培養基的類型:1、根據對培養基組成物質的化學成分是否完全了解來區分,可以將培養基分為天然培養基、合成培養基和半合成培養基。(1)天然培養基:天然培養基是指利用各種動、植物或微生物的原料,其成分難以確切知道。用作這種培養基的主要原料有:牛肉膏、麥芽汁、蛋白胨、酵母膏、玉米粉、麩皮、各種餅粉、馬鈴薯、牛奶、血清等。用這些物質配成的培養基雖然不能確切知道它的化學成分,但一般來講,營養是比較豐富的,微生物生長旺盛,而且來源多方面,配制方便,所以較為常用,尤其適合于配制實驗室常用的培養基。這種培養基的穩定性常受生產廠或批號等因素的影響。(2)合成培養基合成培養基是一類化學成分和數量完全知道的培養基,它是用已知化學成分的化學藥品配制而成。這類培養基化學成分精確、重復性強,但價格昂貴,而微生物又生長緩慢,所以它只適用于做一些科學研究,例如營養、代謝的研究。(3)半合成培養基。液體培養基在靜止的條件下,在菌體或培養細胞的周圍,形成透過養分的壁障,養分的攝入受到阻礙。吉林全自動培養基制備儀
培養基的使用:1.瓊脂培養基的融化:將培養基放到沸水浴中或采用其他有相同效果的方法(如高壓鍋中的蒸汽)融化。經過高壓滅菌的培養基盡量減少重新加熱的時間,避免過度加熱。培養基融化后立即移開,室溫靜置片刻(約2min),以免玻璃容器發生破裂。融化后的培養基放入47℃~50℃恒溫水浴鍋中保溫,冷卻到47℃~50℃所需的時間取決于培養基的類型、體積和在水鍋里的分裝量。融化后內培養基應盡快使用,放置時間一般不超過4h。剩余的培養基固后不得再次融化使用。特別是靈敏性培養基,應根據相關標準,縮短融化后放置的時間。吉林全自動培養基制備儀牛肉膏蛋白胨培養基就是很常用的基礎培養基,它可作為一些特殊培養基的基本成分。
培養基制備的九個步驟關注要點:步驟一:稱取數量:用1/100的電子天平稱出培養基所需的藥物。首先參照配方計算出配制相應培養基需要各成分的數量,然后用電子天平準確稱取重量。步驟二:培養基溶化:將培養基納入燒杯容器中,加小適量的水,緩慢加水并用玻璃棒小幅度攪拌。倘若培養基中不含瓊脂,則不需要對培養基加熱;相反含有瓊脂,就需要用本生燈/電磁爐加熱煮沸。步驟三:調培養基pH:雖然培養基中含有緩沖物質,可以盡量使培養基的pH值保持在標準范圍內,但如果配制的培養基不能要求,則必須進行必要的調整。如果您有校準過的pH計,則可以使用pH計。步驟四:培養基過濾:如果對配制的培養基沒有特殊要求,這一步可以省略。步驟五:培養基分裝:準備好的培養基根據用途不同分為燒瓶、試管等容器,分裝試管量大采用自動分液器,分裝試管量小,可以用漏斗分液。確定這批培養基的較終pH值。步驟六:培養基滅菌處理:分裝完成的培養基應馬上滅菌。
培養基的類型-根據培養基的用途來區分,可分為選擇培養基、增殖培養基、鑒別培養基等。1)選擇培養基在培養基中加入某種物質以殺死或抑制不需要的菌種生長的培養基,稱之為選擇培養基。如鏈霉素、氯霉素等抑制原核微生物的生長;而制霉菌素、灰黃霉素等能抑制真核微生物的生長;結晶紫能抑制革蘭氏陽性細菌的生長等。2)增殖培養基在自然界中,不同種的微生物常生活在一起,為了分離我們所需要的微生物,在普通培養基中加入一些某種微生物特別喜歡的營養物質,以增加這種微生物的繁殖速度,逐漸淘汰其它微生物,這種培養基稱為增殖培養基,這種培養基常用于菌種篩選和選擇增菌中。在某種程度上講,增殖培養基也是一種選擇培養基。3)鑒別培養基在培養基中加入某種試劑或化學藥品,使難以區分的微生物經培養后呈現出明顯差別,因而有助開快速鑒別某種微生物。脫水培養基,又稱預制干燥培養基,指含有除水分外的一切成分的商品培養基。
培養基的分裝:大批量配制時使用的自動分配器須經校準和確認。每次使用前后,均要對分配器的管道系統進行沖洗,在分裝無菌培養基前,則要采用無菌硅膠管。固體培養基一般分裝在250ml、500ml錐形瓶中,高壓滅菌后根據需要分裝平皿或試管。平皿:傾注平皿,應在無菌室中放置3—4h,如用塑料平皿須在35℃培養箱中倒置30—60min。讓水蒸汽自然蒸發。斜面:制備低層斜面分裝于試管,約占容積1/5,滅菌后趁熱斜放在細玻璃棒和木桿上,使成斜度,分裝使注意管口和瓶塞上勿沾有培養基,如沾有培養基應用布抹去,以避免污染。培養基配成后一般需測試并調節pH,還須進行滅菌,通常有高溫滅菌和過濾滅菌。云南瓊脂培養基 培養基制備儀
培養基根據使用范圍可分為細菌培養基、放線菌培養基、酵母菌培養基、培養基等。吉林全自動培養基制備儀
培養基配制方法:正確制備培養基是微生物檢驗的較基礎步驟之一,使用脫水培養基和其他成分,尤其是含有有毒物質(如膽鹽或其他選擇劑)的成分時,應遵守良好實驗室規范和生產廠商提供的使用說明。培養基的不正確制備會導致培養基出現質量問題。使用商品化脫水合成培養基制備培養基時,應嚴格按照廠商提供的使用說明配制。如重量(體積)、pH、制備日期、滅菌條件和操作步驟等。實驗室使用各種基礎成分制備培養基時,應按照配方準確配制,并記錄相關信息,如:培養基名稱和類型及試劑級別、每個成分物質含量、制造商、批號、pH、培養基體積(分裝體積)、無菌措施(包括實施的方式、溫度及時間)、配置日期、人員等,以便溯源。吉林全自動培養基制備儀
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