蒸餾水）919mlSE培養基·6H2OFe—EDTA1mlA5solution1000×1mldistilledwater958mlSoilExtract（土壤提取液）配置方法取花園土未施過肥，加入蒸餾水1000毫升，瓶口用透氣塞封口，在水浴中沸水加熱2小時，冷卻數小時，在無菌條件下過濾，取上清液，將滅菌蒸餾水加入上清液至總體積1000毫升。土壤提取液保存在4℃備用。CompositionoftheA5solutionAddto100mlofdistilledwater:（加入100ml的蒸餾水）（NH4）：將EDTA和FeCl3·6H2O分別溶于水和HCl（），混勻即可。Na2EDTA1gdistilledwater50mlFeCl3·6H2O81mgHCl（）50mlPr培養基Preparation:to997mLofglass-distilledwater,addgproteosepeptone,gagar,andthefollowingstocksolutions:workingsolutiong/()1mlA5溶液和EDTA-Fe溶液配制方法同上。***培養基薩市（Sabouraud’s）培養基蛋白胨10g，瓊脂20g，麥芽糖40g，水1000ml先把蛋白胨、瓊脂加水后，加熱，不斷攪拌，待瓊脂溶解后，加入40g麥芽糖（或葡萄糖），攪拌，使它溶解，然后分裝，滅菌，備用。本培養菌是培養許多種類***所常用的。馬鈴薯糖瓊脂培養基把馬鈴薯洗凈去皮，取200g切成小塊，加水1000ml，煮沸半小時后，補足水分。在濾液中加入10g瓊脂，煮沸溶解后加糖20g。價格昂貴，是構成動物細胞培養對生產成本的主要部分之一。黃浦區推廣臨床微生物檢驗培養基服務保障

    培養基半固體培養基指在液體培養基中加入少量的凝固劑而配制成的半固體狀態的培養基。培養基脫水培養基又稱預制干燥培養基，指含有除水分外的一切成分的商品培養基。培養基微生物分類編輯語音選擇性培養基：一類根據某微生物的特殊營養要求或其對某化學、物理因素的抗性而設計的培養基，具有使混合菌樣中的劣勢菌變成優勢菌的功能，***用于菌種篩選等領域。鑒別培養基：一類在成分中加有能與目的菌的無色代謝產物發生顯色反應的指示劑，從而達到只須用肉眼辨別顏色就能方便的從近似菌落中找出目的菌菌落的培養基。例如，伊紅美藍乳糖培養基（EMB）。培養基常見培養基編輯語音細菌培養基牛肉膏瓊脂培養基牛肉膏，蛋白胨，氯化鈉，瓊脂，水100ml在燒杯內加水100ml，放入牛肉膏、蛋白胨和氯化鈉，用蠟筆在燒杯外作上記號后，放在火上加熱。待燒杯內各組分溶解后，加入瓊脂，不斷攪拌以免粘底。等瓊脂完全溶解后補足失水，用10%鹽酸或10%的氫氧化鈉調整pH值到，分裝在各個試管里，加棉花塞，用高壓蒸汽滅菌：、121攝氏度維持15-30分鐘。牛心培養基細菌培養基取新鮮牛心（除去脂肪和血管）250克，用刀細細剁成肉末后，加入500毫升蒸餾水和5克蛋白胨。在燒杯上做好記號，煮沸。浦東新區常見臨床微生物檢驗培養基誠信互利并應具備適當的監測系統。

    價格昂貴，是構成動物細胞培養對生產成本的主要部分之一。血清的質量標準血清質量高低取決于兩方面因素：一是取材對象，二是取材過程。用于取材的動物應健康無病并且在指定的出生天數之內，取材過程應嚴格按照操作規程執行，制備出的血清要經過嚴格的質量鑒定。WHO公布的《用動物細胞體外培養生產生物制品規程》中的要求：1．牛血清必須來自有文件證明無牛海綿狀腦病的牛群或國家。并應具備適當的監測系統。2．有些國家還要求牛血清來自未用過反芻動物蛋白飼料的牛群。3．證明所用牛血清中不含對所生產疫苗病毒的***物。4．血清要通過濾膜過濾除菌，保證無菌。5．無細菌、霉菌、支原體和病毒的污染，有些國家要求無細菌噬菌體污染。6．對細胞有良好的支持繁殖作用。我國在對牛血清的質量2000年版《中國生物制品主要原輔料質控標準》中提出比較嚴格的標準要求。包括蛋白質含量，細菌、***、支原體、牛病毒、大腸桿菌噬菌體、細菌內***，支持細胞增殖檢查。培養基培養基配制編輯語音一、配制用水培養基的大部分是水，所以水的質量直接影響培養基的質量。按Waymouth標準，水的電阻應為200萬歐姆，一般實驗室里以玻璃蒸餾器制備的雙蒸水或三蒸水可以符合使用條件。

