由于硬骨魚和人類在骨骼發育過程中的基因、信號通路有高度同源性,而且與其他的動物模型相比,斑馬魚具有個體小適合高通量化學篩選、幼魚身體透明易于觀察骨骼發育的特點,所以近年來以斑馬魚為模型的骨骼研究逐漸成為這一領域的熱點。斑馬魚從前向后的脊椎發育過程是非連續的,而是分成兩個不同的區域:前域(包括第3塊椎骨)和后域(包括第4-31塊椎骨)。將斑馬魚脊椎骨鈣化過程分成兩個不同區域是基于第2和第3椎骨的出現晚于第4椎骨。我們利用斑馬魚骨骼發育的規律,攝入生長發育促進劑的斑馬魚脊椎骨發育會加快。脊椎骨染色應用與鈣特異性結合的熒光染料(呈綠色),經熒光顯微鏡觀察脊椎骨的數量。利用斑馬魚模型評價降血脂作用。藥物安全評價公司
我們將受測試斑馬魚分成三組,分別是正常對照組、模型對照組和藥物組。其中正常對照組未攝入霉酚酸嗎啉乙酯,模型對照組與服用眼保護劑組都攝入了等量的霉酚酸嗎啉乙酯(霉酚酸嗎啉乙酯通過溶解到養魚用水中的方式攝入到斑馬魚體內)。眼保護劑組在攝入霉酚酸嗎啉乙酯的同時攝入藍莓葉黃素酯之類的眼保護劑。服用一段時間眼保護劑后,我們對斑馬魚整體做凋亡細胞特異性染色,觀察細胞凋亡,同時制作成病理切片觀察眼部的病理結構變化。藥物安全評價公司利用斑馬魚模型評價骨質疏松癥。
我們將受測試斑馬魚分成三組,分別是底物對照組、正常對照和服用供試品組(供試品通過溶解到養魚用水中攝入到斑馬魚體內),并加入ROS特異性熒光檢測試劑。服用供試品一段時間后,我們使用酶標儀對斑馬魚體內ROS進行熒光定量??梢钥吹?,服用供試品組斑馬魚體內熒光值比正常對照組有明顯升高。1.經過每組30尾斑馬魚的對比實驗,服用供試品組的斑馬魚ROS水平明顯高于正常對照組,與正常對照組存在明顯性差異。2.本實驗證實了該供試品誘發斑馬魚氧化應激。
基于斑馬魚模型實驗,可進行活性化合物發現、高通量藥物篩選、藥效評價、安全性評價、生物學質量控制等臨床前研究,實驗周期短、成本低,結果直觀,助力醫藥企業的藥物研發、品控及宣傳推廣。利用斑馬魚模型評價氧化應激。斑馬魚的基因與人類基因的相似度達到87%,與哺乳動物對外源化學物質的防御機制相當,包括酶的誘導和氧化應激。當生物暴露在環境污染物中,生物可能會發生氧化應激,主要表現為活性氧(ROS)產生和消耗的不平衡。在需氧生物的活細胞中,活性氧被一種由水和脂溶性低分子量自由基清除劑、特異性抗氧化酶組成的抗氧化防御機制解。應用ROS特異性熒光檢測試劑,它的水解產物能被ROS氧化為高熒光物質,用多功能酶標儀檢測熒光值反映氧化應激的程度。本方法已被授予國家發明專利。斑馬魚模型評價心血管毒性。
隨著電子產品的大量使用,用眼的時間和強度已遠超過去,用眼過度引起一系列視力問題。研究表明,高度近視、視網膜疾病、白內障、眼干燥關節綜合征均與眼細胞凋亡相關。斑馬魚的眼部血管結構跟人非常相似,斑馬魚視網膜結構也跟人高度相似。用霉酚酸嗎啉乙酯可以誘發斑馬魚眼細胞凋亡,模擬人的眼部疾病。用特異性熒光染色(呈綠色),患有眼疾的斑馬魚眼細胞凋亡較正常斑馬魚明顯增多,在熒光顯微鏡下可以觀察到。經過每組30尾斑馬魚的對比實驗,眼保護劑組斑馬魚眼細胞與正常對照組相似,并未出現模型對照組的大面積細胞凋亡情況。利用斑馬魚模型評價抗PM2.5功效。藥品的有效性評價
利用斑馬魚模型評價帕金森病防治作用。藥物安全評價公司
利用斑馬魚模型評價保護心肌作用。心肌損傷多數是由于炎癥、缺血、冠狀動脈狹窄等因素引發的心肌損傷,常表現為胸悶、胸痛、氣短、四肢乏力、心慌、惡心嘔吐等癥狀。斑馬魚心臟包含心房、心室和靜脈竇,心電圖譜也與哺乳動物類似。而且斑馬魚生長發育周期短,胚胎透明易觀察,心臟在受精后48小時就發育完全,有利于開展心肌損傷保護劑的研究。鹽酸異丙腎上腺素可以誘導斑馬魚心率加快,心肌持續收縮,心肌耗氧量持續增加,心臟由代償性收縮轉化為失代償,終將導致心肌損傷,使心肌細胞凋亡。經過特異性熒光染色(凋亡細胞呈綠色),心肌損傷的斑馬魚在心臟部位會布滿凋亡細胞,可以明顯被觀察到。藥物安全評價公司
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