用于培養霉菌的加入蔗糖，用于培養酵母菌的加入葡萄糖），補足水分，分裝，滅菌，備用。把這培養基的pH值調到，配方中的糖，如用葡萄糖還可用來培養放線菌和芽孢桿菌。豆芽汁培養基黃豆芽100g，瓊脂15g，葡萄糖20g，水1000ml洗凈黃豆芽，加水煮沸30分鐘。用紗布過濾，濾液中加入瓊脂，加熱溶解后放入糖，攪拌使它溶解，補足水分到1000ml，分裝，滅菌，備用。把這培養基的pH值調到，可用來培養細菌和放線菌。豌豆瓊脂培養基豌豆80粒，瓊脂5g，水200ml瓊脂取80粒干豌豆加水，煮沸1小時，用紗布過濾后，在濾液中加入瓊脂，煮沸到溶解，分裝，滅菌，備用。食用菌菌種培養基馬鈴薯-蔗糖-瓊脂培養基20%馬鈴薯煮汁1000ml，蔗糖20g，瓊脂18g把馬鈴薯洗凈去皮后，切成小塊。稱取馬鈴薯小塊200g，加水1000ml，煮沸20分鐘后，過濾。在濾汁中補足水分到1000ml，即成20%馬鈴薯煮汁。在馬鈴薯煮汁中加入瓊脂和蔗糖，煮沸，使它溶解后，補足水分，分裝，滅菌，備用。使用該培養基對pH值要求不嚴格，可以不測定。綜合馬鈴薯培養基20%馬鈴薯煮汁1000ml，磷酸二氫鉀3g，硫酸鎂，葡萄糖20g，維生素10mg，瓊脂18g先配制20%馬鈴薯煮汁，方法同上。在煮汁中加入上述各種組分，加熱溶解后補足水分。無細菌、霉菌、支原體和病毒的污染，有些國家要求無細菌噬菌體污染。黃浦區提供臨床微生物檢驗培養基創新服務

    培養基半固體培養基指在液體培養基中加入少量的凝固劑而配制成的半固體狀態的培養基。培養基脫水培養基又稱預制干燥培養基，指含有除水分外的一切成分的商品培養基。培養基微生物分類編輯語音選擇性培養基：一類根據某微生物的特殊營養要求或其對某化學、物理因素的抗性而設計的培養基，具有使混合菌樣中的劣勢菌變成優勢菌的功能，***用于菌種篩選等領域。鑒別培養基：一類在成分中加有能與目的菌的無色代謝產物發生顯色反應的指示劑，從而達到只須用肉眼辨別顏色就能方便的從近似菌落中找出目的菌菌落的培養基。例如，伊紅美藍乳糖培養基（EMB）。培養基常見培養基編輯語音細菌培養基牛肉膏瓊脂培養基牛肉膏，蛋白胨，氯化鈉，瓊脂，水100ml在燒杯內加水100ml，放入牛肉膏、蛋白胨和氯化鈉，用蠟筆在燒杯外作上記號后，放在火上加熱。待燒杯內各組分溶解后，加入瓊脂，不斷攪拌以免粘底。等瓊脂完全溶解后補足失水，用10%鹽酸或10%的氫氧化鈉調整pH值到，分裝在各個試管里，加棉花塞，用高壓蒸汽滅菌：、121攝氏度維持15-30分鐘。牛心培養基細菌培養基取新鮮牛心（除去脂肪和血管）250克，用刀細細剁成肉末后，加入500毫升蒸餾水和5克蛋白胨。在燒杯上做好記號，煮沸。浦東新區專注臨床微生物檢驗培養基認真負責一般實驗室里以玻璃蒸餾器制備的雙蒸水或三蒸水可以符合使用條件。

    二、培養基培養基有天然、人工兩種。一般實驗室使用的是RPMI-1640粉末培養基，以雙蒸或三蒸水配制。NaHCO3（或HCl）調pH至，若pH值超過，則大多數細胞不能生長。RPMI-1640不耐高壓滅菌，使用前需經滅菌μm孔徑濾膜濾過處理。三、血清培養中常使用小牛血清（或胎牛血清）。血清亦不能高壓滅菌，無菌的小牛血清需在56℃水浴30分鐘滅活補體，置4℃冰箱存放待用。配制時含量視培養細胞種類、時間而定，一般用10—15%。由于血清成分復雜、條件不易控制，可選用無血清培養基。四、***素為防止培養時期細菌的污染，可在培養基中添加適當***素，一般用量與組織細胞培養相同：卡那霉素100單位/毫升，或雙抗--青霉素100單位/毫升，鏈霉素100微克/毫升。五、植物血凝素（PHA）非增殖期的細胞不能制備染色體，如人外周血淋巴細胞，但在離體培養過程中，在PHA的作用下，可被刺激轉化為淋巴母細胞而進入有絲分裂。經實驗測定其分裂高峰分別于培養后44-48小時和68-72小時。PHA有粘多糖，蛋白質兩種重要成分。粘多糖促使有絲分裂，蛋白質起凝集作用。PHA***的細胞數隨其濃度而增加，直至全部免疫活性細胞均被***為止，但PHA濃度過高會引起凝集，一般采用4%濃度為好。

