分接觸和利用培養基中的養料,適于作生理等研究,由于發酵率高,操作、方便,也常用于發酵工業。(3)半固體培養基。是在液體培養基中加入少量凝固劑而呈半固體狀態。固體培養基的制作步驟:1、首先我們要準備好一個裝有1000ml的燒杯,然后在準備好的杯中在放入500ml的蒸餾水,在將牛肉膏和蛋白胨、氯化鈉這些都溶解在水中。2、其次我們在調節PH值,調節時需要百分之10的氫氧化鈉溶液,將PH值調到7.2,在此也要定容到1000ml,較后在將這些液體都分別放入10個錐形瓶內,每一瓶都裝100ml。固體培養基,一類配制成的固體狀態的基質。黑龍江培養基制備儀哪家好
培養基滅菌方法有哪五種類型:1、輻射滅菌原理方法:輻射滅菌原理:是用高能電磁輻射和細菌核酸的光化學反應引起細菌死亡。常用的是紫外線,X射線和伽馬射線。主要用于室內空氣和器皿的表面消毒。2、干熱滅菌原理方法:干熱滅菌原理:是采用高溫氧化微生物,使蛋白質變性并濃縮電解質以殺死微生物。3、化藥滅菌原理方法,化藥滅菌原理:使用化藥與微生物細胞中的成分發生反應,從而使蛋白質變性酶失活。4、過濾滅菌原理方法:過濾滅菌原理:是使用不能滲透的微生物濾膜進行滅菌。使用方法是使用0.01-0.45毫米的細孔濾膜對壓縮空氣,酶溶液和其他對熱不穩定的復合溶液進行滅菌。5、濕熱滅菌原理方法:在工業生產中,用于滅菌對于培養基,管道和設備,通常將蒸汽加熱到一定溫度并保持一段時間,這稱為濕熱滅菌。濕熱滅菌原理:是直接用蒸汽進行滅菌。蒸汽冷凝后會釋放出大量潛熱。蒸汽具有強大的穿透力,破壞細菌蛋白質和核酸的化學鍵,使酶失活并殺死由于代謝紊亂引起的微生物。河南培養基制備儀品牌牛肉浸液中加入適量的蛋白胨、氯化鈉、磷酸鹽,調節pH7.2~7.6,經滅菌處理后,即為基礎液體培養基。
消毒與滅菌的區別:消毒指使用較為溫和的物理或化學方法單殺死物體表面或內部一部分對人體有害的微生物(不包括芽孢和孢子)。消毒方法常用煮沸消毒法,巴氏消毒法(對于一些不耐高溫的液體)還有化學藥劑(如酒精、氯氣、石炭酸等)消毒、紫外線消毒。滅菌則是指使用強烈的理化因素殺死物體內外所有的微生物,包括芽孢和孢子。滅菌方法有灼燒滅菌、干熱滅菌、高壓蒸汽滅菌。滅菌方法:①接種環、接種針、試管口等使用灼燒滅菌法;②玻璃器皿、金屬用具等使用干熱滅菌法,所用器械是干熱滅菌箱;③培養基、無菌水等使用高壓蒸汽滅菌法,所用器械是高壓蒸汽滅菌鍋。④表面滅菌和空氣滅菌等使用紫外線滅菌法,所用器械是紫外燈。
微生物發酵培養基配制注意事項:①養分濃度和配比合適:微生物只有在培養基中養分濃度合適的情況下才能生長良好是合適的。當養分濃度過低時,不能滿足微生物正常生長的需要。②微生物培養基pH條件控制:培養基的pH必須控制在一定范圍內,以滿足不同種類微生物的生長繁殖或產生代謝物。各種微生物生長繁殖或代謝產物產生的較佳pH條件不同。通常細菌和放線菌適合在7~7.5pH范圍內生長,酵母菌和霉菌一般在4.5~6pH范圍內生長。③微生物培養基原料來源選擇:培養基配制時,應盡可能使用低廉易得的原料作為培養基成分。尤其在發酵行業,培養基用量大,使用成本較低原料實現產品附加價值。例如在微生物單細胞蛋白的工業化生產過程中,制糖業含蔗糖廢液、乳業含乳糖廢液、大豆廢液工業和黑色廢物、造紙工業中含有戊糖和己糖的亞硫酸鹽紙漿等經常被作為培養基原料使用。④成品培養基滅菌處理、為了獲得微生物的純培養物,必須避免被細菌污染,所以對使用的設備和工作場所進行消毒和消毒。對于微生物培養基要進行嚴格的滅菌處理。在發酵工業中,培養基用量很大,利用低成本的原料更體現出其經濟價值。
培養基防止污染應該注意以下事項:確認工作細胞庫是否被污染,確認毒種工作種子批是否被污染,確認所用培養基及其添加成分(如小牛血清、NaHCO3等)是否被污染,均可用細菌、病菌及支原體無菌試驗來確認并排除。同時要對無菌試驗培養基的靈敏度進行驗證。實際生產中,可以從配制好的培養液中取少量加入營養瓊脂于恒溫培養箱內培養,48小時即可觀察有無污染。其它:高壓滅菌設備、過濾除菌設備均應進行驗證,確保滅菌和除菌效果;前者應在投產前及其后的每6個月進行驗證,后者應在每次除菌前、后進行驗證工作(至少應在除菌后進行一次)。另外,應將有毒區與無毒區嚴格分開,并有各自自立的空氣凈化系統及孵室,有毒區對無毒區應保持相對負壓,防止病毒對培養細胞(尤其是細胞庫)的污染。微生物只有在營養物質濃度及其比例合適時才能良好生長。黑龍江培養基制備儀哪家好
培養基由于配制的原料不同,使用要求不同,而貯存保管方面也稍有不同。黑龍江培養基制備儀哪家好
配制好的培養基保存:滅菌以后培養基應該迅速冷卻至所需溫度,避免長時間保存在滅菌鍋內,造成過度滅菌,影響培養基的營養成分或選擇性效果。所配制的培養基的量,應該是在較長保存期限內正好使用完。含染料的培養基應閉光保存;倒好的瓊脂平板如果配制的當天未使用完,應于冷藏保存,如果保存時間超過2天,應將其放入密封的塑料袋中保存;配好的肉湯類培養基如果保存時間超過2個星期,應將其放在帶有螺旋蓋的試管或其它密閉的試管或容器中防止蒸發。黑龍江培養基制備儀哪家好
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