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來源: 發布時間:2023-03-22

培養基的使用:1.瓊脂培養基的融化:將培養基放到沸水浴中或采用其他有相同效果的方法(如高壓鍋中的蒸汽)融化。經過高壓滅菌的培養基盡量減少重新加熱的時間,避免過度加熱。培養基融化后立即移開,室溫靜置片刻(約2min),以免玻璃容器發生破裂。融化后的培養基放入47℃~50℃恒溫水浴鍋中保溫,冷卻到47℃~50℃所需的時間取決于培養基的類型、體積和在水鍋里的分裝量。融化后內培養基應盡快使用,放置時間一般不超過4h。剩余的培養基固后不得再次融化使用。特別是靈敏性培養基,應根據相關標準,縮短融化后放置的時間。培養基制備器一鍵選擇培養皿類型;整合數據庫,預設培養皿尺寸選擇程序。河南培養基自動分裝機

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微生物檢驗培養基制備的要點:培養基倒入平板,將滅菌溶化的培養基冷卻至五十度后,倒入無菌干燥的培養皿中。微生物培養基制備的溫度不能太高,否則培養皿內蓋容易形成過多的冷凝水;溫度太低,中海培養基容易凝固成塊狀,不能做成平板。倒平板時,要靠近酒精的火焰以防止外來細菌落入盤中。左手托住培養皿,右手托住三角瓶底部。用小指和手掌拉出錐形瓶的棉塞,燒灼燒瓶口,用拇指和食指在培養皿蓋上打開一條縫,直到燒瓶口剛好伸手進去,倒入培養基,直到底部被覆蓋。不要超過培養皿高度的三分之一,迅速蓋上蓋子,放在桌子上,輕輕旋轉培養皿,使培養基分布均勻,凝結后即可。河南培養基自動分裝機培養基制備器分裝好的培養基應立即進行滅菌。

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培養基防止污染應該注意以下事項:確認工作細胞庫是否被污染,確認毒種工作種子批是否被污染,確認所用培養基及其添加成分(如小牛血清、NaHCO3等)是否被污染,均可用細菌、病菌及支原體無菌試驗來確認并排除。同時要對無菌試驗培養基的靈敏度進行驗證。實際生產中,可以從配制好的培養液中取少量加入營養瓊脂于恒溫培養箱內培養,48小時即可觀察有無污染。其它:高壓滅菌設備、過濾除菌設備均應進行驗證,確保滅菌和除菌效果;前者應在投產前及其后的每6個月進行驗證,后者應在每次除菌前、后進行驗證工作(至少應在除菌后進行一次)。另外,應將有毒區與無毒區嚴格分開,并有各自自立的空氣凈化系統及孵室,有毒區對無毒區應保持相對負壓,防止病毒對培養細胞(尤其是細胞庫)的污染。

培養基的分裝:大批量配制時使用的自動分配器須經校準和確認。每次使用前后,均要對分配器的管道系統進行沖洗,在分裝無菌培養基前,則要采用無菌硅膠管。固體培養基一般分裝在250ml、500ml錐形瓶中,高壓滅菌后根據需要分裝平皿或試管。平皿:傾注平皿,應在無菌室中放置3—4h,如用塑料平皿須在35℃培養箱中倒置30—60min。讓水蒸汽自然蒸發。斜面:制備低層斜面分裝于試管,約占容積1/5,滅菌后趁熱斜放在細玻璃棒和木桿上,使成斜度,分裝使注意管口和瓶塞上勿沾有培養基,如沾有培養基應用布抹去,以避免污染。基礎培養基各種微生物的營養要求雖不相同,但多數微生物需要的基本營養物質相同。

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培養基的分裝:培養基的分裝,應按使用的目的和要求,分裝于試管、燒瓶等適當容器內。分裝量不得超容器裝盛量的2/3。容器口可用墊有防濕紙的棉塞封堵,其外還須用防水紙包扎(現試管一般多有用螺旋蓋者)。分裝時好好能使用半自動或電動的定量分裝器。分裝瓊脂斜面培養基時,分裝量應以能形成2/3底層和1/3斜面的量為洽當。分裝容器應預先清洗干凈并經干烤消毒,以利于培養基的徹底滅菌。每批培養基應另外分裝20ml培養基于一小玻璃瓶中,隨該批培養基同時滅菌,以為測定該批培養基好終pH之用。半合成培養基在合成培養基中,加入某種或幾種天然成分。河北瓊脂分裝機

培養基制備器在分裝過程中,溫度始終保持在設定的分裝溫度。河南培養基自動分裝機

培養基的質量測試:每批培養基制備好以后,應仔細檢查一遍,如發現破裂、水分浸入、色澤異常、棉塞被培養基沾染等、均應挑出棄去。并測定其較終pH.將全部培養基放入36±1°C恒溫箱培養過夜,如發現有菌生長,即棄去。用有關的標準菌株接種1~2管或瓶培養基,培養24~48小時,如無菌生長或生長不好。應追查原因并重復接種一次,如結果仍同前,則該批培養基即應棄去,不能使用。培養基的保存:培養基應存放于冷暗處,較好能放于普通冰箱內。放置時間不宜超過一周,傾注的平板培養基不宜超過3天。每批培養基均必須附有該批培養基制備記錄副頁或明顯標簽。河南培養基自動分裝機

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