培養基(Medium)是供微生物、植物和動物組織生長和維持用的人工配制的養料,一般都含有碳水化合物、含氮物質、無機鹽(包括微量元素)以及維生素和水等,有點還添加克菌素、色素、和血清。為方便長期保管,培養基的成分均制成粉末狀。使用時再配制成可用的培養基,整個制備過程培養基需要嚴格的滅菌。目前對培養基滅菌通常使用高壓蒸汽法,因為蒸汽具有很強的穿透能力,能夠殺死各種微生物,微生物受熱死亡的原因,主要是因高溫使微生物體內的一些重要蛋白質,如酶等,發生凝固、變性,從而導致微生物無法生存而死。滅菌中加熱溫度和受熱時間與滅菌程度和營養成分的破壞都有關系。培養基制備器小倒管浸滿培養基(不留氣泡)后再加入到盛LST的試管中。內蒙古自動培養基制備器
簡單制作培養基,需要完成以下幾個主要步驟:需要對其進行消毒處理,普通介質使用121℃高壓蒸汽滅菌15分鐘。本發明適用于各種介質的制備,如無特殊要求,可用于滅菌。一些熱成分,如碳水化合物,應該單獨制備20%或更多的濃縮液,過濾或間斷殺菌,然后通過無菌操作技術加入到培養液中。在低溫下,明膠培養基也能殺菌。血、體液及素應經無菌處理后,加至約50℃冷卻培養基中。需要對培養基的質量進行檢測。每次處理完培養基,都要仔細檢查,如破損、浸漬、顏色異常、棉塞污染等,要進行篩選和棄置,才能確定pH值。培養基培養一晚,若有細菌生長,培養基將被丟棄。常規菌株接種1×2管或瓶培養基,24h培養,對生長不良或無菌的菌株進行培養,追蹤其產生原因,并反復接種。如不發生變化,應丟棄培養基,禁止使用。內蒙古自動培養基制備器培養基根據使用范圍可分為細菌培養基、放線菌培養基、酵母菌培養基、培養基等。
培養基配制方法:正確制備培養基是微生物檢驗的較基礎步驟之一,使用脫水培養基和其他成分,尤其是含有有毒物質(如膽鹽或其他選擇劑)的成分時,應遵守良好實驗室規范和生產廠商提供的使用說明。培養基的不正確制備會導致培養基出現質量問題。使用商品化脫水合成培養基制備培養基時,應嚴格按照廠商提供的使用說明配制。如重量(體積)、pH、制備日期、滅菌條件和操作步驟等。實驗室使用各種基礎成分制備培養基時,應按照配方準確配制,并記錄相關信息,如:培養基名稱和類型及試劑級別、每個成分物質含量、制造商、批號、pH、培養基體積(分裝體積)、無菌措施(包括實施的方式、溫度及時間)、配置日期、人員等,以便溯源。
培養基質量測試:(1)澄清度:水是細胞培養基的溶劑。細胞培養基中的營養成分只有完全溶解于水才能被細胞吸收攝取,細胞才能生長增殖,因此細胞培養基是否溶解以及培養液是否透明澄清直接影響培養基使用。該項目是通過對水溶解后的細胞培養基的澄清度檢查,判斷細胞培養基的澄清度。按中國藥典2005年版二部附錄ⅨB進行。(2)pH值:哺乳類動物細胞生長需要合適的酸堿度,pH過高或者過低都會導致細胞死亡。pH值的測定也可以檢查細胞培養基的批間差。清大天一標準規定取規定量供試品,用注射用水(水溫20℃-30℃)溶解至1L,加入規定量碳酸氫鈉到上述溶液中,用與細胞培養基溶液pH值相近的兩點標準緩沖液校準后的酸度計進行測定。按中國藥典2005年版二部附錄ⅥH進行;加入規定量的碳酸氫鈉到上述溶液中,按中國藥典2005年版二部附錄ⅥH進行。培養基的實驗室制備:正確制備培養基時微生物檢驗的較基礎步驟之一。
培養基的類別按照培養基的成分來分:培養基按其所含成分,可分為合成培養基、天然培養基和半合成培養基三類。(1)合成培養基。合成培養基的各種成分完全是己知的各種化學物質。這種培養基的化學成分清楚,組成成分精確,重復性強,但價格較貴,而且微生物在這類培養基中生長較慢。如高氏一號合成培養基、察氏培養基等。(2)天然培養基。由天然物質制成,如蒸熟的馬鈴薯和普通牛肉湯,前者用于培養霉菌,后者用于培養細菌。這類培養基的化學成分很不恒定,也難以確定,但配制方便,營養豐富,所以常被采用。(3)半合成培養基。在天然有機物的基礎上適當加入已知成分的無機鹽類,或在合成培養基的基礎上添加某些天然成分,如培養霉菌用的馬鈴薯葡萄糖瓊脂培養基。這類培養基能更有效地滿足微生物對營養物質的需要。要根據不同微生物的營養需求選擇適宜的營養物質,配制針對性強的培養基。內蒙古自動培養基制備器
培養基制備器真彩色液晶屏顯示,觸摸屏加按鍵操作。內蒙古自動培養基制備器
孢子培養基:孢子培養基是供菌種繁殖孢子的一種常用固體培養基,對這種培養基的要求是能使菌體迅速生長,產生較多較好的孢子,并要求這種培養基不易引起菌種發生變異。所以對孢子培養基的基本配制要求是:靠前,營養不要太豐富(特別是有機氮源),否則不易產孢子。如灰色鏈霉在葡萄糖-硝酸鹽-其它鹽類的培養基上都能很好地生長和產孢子,但若加入0.5%酵母膏或酪蛋白后,就只長菌絲而不長孢子。第二,所用無機鹽的濃度要適量,不然也會影響孢子量和孢子顏色。第三,要注意孢子培養基的pH和濕度。生產上常用的孢子培養基有:麩皮培養基、小米培養基、大米培養基、玉米碎屑培養基和用葡萄糖、蛋白胨、牛肉膏和食鹽等配制成的瓊脂斜面培養基。大米和小米常用作霉菌孢子培養基,因為它們含氮量少,疏松、表面積大,所以是較好孢子培養基。大米培養基的水分需控制在21%-50%,而曲房空氣濕度需控制在90%-靠前。內蒙古自動培養基制備器
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