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西安液相色譜填料哪家強

來源: 發布時間:2021-07-14

液相色譜填料技術進展   2 液相色譜填料技術進展   近年來,液相色譜填料技術的發展主要在于快速液相色譜分析、多種色譜固定相及各種分離模式的應用。   2.1 基于亞2微米填料的高效液相色譜柱技術   范氏(Van Demeter)方程是一個描述線速度與塔板高度(柱效)關系的經驗式。在范氏方程中,填料粒徑大小是影響塔板高度的變量之一(圖2),因此,提高分離效能的有效方法之一是減小填粒粒徑。較小粒徑的填料有利于降低渦流擴散及改變傳質路徑,不僅使柱效更高,而且即使在較高的線速度下,理論塔板高度也不會增大,使色譜柱的分離性能得以保持,并有效地縮短分析時間和減少溶劑消耗,更加綠色環保。2000年前,人們專注于鍵合相類型的開發。2003 年,在匹茲堡展會(Pittcon 2003)上展出了1.8 μm 的ZORBAX STM(亞2微米,SB-C18柱)快速分析色譜柱,該色譜柱柱效是常規3.5μm 色譜柱的2倍,開啟了液相色譜更快速分析的新篇章。同時,耐壓能力達60 MPa甚至120 MPa的超高效液相色譜儀的逐步推出,使得采用小粒徑色譜柱,通過提高流速加快分析速度,能有效提高分辨率和靈敏度,從而使得諸多復雜體系的分離成為可能。如今,以亞2 微米填料為填充劑的高效液相色譜柱西安液相色譜填料哪家強

不同選擇性的色譜固定相   由于反相色譜分離基于多種作用力的結果,不同鍵合相或同一種鍵合相但不同的硅膠基質、封端技術和鍵合技術,其疏水作用、空間位阻、氫鍵作用、靜電作用、π-π作用、偶極-偶極作用等能力不同,對化合物的分離能力不同,故而表現出不一樣的選擇性。比如,在碳鏈中嵌入極性的酰胺基團,不僅能夠使鍵合相的水相兼容性增加,而且可以提高化合物與固定相之間的氫鍵作用能力,使之獲得與普通C18 填料不一樣的選擇性。這樣的色譜柱有ZORBAX Bonus RP 和Waters Symmetry shield 等。Huawei Gu等利用Bonus RP 色譜柱與其他常規碳鏈反相色譜柱選擇性的不同,使用二維液相色譜實現復雜體系的分離。又如,苯基柱可以提供π-π 作用,用于含有苯環或能提供π 鍵作用的結構類似物分析;而五氟苯基(Penta Fluorophenyl Propyl,PFP)柱(則除了提供π-π 作用外,還可以提供偶極作用、靜電作用等,提高了苯環上位置異構體的分辨能力。蘇州液相色譜填料

多種分離模式的應用  LCCC 法是根據聚合物的功能基團、嵌段結構的差異進行聚合物分離的一種色譜技術。LCCC 法的原理是基于臨界點之上、臨界點之下以及臨界點附近的標度理論。當使用多孔填充材料作為固定相時,分子排阻色譜(size exclusion chromatography,SEC)和相互作用色譜(interaction chromatography,IC)的分離機制在分離聚合物時同時發生作用。在某個特殊色譜條件(固定相、流動相組成、溫度)下,存在2 種分離機制的臨界點,被稱為焓熵互補點或色譜臨界條件(critical conditions)或臨界吸附點(critical adsorption point,CAP)。在這一點,聚合物分子按照分子末端功能基團的不同或嵌段結構的差異分離,與分子的聚合物摩爾質量(分子量)無關,聚合物的洗脫體積等于色譜柱的空隙體積。目前,這一技術成功用于脂溶性聚合物的分析,對于水溶性聚合物的應用研究有待深入和擴展。為適應大分子量聚合物的分離需要,比常規孔徑、粒徑大得多的填料和更寬柱徑的色譜柱也應隨之出現。

整體化色譜柱填料技術   整體化色譜柱(monolithic column)也是近年液相色譜柱填料研究的另一個重要方向。整體柱,又稱為棒狀柱,是一種用有機或無機聚合方法在色譜柱內進行原位聚合的連續床固定相。與常規裝填的液相色譜柱相比,整體柱具有更好的多孔性和滲透性,可以使用高流速實現快速的傳質分離。聚合物整體柱一般采用離子交換或親和色譜方式,用于生物大分子如蛋白、抗體、DNA 的超快速分析,這樣的色譜柱包括Bio-Monolith 離子交換柱和Protein A、Protein G 親和色譜柱,以及ThermoroSwift IEX 離子交換柱和ProSwift RP 柱。使用此類整體化色譜柱分析大分子物質時,分離通常可以在幾分鐘內完成。無機基質的整體柱一般采用硅膠以及在硅膠表面鍵合的反相填料,柱床中既有供流動相流過的粗孔(約2 μm),又有便于溶質進行傳質的中孔(幾十個納米),如圖5(來源于Merck 的目錄資料)所示。市場上商品化的整體柱產品不多,如Chromolith? 整體柱,該柱子具有非常低的柱壓和較高的基質耐受能力,因此在普通高效液相色譜儀以及超高效液相色譜儀上都可以兼容。

不同選擇性的色譜固定相 一般硅膠基質填料的固定相其pH適用范圍為2~8。為提高硅膠基質的填料鍵合相在酸性條件下的穩定性,一般在碳鏈的硅烷基側鏈上采用大體積的有機基團進行保護,比如采用雙異丁基或雙異丙基的側鏈保護,使得此類色譜填料能夠穩定地用于pH0.8~8 的流動相體系中,而不會導致硅烷鍵的流失。如中國藥典方法中,洛伐他汀、氫溴酸右美沙芬等在較低pH 條件下,使用這類的色譜柱可以獲得較好的耐用性。   在提高硅膠基質填料堿性穩定性方面,除了使用致密鍵合、雙配位鍵合以及雙重封端等技術,還使用硅膠- 有機雜化顆粒,或者在硅膠表面進行聚合物包覆,提高硅膠在堿性條下的穩定性,同時降低硅  醇基在堿性條件下的解離,避免堿性化合物拖尾。近期推出能夠耐受高pH 穩定性的Poroshell HPH-C18(2.7 μm)和C8 填料(4 μm),這種填料兼顧了表面多孔型填料和硅膠表面有機雜化的優勢,具有高柱效、寬pH 耐受范圍(2~11)的優勢。蘇州液相色譜填料

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