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得到的結果如下圖所示。下圖中顯示的酶是能夠切斷目的基因的酶,因此要排除。所以我們剩下的可以選擇的酶包括Nde1,EcoR1,Pst1共3種酶。下一步打開載體DNA文件。-生命科學軟件打開載體以pGADT7AD為例,查看切入位點的酶有哪些。在篩選的過程中還要注意酶切位點不能把基因切斷。因此在選擇酶切位點時候要保證兩點。1.載體中多克隆位點中包含該限制性內切酶。2.目標基因可酶切的位置不包含該限制性內切酶。點擊圖中標記的地方MCS(多克隆位點)插入基因的位置。-生命科學軟件。山東SnapGene生命科學軟件安裝生物學必備軟件推薦 生命科學軟件。
Snapgene構建載體—酶切位點法-生命科學軟件本文以擬南芥相關基因ATG7為例,打開Tair網頁(專門的擬南芥基因庫網站),找到基因那一欄,輸入目標基因后得到結果。從圖中可以看到描述這一欄寫的這個基因的名稱,其中就包括了ATG7。確認基因后點擊目標基因。-生命科學軟件找到SequenceRNAData:點擊fulllengthCDS.打開頁面后,復制全部序列。打開snapgene,點擊newdnafile。黏貼復制文件,并重命名DNA文件,點擊OK。選擇全部序列后,點擊Features>addfeature>labelname(CDS),type(CDS),點擊OK。
模擬SnapGene提供了美觀,信息豐富的窗口,可用于模擬各種常見的克隆和PCR方法。限制站點指示器確認限制站點適合克隆。-生命科學軟件。以粗體突出顯示獨特的限制性位點,或選擇自動定義UniqueCutters或Unique6+Cutters酶組。限制性克隆可視化克隆過程的所有細節。-生命科學軟件。如果您已經有了一個克隆過程的想法,那么模擬將*花費幾秒鐘。如果克隆過程存在設計缺陷,還可以捕獲并糾正錯誤。PCR模擬標準PCR。使用您自己的引物,或要求SnapGene自動設計引物。產品文件將模板和引物存儲在其歷史記錄中。生命科學軟件 - QuickPHOTO。
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