    應重新制備。待大部分固體成分溶化后，再用較小火力使所有成分完全溶化。迄至煮沸。如為瓊脂培養基，應先用一部分水將瓊脂溶化，用另一部分水溶化其它成分，然后將兩溶液充分混合。在加熱溶化過程中，因蒸發而丟失的水分，**后必須加以補足。培養基pH的初步調整培養基各成分完全溶解后，應進行pH的初步調正，因培養基在加熱消毒過程中、pH會有所變化，例如，牛肉浸液約可降低。而腸浸液pH卻會有***的升高。因此，對這個步驟，操作者應隨時注意探索經驗、以期能掌握培養基的**終pH，保證培養基的質量。pH調正后，還應將培養基煮沸數分鐘，以利培養基沉淀物的析出。培養基注意事項編輯語音培養基在使用前通過高壓或過濾滅菌。防止污染應該注意以下事項：確認工作細胞庫是否被污染，確認毒種工作種子批是否被污染，確認所用培養基及其添加成分（如小牛血清、NaHCO3等）是否被污染，均可用細菌、***及支原體無菌試驗來確認并排除。同時要對無菌試驗培養基的靈敏度進行驗證。實際生產中，可以從配制好的培養液中取少量加入營養瓊脂于恒溫培養箱內培養，48小時即可觀察有無污染。其它：高壓滅菌設備、過濾除菌設備均應進行驗證，確保滅菌和除菌效果。有些國家還要求牛血清來自未用過反芻動物蛋白飼料的牛群。

    對培養基一般采取高壓蒸汽滅菌，一般培養基用，℃條件下維持15-30min可達到滅菌目的。在高壓蒸汽滅菌過程中，長時間高溫會使某些不耐熱物質遭到破壞，如使糖類物質形成氨基糖、焦糖，因此含糖培養基常在，℃15-30分鐘進行滅菌，某些對糖類要求較高的培養基，可先將糖進行過濾除菌或間歇滅菌，再與其他已滅菌的成分混合；長時間高溫還會引起磷酸鹽、碳酸鹽與某些陽離子（特別是鈣、鎂、鐵離子）結合形成難溶性復合物而產生沉淀，因此，在配制用于觀察和定量測定微生物生長狀況的合成培養基時，常需在培養基中加入少量螯合劑，避免培養基中產生沉淀，常用的螯合劑為乙二胺四乙酸（EDTA）。還可以將含鈣、鎂、鐵等離子的成分與磷酸鹽、碳酸鹽分別進行滅菌，然后再混合，避免形成沉淀；高壓蒸汽滅菌后，培養基pH會發生改變（一般使pH降低），可根據所培養微生物的要求，在培養基滅菌前后加以調整。在配制培養基過程中，泡沫的存在對滅菌處理極不利，因為泡沫中的空氣形成隔熱層，使泡沫中微生物難以被殺死。因而有時需要在培養基中加入消泡沫劑以減少泡沫的產生，或適當提高滅菌溫度。價格昂貴，是構成動物細胞培養對生產成本的主要部分之一。徐匯區個人臨床微生物檢驗培養基售后服務

WHO公布的《用動物細胞體外培養生產生物制品規程》中的要求。黃浦區提供臨床微生物檢驗培養基創新服務

    培養基制備基本方法編輯語音培養基配方的選定同一種培養基的配方在不同著作中常會有某些差別。因此，除所用的是標準方法，應嚴格按其規定進行配制外，一般均應盡量收集有關資料，加以比較核對，再依據自己的使用目的加以選用，記錄其來源。培養基的制備記錄每次制備培養基均應有記錄，包括培養基名稱，配方及其來源，和各種成份的牌號。**終pH值、消毒的溫度和時間制各的日期和制備者等，記錄應復制一份，原記錄保存備查，復制記錄隨制好的培養基一同存放、以防發生混亂。培養基成分的稱取培養基的各種成分必須精確稱取并要注意防止錯亂，**好一次完成，不要中斷。可將配方置于傍側，每稱完一種成分即在配方上做出記號，并將所需稱取的藥品一次取齊，置于左側，每種稱取完畢后，即移放于右側。完全稱取完畢后，還應進行一次檢查。培養基各成份的混合和溶化培養基所用化學藥品均應是化學純的。使用的蒸煮鍋不得為銅鍋或鐵鍋，以防有微量銅或鐵混入培養基中，使細菌不易生長。**好使用不銹鋼鍋加熱溶化，也可放入大燒杯或大燒瓶中置高壓蒸汽滅菌器或流動蒸汽消毒器中蒸煮溶化。在鍋中溶化時、可先用溫水加熱并隨時擾動，以防焦化、如發現有焦化現象、該培養基即不能使用。黃浦區提供臨床微生物檢驗培養基創新服務

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