并在此基礎上進行擴增、檢測和分布統計，從而實現靶標分子的比較 計數。（圖：數字PCR技術原理）根據微反應單元的不同形式，數字PCR產品可分為微板式、微滴式和芯片式等。目前，市場上主要的數字PCR產品主要是基于微滴式和芯片式，如Bio-Rad公司的QX200微滴式系統和ThermoFisher公司的QuantStudio系統等。與一、二代PCR技術相比，數字PCR具有很多優勢：一是特異性、靈敏性均有顯著提高；二是在不依賴內參和標準曲線的前提下，可直接得到比較 量化指標；三是微反應單元相互獨立、封閉，避免了PCR抑制劑及不同核酸分子擴增產物間的相互干擾，準確度和可重復性較高。美國數字PCR儀器

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