熒光微球分析技術屬于化學材料發(fā)展結果,可用于細胞表面抗原的檢測、退行性神經(jīng)病變示蹤物、吞噬功能的檢測、血流分析、敏感性診斷試劑等,本文介紹了熒光微球分析技術以及熒光微球吞噬實驗的操作步驟。 熒光微球分析 技術簡介 熒光微球分析技術是近年來化學材料科學活躍發(fā)展 的產(chǎn)物,各種大小(0.2~10μm)可產(chǎn)生熒光和色彩的人工微球應運而生,目前各種材料人工合成、多種顏色和規(guī)格的熒光微球有2大類,一種是表面不帶修飾基團的微球,另一種是攜帶各種化學修飾基團,包括羧基化修飾、氨基修飾、巰基或醛巰基修飾等的微球。 蘇州介孔微球
利用超細的固體顆粒可以代替表面活性劑穩(wěn)定地存在于油/水界面,能阻止分散的油(水)微滴再次凝聚為大液滴而分相,起到了穩(wěn)定乳液的作用。Yin等用溫和的Pickering乳液聚合法一步制備PS/Fe3O4高磁性微球。用溴化十六烷基三甲銨(CTAB)改性的Fe3O4粒子作為穩(wěn)定劑(錨定在聚合物外層),完全疏水的油酸改性的Fe3O4粒子則被包埋在微球中。
Liu等首先利用無皂乳液法制備油酸包裹的Fe3O4納米粒子,再利用種子乳液聚合法制備了P(MMA-DVB(二乙烯基苯)-GMA)/Fe3O4磁性復合微球,***在微球表面接枝聚酰胺(PAMAM)(圖1)。所得的接枝聚酰胺磁性高分子微球的比飽和磁化強度為4.9A·m2/kg,遠低于純磁性納米粒子,分析可能是微球的殼層比較厚所致.
亞微米(50~500nm)液滴構成的穩(wěn)定的液/液分散體系稱為細乳液,在穩(wěn)定的細乳液聚合中,細乳液液滴是主要的成核點即聚合場所,聚合前液滴的數(shù)目和大小在聚合過程中基本保持不變,決定了**終的乳膠粒的數(shù)目和尺寸,不像常規(guī)聚合由聚合動力學決定。Zhang等[14]通過細乳液聚合法制備P(St-MMA)/Fe3O4復合微球,磁性微球的比飽和磁化強度達到51.0A·m2/kg,磁性Fe3O4納米粒子的含量達到61.5wt%。
蘇州介孔微球
一個乒乓球直徑40毫米,重量2-3克。如果把乒乓球做到直徑40納米微球,由于1毫米是106納米,
因此一個普通乒乓球就可以做出1018個直徑40納米微球。其表面積有5000多平米,相當與5個足
球場大小,同樣重量的40納米微球與40毫米乒乓球相比表面積增加了1012倍,因此納米微球
表面吸附能力也增加了1012倍。當尺寸變小,表面吸附能力大幅度增加還是一個物理量變的過程,
而某些物質小到一定程度時,其性能還會出現(xiàn)質的變化。比如說量子點就是有一類物質當尺寸小到
納米尺度時,這些物質就會發(fā)生質的變化,由原本不發(fā)光的物質變成會發(fā)光的物質,而且發(fā)光的顏
色或波長與尺寸還有關系。因此只要控制這些物質的尺寸就可以控制這類物質的發(fā)光波長。材質不
變,只依靠尺寸的變化就可以改變其性能的巨大變化就是納米技術領域興起的重要原因之一。另外
一個案例也可以說明這個問題。一個普通塑料(聚苯乙烯)組成的微球,當其尺寸與光的波長相當
如何制作納米微球呢? 離子交聯(lián)法是制作納米微球的基本方法之一,適用于以殼聚糖、海藻酸鈉等 為材料的納米微球。其主要原理是作為***載體的材料通過離子交聯(lián)法從乳 液中析出,同時通過氫鍵相互作用和疏水相互作用將***包埋在載體中,從 而制備成載藥微球。該方法制備條件溫和,整個過程不使用對人體有害的試 劑,也成為載藥微球的理想制備方法之一。 納米微球的典型制備方法還有“乳化-溶劑揮發(fā)法”和“微流控法”。“乳 化-溶劑揮發(fā)法”是將模型***先溶解于有機溶劑中,然后滴加到含有表面活 性劑的水相中,在均質機的高速剪切下形成油相/水相型乳液,再通過常壓或減 壓方式除去乳液分散相中的揮發(fā)性有機溶劑,使納米粒硬化,***通過冷凍干 燥從水性混懸液中收集納米粒。“微流控法”是一種在微米尺度的通道中操 控兩種或幾種互不相溶的微小體積液體,連續(xù)、可控地生產(chǎn)具有高度單分散尺 寸的單乳液滴和多重乳液液滴的技術。
如何精確控制和大規(guī)模化生產(chǎn)裸眼看不到的納米微球并賦予這些材料的功能, 以滿足現(xiàn)代產(chǎn)業(yè)的需求是當今納米材料科學家**重要的研究方向。納米微球 的關鍵技術問題和研究方向如下: 1) 納米微球粒徑大小徑及粒徑分布精確控制關鍵技術: 納米微球的應用非常***,不同的應用需要不同性能的微球,很多**應用都 對微球的粒徑大小和均一性都有極高的要求,如液晶間隔物微球和導電金 球都要求能精確控制粒徑大小(平均粒徑精度控制在50納米以下),粒徑分 布滿足變異系數(shù)小于3%,. 因此不同材料組成的納米微球的精確粒徑大小和分 布本領域首要解決的關鍵技術問題 2) 納米微球的孔徑大小,孔徑分布和比表面精確調控關鍵技術: 在很多應用領域,不僅要嚴格控制微球材料、粒徑大小、分布和機械強度, 還要調控微球的比表面積、孔道結構等,如用于生物分離和分析的微球介質和 色譜填料,微球粒徑大小、均一性、納米孔道結構都會影響生物分子分離和 分析效果,因此如何調控微球孔道結構,比表面積也是關鍵技術之一。蘇州介孔微球
蘇州介孔微球
3) 納米微米球表面改性和功能化技術: 不同的應用需要不同的表面功能基團,如用于診斷的熒光和磁性微球一般都需 要有表面活性基團,使得抗體及生物分子可以鏈接到微球表面.因此微球表面功 能化或改性以滿足不同應用領域的需求是一重要技術問題。 4) 納米微球規(guī)模化生產(chǎn)工藝技術: 很多科研院所開發(fā)出的納米微球合成方法都只能局限于實驗室的制備,一旦放 大生產(chǎn)就往往重復不出來,因此技術無法轉化成產(chǎn)品。如何解決從實驗室到大規(guī) 模化生產(chǎn)的工程轉化也是關鍵問題之一。 ***,微球應用開發(fā)牽涉到很多交叉領域的技術,需要不同領域的**緊密合作 才能開發(fā)不同領域應用的微球產(chǎn)品。 蘇州介孔微球
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