    如血漿、血清、***、雞胚浸出液等。組織培養技術建立早期，體外培養細胞都是利用天然培養基。但是由于天然培養基制作過程復雜、批間差異大，因此逐漸為合成培養基所替代。***使用的天然培養基是血清，另外各種組織提取液、促進細胞貼壁的膠原類物質在培養某些特殊細胞也是必不可少。血清種類目用于組織培養的血清主要是牛血清，培養某些特殊細胞也用人血清、馬血清等。選擇用牛血清培養細胞的原因：來源充足、制備技術成熟、經過長時間的應用考驗人們對其有比較深入的理解。牛血清對絕大多數哺乳動物細胞都是適合的，但并不排除在培養某種細胞時使用其他動物血清更合適。牛血清是細胞培養中用量**大的天然培養基，含有豐富的細胞生長必須的營養成份，具有極為重要的功能。牛血清分為小牛血清、新牛血清、胎牛血清。胎牛血清應取自剖腹產的胎牛；新牛血清取自出生24小時之內的新生牛；小牛血清取自出生10-30天的小牛。顯然，胎牛血清是品質**高的，因為胎牛還未接觸外界，血清中所含的抗體、補體等對細胞有害的成分**少。血清樣本血清的主要成分血清是由血漿去除纖維蛋白而形成的一種很復雜的混合物，其組成成份雖大部分已知，但還有一部分尚不清楚。取材過程應嚴格按照操作規程執行，制備出的血清要經過嚴格的質量鑒定。

    調整pH值到6。分裝，滅菌，備用。該培養基用于培養和保存靈芝、平菇、香菇等食用菌菌種。***的培養基在植物組織培養時，通過調節IAA和CTK的比值能影響愈傷組織分化出根或芽。CTK/IAA高時，愈傷組織分化芽。CTK/IAA低時，分化根；CTK/IAA比例適中維持愈傷組織不分化。愈傷組織誘導培養基制備以MS培養基母液為基礎，向潔凈鋁鍋中順序加入大量元素20×母液100mL，微量元素100×母液20mL，鐵鹽100×母液20mL，維生素100×母液20mL，肌醇200×母液10mL，甘氨酸200×母液10mL，配制得MS培養基后，再加入·L-1的BA8mL，·L-1的NAA8mL。然后加入實際配制培養基體積約2/3-3/4的蒸餾水，加入40g蔗糖后攪拌使其溶化，用·L-1的NaOH和mol·L-1的HCl調整pH值至。加入14g瓊脂，將鋁鍋置于電爐上，攪拌加熱使瓊脂完全溶化，然后用蒸餾水定容至終體積2L，繼續加熱幾分鐘使之混合均勻后分裝于三角瓶中。******葉片愈傷組織誘導取一無菌培養皿，用解剖刀切取1-2片無菌苗葉片置于無菌培養皿中，并用解剖刀將葉片切成2mm2左右的小片，然后將其接種于準備好的培養基上，每瓶接種5小片，一共接種6瓶。接種后的三角平置于24條件下黑暗培養1周。一般實驗室里以玻璃蒸餾器制備的雙蒸水或三蒸水可以符合使用條件。黃浦區常見臨床微生物檢驗培養基地方

無細菌、霉菌、支原體和病毒的污染，有些國家要求無細菌噬菌體污染。黃浦區推廣臨床微生物檢驗培養基服務保障

    二、培養基培養基有天然、人工兩種。一般實驗室使用的是RPMI-1640粉末培養基，以雙蒸或三蒸水配制。NaHCO3（或HCl）調pH至，若pH值超過，則大多數細胞不能生長。RPMI-1640不耐高壓滅菌，使用前需經滅菌μm孔徑濾膜濾過處理。三、血清培養中常使用小牛血清（或胎牛血清）。血清亦不能高壓滅菌，無菌的小牛血清需在56℃水浴30分鐘滅活補體，置4℃冰箱存放待用。配制時含量視培養細胞種類、時間而定，一般用10—15%。由于血清成分復雜、條件不易控制，可選用無血清培養基。四、***素為防止培養時期細菌的污染，可在培養基中添加適當***素，一般用量與組織細胞培養相同：卡那霉素100單位/毫升，或雙抗--青霉素100單位/毫升，鏈霉素100微克/毫升。五、植物血凝素（PHA）非增殖期的細胞不能制備染色體，如人外周血淋巴細胞，但在離體培養過程中，在PHA的作用下，可被刺激轉化為淋巴母細胞而進入有絲分裂。經實驗測定其分裂高峰分別于培養后44-48小時和68-72小時。PHA有粘多糖，蛋白質兩種重要成分。粘多糖促使有絲分裂，蛋白質起凝集作用。PHA***的細胞數隨其濃度而增加，直至全部免疫活性細胞均被***為止，但PHA濃度過高會引起凝集，一般采用4%濃度為好。黃浦區推廣臨床微生物檢驗培養基服務保障

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